HiMedia KBM004-20KT Биохимический набор для подвижности V. cholerae HiMotility (20 наборов)

Биохимический набор для подвижности V. cholerae HiMotility KBM004-20KT производства HiMedia. Предназначен для скрининга проб пищевых продуктов и соответствующих клинических образцов с целью идентификации Vibrio cholerae на основе анализа подвижности и биохимических свойств.

Область применения

Набор KBM004 используется для изоляции, идентификации и количественного определения Vibrio cholerae и Vibrio parahaemolyticus. Методика тестов разработана в соответствии со стандартом IS 5887 (часть V).

Принцип измерения

Система представляет собой стандартизированный колориметрический набор, основанный на определении подвижности микроорганизмов, утилизации углеводов и других специфических биохимических реакциях. Принцип работы базируется на изменении pH среды и использовании субстратов: метаболические изменения V. cholerae при инкубации приводят к изменению цвета среды, что интерпретируется визуально или после добавления специфических реагентов.

Комплект поставки

Набор рассчитан на проведение 200 тестов (содержит 20 индивидуальных наборов по 10 тестов в каждом):

• 20 наборов KBM004.
• Техническая вставка к продукту.
• Таблица интерпретации результатов и лист регистрации данных.
• Индекс идентификации.
• Реагент Барритта A (R029).
• Реагент Барритта B (R030).

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения: 2–8 °C.
• Срок годности: 12 месяцев.

Методика проведения анализа

Подготовка инокулята

Набор KBM004 нельзя использовать напрямую для анализа клинических или пищевых проб. Организм должен быть предварительно изолирован и очищен.

1. Изолируйте микроорганизм на питательном агаре (с кровью или без).
2. Перенесите одну изолированную колонию в 5 мл щелочной пептонной воды (M618).
3. Инкубируйте при 35–37 °C в течение 6–8 часов до достижения мутности инокулята $\ge 1,0$ OD при 620 нм. Примечание: при мутности инокулята менее 1,0 OD возможны ложноотрицательные результаты.

Процедура инокуляции

1. Асептически откройте набор, снимите защитную фольгу.
2. Выполните укольный посев в 1-ю лунку. Вторую лунку не инокулировать.
3. В остальные лунки (с 3-й по 12-ю) внесите по одной петле инокулята укольным методом так, чтобы посев достиг дна лунки.
4. Инкубируйте при температуре 35–37 °C в течение 24–48 часов.

Интерпретация результатов

Подвижность и питательный агар с ТТК (лунки 1 и 2)

• Подвижность: наблюдается как перемещение роста из 1-й лунки во 2-ю, сопровождающееся покраснением среды.
• Питательный агар + ТТК: проявляется покраснением в 1-й лунке и в тех областях 2-й лунки, куда переместились подвижные организмы.

Тест Вогеса-Проскауэра (лунка 3)

1. Добавьте 3–4 капли реагента Барритта A (5 % $\alpha$-нафтола в абсолютном этаноле, R029) и одну каплю реагента Барритта B (40 % гидроксида калия, R030).
2. Положительная реакция: появление розово-красного окрашивания в течение 10 минут.
3. Отрицательная реакция: отсутствие изменения цвета или слабый медный оттенок.

Тесты на декарбоксилазу аминокислот (лунки 4, 5, 6)

• Положительная реакция: изменение цвета с оливково-зеленого на пурпурный.
• Отрицательная реакция: изменение цвета с оливково-зеленого на желтый или отсутствие изменений.

Каталазный тест (лунка 7)

1. Снимите петлей порцию роста с поверхности 7-й лунки.
2. Опустите петлю в чистую пробирку с 3 % раствором H₂O₂ (свежеприготовленным).
3. Положительная реакция: появление пузырьков (эффузия) на поверхности петли.
4. Отрицательная реакция: отсутствие пузырьков.

Продукция H₂S (лунка 8)

• Положительная реакция: появление черного окрашивания среды после инкубации.
• Отрицательная реакция: отсутствие почернения.

Ферментация углеводов (лунки 9–12)

• Положительная реакция: изменение цвета среды с соломенного на светло-розовый вследствие образования кислоты.
• Отрицательная реакция: среда сохраняет соломенный цвет.

Важные примечания и меры предосторожности

• Реагенты перед использованием следует довести до комнатной температуры.
• При слабой реакции в тестах на ферментацию углеводов следует зафиксировать результат как «+» и продолжить инкубацию еще на 24 часа. Соломенный цвет через 72 часа инкубации считается отрицательным результатом.
• Все микробиологические культуры следует рассматривать как потенциально патогенные.
• 3 % раствор H₂O₂ является едким. При попадании на кожу немедленно промыть область 70 % этанолом (не водой) для нейтрализации действия.
• Использованные наборы и инструменты (петли, пипетки) подлежат дезинфекции с последующим автоклавированием или сжиганием.

Индекс идентификации V. cholerae

Таблица интерпретации результатов