HiMedia KB021-10KT Набор для идентификации бифидобактерий HiBifido (10 наборов)

Набор для идентификации бифидобактерий HiMedia KB021-10KT Набор для идентификации бифидобактерий HiBifido (10 наборов) — стандартизированная колориметрическая система с одним биохимическим тестом и 11 тестами ферментации углеводов. Набор предназначен для идентификации и дифференциации бактерий рода Bifidobacterium после предварительного выделения и очистки культуры; прямое исследование пищевых, молочных и клинических образцов не допускается.

Идентификация изделия

Назначение и принцип работы

KB021 — система идентификации и дифференциации бактерий рода Bifidobacterium. Полный перечень организмов, которые могут быть идентифицированы с помощью системы, приведён в идентификационном указателе, входящем в комплект.

Система представляет собой стандартизированный колориметрический набор, включающий один традиционный биохимический тест и 11 тестов ферментации углеводов. Тесты основаны на изменении pH и утилизации субстрата. Во время инкубации микроорганизмы претерпевают метаболические изменения, которые проявляются изменением цвета среды. Результат интерпретируют визуально или после добавления реагента, если это предусмотрено соответствующим тестом.

Состав комплекта

Каждый набор содержит материалы для выполнения 10 тестов:

• 10 стрипов KB021;
• техническая инструкция к изделию;
• таблица интерпретации результатов и бланк регистрации результатов;
• идентификационный указатель.

Типы образцов

• пищевые образцы;
• молочные образцы;
• клинические образцы.

Пробоподготовка и обращение с образцами

Для пищевых, молочных и клинических образцов следует применять соответствующие методы обращения с образцами в соответствии с установленными руководствами.

KB021 нельзя использовать непосредственно с пищевыми, молочными или клиническими образцами. Предварительно необходимо выделить и очистить идентифицируемые микроорганизмы. Для анализа используют только чистые культуры.

Предупреждения и меры предосторожности

• Только для применения in vitro.
• Перед вскрытием набора прочитайте маркировку.
• Пищевые, молочные и клинические образцы, а также микробные культуры следует считать потенциально патогенными и обращаться с ними соответствующим образом.
• Во время инокуляции и работы с наборами необходимо поддерживать асептические условия.
• Не допускайте контакта реагентов с кожей, глазами и одеждой.
• Используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При работе с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При обращении с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Требования безопасности могут быть приведены в паспортах безопасности.

Ограничения метода

1. При слабой реакции некоторых микроорганизмов в тесте ферментации углеводов реакцию регистрируют как положительную (+) и продолжают инкубацию до 48 ч.
2. Иногда микроорганизмы дают противоречивый результат вследствие мутации либо из-за особенностей среды, использованной для выделения, культивирования и поддержания культуры.
3. Идентификационный указатель составлен на основе стандартных справочных источников и результатов тестов, полученных в лаборатории.

Подготовка посевной суспензии

1. Выделите идентифицируемый микроорганизм на среде типа агара для Bifidobacterium (M1396) или соево-казеинового агара (M290) с добавлением 5–7 % об./об. дефибринированной крови овцы.
2. Отберите одну изолированную колонию и инокулируйте 5 мл бульона для Bifidobacterium (M1395).
3. Инкубируйте при 35–37 °C в анаэробных условиях в течение 6–18 ч, пока мутность посевной суспензии не достигнет 0,1 OD при 620 нм или значения 0,5 по стандарту Мак-Фарланда.
4. В качестве альтернативы отберите 1–3 хорошо изолированные колонии и приготовьте однородную суспензию в 2–3 мл стерильного физиологического раствора. Плотность суспензии должна соответствовать 0,1 OD при 620 нм или 0,5 по стандарту Мак-Фарланда.

Если мутность посевной суспензии ниже 0,1 OD, возможны ошибочные ложноотрицательные результаты. Более выраженные результаты получают при использовании обогащённой культуры, а не суспензии.

Инокуляция набора

1. Вскройте набор с соблюдением асептики.
2. Снимите герметизирующую ленту.
3. Внесите в каждую лунку по 50 мкл подготовленной посевной суспензии методом поверхностной инокуляции.
4. В качестве альтернативы набор можно инокулировать прокалыванием каждой отдельной лунки петлёй с посевным материалом.

Инкубация

Температура инкубации: 35–37 °C.

Условия инкубации: анаэробные.

Продолжительность инкубации: 24–48 ч.

Интерпретация результатов

Интерпретируйте результаты в соответствии с критериями, приведёнными в таблице интерпретации результатов.

После завершения инкубации, то есть через 24–48 ч в анаэробных условиях, в лунку № 1 добавляют 3 % H₂O₂.

Перед использованием реагентам необходимо дать нагреться до комнатной температуры после извлечения из холодильника.

Лунка № 1: каталазный тест

1. Снимите петлёй небольшое количество роста с поверхности лунки.
2. Погрузите петлю в небольшую чистую пробирку, содержащую 3 % пероксида водорода.
3. Положительная реакция на каталазу проявляется выделением пузырьков газа с поверхности петли.
4. При отрицательной реакции на каталазу выделение пузырьков газа отсутствует.

3 % H₂O₂ необходимо готовить непосредственно перед использованием.

Биохимические реакции KB021

Таблица идентификации Bifidobacterium