HiMedia KBM002-20KT Биохимический набор для подвижности сальмонелл HiMotility (20 наборов)

Биохимический набор для подвижности сальмонелл HiMotility HiMedia KBM002-20KT (20 наборов) для идентификации грамотрицательных видов Salmonella. Система предназначена для скрининга патогенных организмов в образцах фекалий, мочи, крови и других клинических материалах, а также для валидации известных лабораторных штаммов.

Принцип измерения

Набор представляет собой стандартизированную колориметрическую систему идентификации, включающую семь традиционных биохимических тестов, в том числе тест на подвижность и четыре теста на утилизацию углеводов. Работа системы основана на принципе изменения pH и утилизации субстрата: в процессе инкубации Salmonella вызывает метаболические изменения, которые проявляются в виде спонтанного изменения цвета среды, интерпретируемого визуально.

Методика проведения анализа

Подготовка инокулята

Набор KBM002 нельзя использовать непосредственно для клинических образцов; организмы должны быть предварительно изолированы и очищены. Допускается использование только чистых культур.

1. Изолируйте исследуемый организм на общее питательное средство, например, питательный агар (M001), или на дифференциальную среду, такую как агар МакКонки (M082).
2. Выберите одну изолированную колонию и инокулируйте её в 5 мл бульона BHI (Brain Heart Infusion).
3. Инкубируйте при температуре 35–37 °C в течение 4–6 часов до достижения мутности инокулята $\ge$ 0,1 OD при 620 нм или стандарта 0,5 по МакФарланду.
4. В качестве альтернативы можно использовать гомогенную суспензию в 2–3 мл стерильного физиологического раствора, доведенную до плотности 0,1 OD при 620 нм или 0,5 по МакФарланду.

Важно:

• При мутности инокулята менее 0,1 OD возможны ошибочные ложноотрицательные результаты.
• Результаты более выражены при использовании обогащенной культуры, чем при использовании суспензии.

Инокуляция набора

1. В асептических условиях откройте набор и снимите защитную фольгу.
2. Выполните инокуляцию методом «укола» (stab inoculation) в 1-ю лунку. Вторую лунку инокулировать запрещено.
3. Инокулируйте остальные лунки (№ 3–12), вводя петлей с инокулятом в каждую лунку до достижения дна.

Инкубация

• Температура инкубации: 35–37 °C.
• Продолжительность инкубации: 18–24 часа.

Интерпретация результатов

Определение подвижности (Лунки № 1 и 2)

Подвижность определяется по перемещению розового роста из 1-й лунки во 2-ю лунку.

Таблица интерпретации тестов

Особенности интерпретации

• При тестах на ферментацию углеводов некоторые микроорганизмы могут давать слабую реакцию. В этом случае результат записывается как «+», и инкубация продлевается до 48 часов. Оранжевый цвет через 48 часов считается отрицательным результатом.
• Для тестов на утилизацию лизина и аргинина может потребоваться инкубация до 48 часов.
• Возможны противоречивые результаты из-за мутаций или особенностей сред, использованных для изоляции и культивирования.

Индекс идентификации

Группа I и основные серотипы

Группы II–VI

Условные обозначения:

• + = Положительный результат (более 90 % штаммов)
• - = Отрицательный результат (более 90 % штаммов)
• V = Вариабельный результат (11–89 % штаммов)

Меры предосторожности и утилизация

• Клинические образцы и микробные культуры следует рассматривать как потенциально патогенные.
• При инокуляции и работе с наборами необходимо строго соблюдать асептические условия.
• После использования наборы и инструменты (пипетки, петли и т. д.) должны быть дезинфицированы подходящим средством, а затем утилизированы путем сжигания или автоклавирования в одноразовых пакетах.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение при получении: 2–8 °C.
• Срок годности: 12 месяцев.

Комплект поставки

В каждом наборе содержится материал для проведения 10 тестов:

• 10 комплектов KBM002.
• Технический вкладыш.
• Таблица интерпретации результатов и лист регистрации данных.