HiMedia KB021-10KT Набор для идентификации бифидобактерий HiBifido (10 наборов)

Набор для идентификации бифидобактерий HiBifido HiMedia KB021-10KT (10 наборов) производства HiMedia. Представляет собой стандартизированную колориметрическую систему для идентификации и дифференциации бактерий рода Bifidobacterium на основе 12 биохимических тестов.

Принцип работы

Система KB021 основана на принципе изменения pH и утилизации субстратов. Набор включает один традиционный биохимический тест и одиннадцать тестов на ферментацию углеводов. В процессе инкубации микроорганизмы подвергаются метаболическим изменениям, которые проявляются в изменении цвета среды. Результаты интерпретируются визуально или после добавления специфического реагента.

Область применения

Набор используется для анализа следующих типов образцов:

• пищевые продукты и молочные продукты;
• клинические образцы.

Важное ограничение: Система KB021 не может быть использована непосредственно для анализа проб. Перед идентификацией микроорганизмы должны быть изолированы и очищены; допускается использование только чистых культур.

Методика проведения анализа

Подготовка инокулята

1. Изолируйте целевой микроорганизм на соответствующей среде, например, агаре для бифидобактерий (M1396) или агаре соево-казеиновом (M290) с добавлением 5–7 % (об/об) дефибринированной крови овцы.
2. Перенесите одну изолированную колонию в 5 мл бульона для бифидобактерий (M1395) и инкубируйте при 35–37 °C в анаэробных условиях в течение 6–18 часов до достижения мутности инокулята 0,1 OD при 620 нм или стандарта 0,5 по Макфарланду.
3. Альтернативный метод: создайте гомогенную суспензию из 1–3 изолированных колоний в 2–3 мл стерильного физиологического раствора до достижения плотности 0,1 OD при 620 нм или стандарта 0,5 по Макфарланду.

Примечание: при плотности инокулята ниже 0,1 OD возможны ложноотрицательные результаты. Использование обогащенной культуры вместо суспензии обеспечивает более выраженные результаты.

Инокуляция набора

1. В асептических условиях откройте набор и снимите защитную ленту.
2. Внесите по 50 мкл подготовленного инокулята в каждую лунку методом поверхностного посева.
3. Альтернативно возможен метод инокуляции путем прокалывания каждой лунки петлей с инокулятом.

Инкубация

• Температура: 35–37 °C.
• Условия: анаэробные.
• Продолжительность: 24–48 часов.

Интерпретация результатов

Результаты оцениваются согласно прилагаемой карте интерпретации. Реагенты перед использованием должны быть доведены до комнатной температуры.

Тест на каталазу (Лунка № 1)

Добавление 3 % H₂O₂ проводится в конце периода инкубации (через 24–48 часов анаэробного культивирования).

1. Снимите петлей небольшое количество роста с поверхности лунки.
2. Окуните петлю в чистую пробирку с раствором 3 % перекиси водорода (H₂O₂).
3. Положительная реакция: появление пузырьков газа (эффервесценция) на поверхности петли.
4. Отрицательная реакция: отсутствие пузырьков газа.

Примечание: раствор 3 % H₂O₂ должен быть свежеприготовленным.

Биохимические реакции системы KB021

Технические данные (Идентификационный индекс)

Ключ: P: положительная реакция, N: отрицательная реакция, ND: не определено, V: вариабельная реакция.

Ограничения и предостережения

• В некоторых случаях при тестах на ферментацию углеводов микроорганизмы проявляют слабую реакцию. В таких ситуациях следует зафиксировать результат как «+» и продолжить инкубацию до 48 часов.
• Возможны противоречивые результаты из-за мутаций штаммов или влияния сред, использованных для изоляции и культивирования.
• Только для диагностики in vitro.
• Все образцы и культуры следует считать потенциально патогенными. Соблюдайте правила асептики и используйте средства индивидуальной защиты (перчатки, одежда, защита глаз и лица).

Комплект поставки

Каждый набор рассчитан на проведение 10 тестов и содержит:

• 10 стрипов KB021;
• технический вкладыш;
• карту интерпретации результатов и лист регистрации данных;
• идентификационный индекс.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение: при получении и далее хранить при температуре +2…+8 °C.
• Срок годности: 12 месяцев.
• Утилизация: после использования наборы