HiMedia KB021-20KT Набор для идентификации бифидобактерий HiBifido (20 наборов)

Набор для идентификации бифидобактерий HiMedia KB021-20KT Набор для идентификации бифидобактерий HiBifido (20 наборов) производства HiMedia — стандартизированная колориметрическая система для идентификации и дифференциации бактерий рода Bifidobacterium. Набор предназначен для анализа пищевых, молочных и клинических образцов после предварительного выделения и очистки чистой культуры; прямое исследование исходных образцов не допускается.

Назначение и принцип работы

Идентификация бифидобактерий

KB021 представляет собой систему идентификации и дифференциации бактерий рода Bifidobacterium. Полный перечень организмов, которые могут быть идентифицированы с помощью системы, приведён в идентификационном указателе, входящем в комплект.

Система включает один стандартный биохимический тест и 11 тестов ферментации углеводов. Метод основан на изменении pH и утилизации субстратов. При инкубации микроорганизмы подвергаются метаболическим изменениям, которые сопровождаются изменением окраски среды. Результат интерпретируют визуально или после добавления реагента, если это предусмотрено методикой.

Идентификационные данные

Состав комплекта

Каждый набор содержит материалы для выполнения 10 тестов:

• 10 полосок KB021;
• техническая инструкция по продукту;
• таблица интерпретации результатов и лист регистрации результатов;
• идентификационный указатель.

Типы образцов

• Пищевые образцы.
• Молочные образцы.
• Клинические образцы.

Отбор и обращение с образцами

Для пищевых, молочных и клинических образцов необходимо применять соответствующие методы обращения с образцами в соответствии с установленными руководствами.

Пищевые, молочные и клинические образцы, а также микробные культуры следует рассматривать как потенциально патогенные и обращаться с ними с соблюдением требований биологической безопасности.

Ограничения применения

1. KB021 нельзя использовать непосредственно с пищевыми, молочными или клиническими образцами. Организмы, подлежащие идентификации, сначала необходимо выделить и очистить. Используют только чистые культуры.
2. При проведении теста ферментации углеводов некоторые микроорганизмы могут давать слабую реакцию. В этом случае реакцию регистрируют как положительную (+) и продолжают инкубацию до 48 ч.
3. Иногда микроорганизмы дают противоречивые результаты вследствие мутаций либо из-за состава среды, использованной для выделения, культивирования и поддержания культуры.
4. Идентификационный указатель составлен на основе стандартных справочных данных и результатов тестов, полученных в лаборатории.

Меры предосторожности

• Только для диагностики in vitro.
• Перед вскрытием набора прочитайте маркировку.
• При инокуляции и обращении с наборами необходимо поддерживать асептические условия.
• Реагенты не должны контактировать с кожей, глазами или одеждой.
• Используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При работе с образцами и культурами соблюдайте надлежащие правила микробиологической лабораторной практики.
• При обращении с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Указания по безопасности приведены в паспортах безопасности.

Подготовка посевного материала

1. Выделите организм, подлежащий идентификации, на среде, например на агаре для Bifidobacterium Bifidobacterium Agar (M1396) или на соево-казеиновом агаре Soyabean Casein Digest Agar (M290) с добавлением 5–7 % об./об. дефибринированной крови овцы.
2. Отберите одну изолированную колонию, инокулируйте 5 мл бульона для Bifidobacterium Bifidobacterium Broth (M1395) и инкубируйте при 35–37 °C в анаэробных условиях в течение 6–18 ч до достижения мутности посевного материала 0,1 OD при 620 нм или соответствия стандарту 0,5 по МакФарланду.
3. В качестве альтернативы подготовьте посевной материал, отобрав 1–3 хорошо изолированные колонии и приготовив однородную суспензию в 2–3 мл стерильного физиологического раствора. Плотность суспензии должна соответствовать 0,1 OD при 620 нм или стандарту 0,5 по МакФарланду.

Мутность посевного материала менее 0,1 OD может привести к ошибочным ложноотрицательным результатам. Более выраженные результаты получают при использовании обогащённой культуры, а не суспензии.

Инокуляция набора

1. Вскройте набор асептически.
2. Снимите герметизирующую ленту.
3. Внесите в каждую лунку по 50 мкл подготовленного посевного материала методом поверхностной инокуляции.
4. В качестве альтернативы можно инокулировать набор, прокалывая каждую отдельную лунку петлёй с посевным материалом.

Инкубация

• Температура инкубации: 35–37 °C.
• Условия инкубации: анаэробные.
• Продолжительность инкубации: 24–48 ч.

Интерпретация результатов

Результаты интерпретируют в соответствии с критериями, приведёнными в таблице интерпретации результатов.

Добавление 3 % H₂O₂ в лунку № 1 выполняют в конце периода инкубации — после 24–48 ч инкубации в анаэробных условиях.

Лунка № 1: тест на каталазу

1. Снимите петлёй небольшое количество выросшей культуры с поверхности лунки.
2. Погрузите петлю в небольшую чистую пробирку, содержащую 3 % пероксида водорода H₂O₂.
3. Положительная реакция на каталазу определяется по выделению пузырьков газа с поверхности петли.
4. При отрицательной реакции на каталазу выделение пузырьков газа отсутствует.

Раствор 3 % H₂O₂ необходимо готовить непосредственно перед использованием.

Условия интерпретации

После извлечения из холодильника выдержите реагенты до достижения комнатной температуры.

Биохимические реакции KB021

Таблица идентификации Bifidobacterium