HiMedia KBM001-10KT Биохимический набор для подвижности E. coli HiMotility (10 наборов)

HiMedia·Арт.: 0048249·Арт. произв.: KBM001-10KT

HiMedia KBM001-10KT Биохимический набор для подвижности E. coli HiMotility (10 наборов)

Name: HiMedia KBM001-10KT Биохимический набор для подвижности E. coli HiMotility (10 наборов)
Brand: HiMedia
SKU: 0048249
Price: 15511 RUB
Availability: PreOrder

Под заказ15 511 руб.

Биохимический набор для идентификации Escherichia coli HiMedia KBM001-10KT HiMotility (10 наборов). Система предназначена для дифференциации грамотрицательных лактозоферментирующих кокобациллярных палочек, выделяемых из пищевых продуктов, фекалий, воды и клинических образцов.

Описание

Принцип работы

Набор KBM001 представляет собой стандартизированную колориметрическую систему, включающую семь традиционных биохимических тестов, в том числе тест на подвижность и четыре теста на утилизацию углеводов. Работа системы основана на изменении pH и использовании субстратов: в процессе инкубации E. coli вызывает метаболические изменения, которые проявляются в виде спонтанного изменения цвета среды. Результаты интерпретируются визуально или после добавления специфических реагентов.

Область применения

Набор используется для скрининга патогенных организмов и валидации известных лабораторных штаммов. Полный список идентифицируемых организмов приведен в идентификационном индексе, входящем в комплект.

Комплект поставки

10 наборов KBM001 (каждый рассчитан на 10 тестов).
Технический вкладыш.
Таблица интерпретации результатов и лист регистрации данных.
Реагент Ковакса (R008) для теста на индол.
Сульфаниловая кислота 0,8 % (R015) для теста на восстановление нитратов.
Реагент N,N-диметил-1-нафтиламин (R009) для теста на восстановление нитратов.

Методика проведения анализа

1. Подготовка инокулята

Набор нельзя использовать непосредственно для клинических образцов; требуется предварительное выделение и очистка культуры.

Выделите организм на общей среде (например, питательный агар M001) или дифференциальной среде (например, агар МакКонки M082).
Перенесите одну изолированную колонию в 5 мл бульона Brain Heart Infusion (BHI).
Инкубируйте при 35–37 °C в течение 4–6 часов до достижения мутности $\approx 0,10\text{D}$ при 620 нм или стандарта 0,5 по Макфарланду.
Альтернативно можно использовать гомогенную суспензию в 2–3 мл стерильного физиологического раствора с аналогичной плотностью.

Важно: при мутности инокулята менее 0,1 OD возможны ложноотрицательные результаты. Использование обогащенной культуры предпочтительнее суспензии.

2. Инокуляция набора

Асептически откройте набор и снимите защитную фольгу.
Выполните укольный посев в 1-ю лунку. Вторую лунку не инокулировать.
Инокулируйте остальные лунки (с № 3 по № 12), внося петлёй с инокулятом в каждую лунку так, чтобы материал достиг дна.

3. Инкубация

Температура: 35–37 °C.
Продолжительность: 18–24 часа.

Интерпретация результатов

Особенности анализа по лункам

Подвижность (лунка № 1): оценивается по перемещению голубовато-зелёного роста из 1-й лунки во 2-ю.
Тест на индол (лунка № 3): добавьте 1–2 капли реагента Ковакса (R008). Появление красно-розового цвета в течение 10 секунд указывает на положительную реакцию. При отрицательной реакции реагент остается бесцветным.
Тест на восстановление нитратов (лунка № 6): добавьте 1–2 капли сульфаниловой кислоты (R015) и 1–2 капли реагента N,N-диметил-1-нафтиламина (R009). Немедленное появление розово-красного цвета указывает на положительную реакцию.

Таблица интерпретации результатов

№	Тест	Реагенты после инкубации	Принцип	Исходный цвет среды	Положительная реакция	Отрицательная реакция
1	Подвижность	—	—	Бесцветная	Виден голубовато-зелёный рост	Рост отсутствует
2	Подвижность	—	Определение подвижности	Бесцветная	Перемещение голубовато-зелёного роста из 1-й во 2-ю лунку	Рост отсутствует
3	Индол	1–2 капли реагента Ковакса	Деаминирование триптофана	Бесцветная	Красно-розовый	Бесцветная
4	Утилизация цитрата	—	Использование цитрата как единственного источника углерода	Зелёная	Синяя	Зелёная
5	Глюкуронидаза	—	Активность глюкуронидазы	Бесцветная	Голубовато-зелёная	Бесцветная
6	Восстановление нитратов	1–2 капли сульфаниловой кислоты и 1–2 капли N,N-диметил-1-нафтиламина	Восстановление нитратов	Бесцветная	Розово-красный	Бесцветная
7	ONPG	—	$\beta$ -галактозидазная активность	Бесцветная	Жёлтая	Бесцветная
8	Утилизация лизина	—	Декарбоксилирование лизина	Оливково-зелёный $\rightarrow$ светло-фиолетовый	Фиолетовый / тёмно-фиолетовый	Жёлтая
9	Лактоза	—	Утилизация лактозы	Розово-красный / красный	Жёлтая	Красная / розовая
10	Глюкоза	—	Утилизация глюкозы	Розово-красный / красный	Жёлтая	Красная / розовая
11	Сахароза	—	Утилизация сахарозы	Розово-красный / красный	Жёлтая	Красная / розовая
12	Сорбитол	—	Утилизация сорбитола	Розово-красный / красный	Жёлтая	Красная / розовая

Идентификационный индекс видов Escherichia

Тесты	Подвижность	Подвижность	Индол	Цитрат	Глюкуронидаза	Нитраты	ONPG	Лизин	Лактоза	Глюкоза	Сахароза	Сорбитол
E. coli	+	+	+	+	+	+	+	+	+	+	+	+
E. coli, инактивир.	-	V	+	+	+	V	+	+	+	+	+
E. fergusonii	+	V	+	+	+	+	V	+	+	+	+
E. hermannii	+	V	+	+	+	+	+	V	+	+	+
E. vulneris	+	+	V	+	+	V	+	V	+	+	-
E. blattae	-	-	-	V	+	+	-	-	-	-	-

Условные обозначения:

+ = Положительная реакция (более 90 % штаммов)
- = Отрицательная реакция (более 90 % штаммов)
V = Вариабельная реакция (11–89 % штаммов)

Технические примечания и ограничения

При тестах на ферментацию углеводов некоторые микроорганизмы могут давать слабую реакцию. В этом случае результат записывается как «+», и инкубация продлевается до 48 часов. Оранжевый цвет после 48 часов считается отрицательным результатом.
Для теста на утилизацию лизина может потребоваться инкубация до 48 часов.
Возможны противоречивые результаты из-за мутаций или особенностей сред, использованных для изоляции и культивирования.

Условия эксплуатации и хранения

Хранение: при получении хранить при температуре 2–8 °C.
Срок годности: 12 месяцев.

Меры предосторожности и утилизация

Клинические образцы и микробные культуры следует рассматривать как потенциально патогенные.
При инокуляции и работе с наборами необходимо строго соблюдать асептические условия.
После использования наборы и инструменты (пипетки, петли и т. д.) должны быть продезинфицированы подходящим средством, после чего утилизированы путем сжигания или автоклавирования в одноразовых пакетах.