HiMedia KBM001-10KT Биохимический набор для подвижности E. coli HiMotility (10 наборов)

Биохимический набор для подвижности E. coli HiMotility HiMedia KBM001-10KT Биохимический набор для подвижности E. coli HiMotility (10 наборов) рассчитан на выполнение 10 тестов и включает стандартизированную цветометрическую систему идентификации. Набор применяется для идентификации и дифференциации Escherichia coli по биохимическим реакциям, при этом для анализа используются только предварительно выделенные чистые культуры, а не клинические образцы напрямую.

Идентификация изделия

Назначение и область применения

KBM001 предназначен для идентификации и дифференциации Escherichia coli. Escherichia coli — грамотрицательные палочковидные коккобациллы, ферментирующие лактозу; микроорганизмы этого вида часто выделяют из пищевых продуктов, фекалий, воды и других клинически значимых образцов.

Набор может использоваться:

• для скрининга патогенных микроорганизмов;
• для подтверждения принадлежности известных лабораторных штаммов;
• для идентификации микроорганизмов по идентификационному индексу, поставляемому в комплекте.

KBM001 не предназначен для непосредственного анализа клинических образцов: микроорганизмы необходимо предварительно выделить и очистить, а для постановки теста использовать только чистые культуры.

Принцип измерения

KBM001 представляет собой стандартизированную цветометрическую систему идентификации, включающую семь традиционных биохимических тестов, в том числе тест на подвижность и четыре теста на утилизацию углеводов.

Тесты основаны на изменении pH и утилизации субстратов. При инкубации Escherichia coli вызывает метаболические изменения, сопровождающиеся самопроизвольным изменением цвета питательных сред. Результат интерпретируют визуально либо после добавления соответствующего реагента, если это предусмотрено методикой.

Комплект поставки

• Материалы для выполнения 10 тестов.
• 10 наборов KBM001.
• Техническая инструкция.
• Таблица интерпретации результатов.
• Лист регистрации результатов.
• Реагент Ковача R008 для теста на индол.
• Сульфаниловая кислота 0,8 % R015 для теста на восстановление нитратов.
• Реагент N,N-диметил-1-нафтиламина R009 для теста на восстановление нитратов.

Методика проведения анализа

Подготовка инокулята

1. Выделите и очистите исследуемый микроорганизм. Непосредственное использование KBM001 с клиническими образцами не допускается; применяйте только чистые культуры.
2. Выделите микроорганизм на обычной среде, например на питательном агаре M001, или на дифференциальной среде, например на агаре МакКонки M082.
3. Отберите одну хорошо изолированную колонию.
4. Инокулируйте колонию в 5 мл бульона для инфузии мозга и сердца.
5. Инкубируйте при 35–37 °C в течение 4–6 ч, пока мутность инокулята не достигнет значения ≥0,10D при 620 нм или 0,5 стандарта МакФарланда.
6. В качестве альтернативы приготовьте однородную суспензию в 2–3 мл стерильного физиологического раствора. Плотность суспензии необходимо скорректировать до 0,10D при 620 нм или 0,5 стандарта МакФарланда.

При мутности инокулята менее 0,1 оптической плотности могут быть получены ошибочные ложноотрицательные результаты. Более выраженные результаты получают при использовании обогащённой культуры, а не суспензии.

Инокуляция набора

1. Вскройте набор с соблюдением асептических условий.
2. Снимите герметизирующую фольгу.
3. Инокулируйте проколом лунку № 1.
4. Лунку № 2 не инокулируйте.
5. Оставшиеся лунки № 3–12 инокулируйте по отдельности проколом, используя по одной петле инокулята для каждой лунки, кроме лунки № 2.
6. Инокулят должен достигать дна каждой лунки.

Инкубация

Температура инкубации: 35–37 °C.

Продолжительность инкубации: 18–24 ч.

Интерпретация результатов

Интерпретируйте результаты в соответствии с данными таблицы интерпретации результатов.

Тест на подвижность: лунки № 1 и 2

Подвижность выявляют по перемещению сине-зелёного роста из первой лунки во вторую.

Тест на индол: лунка № 3

1. Добавьте 1–2 капли реагента Ковача R008 для определения индола.
2. Появление красновато-розовой окраски в течение 10 с указывает на положительную реакцию.
3. При отрицательном результате реагент остаётся бледно окрашенным.

Тест на восстановление нитратов: лунка № 6

1. Добавьте 1–2 капли сульфаниловой кислоты R015.
2. Добавьте 1–2 капли реагента N,N-диметил-1-нафтиламина R009.
3. Немедленное появление розово-красной окраски после добавления реагентов указывает на положительную реакцию.

Идентификационный индекс видов Escherichia

Идентификационный индекс составлен на основании доли штаммов, демонстрирующих соответствующие реакции, а также лабораторных результатов и стандартных справочных данных:

• + — положительная реакция, более 90 % штаммов;
• − — отрицательная реакция,