HiMedia KB020-20KT Набор для идентификации лактобактерий HiLacto (20 наборов)

Набор для идентификации лактобактерий HiMedia KB020-20KT (20 наборов) — стандартизированная колориметрическая система с 12 лунками для биохимической идентификации и дифференциации представителей рода Lactobacillus. HiMedia KB020-20KT применяется для анализа пищевых, молочных и клинических образцов после выделения чистой культуры; инкубация проводится 24–48 ч при 35–37 °C с 5–10 % CO₂ или без него.

Назначение

KB020 — система идентификации и дифференциации микроорганизмов рода Lactobacillus. Полный перечень организмов, идентифицируемых системой, приведён в идентификационном указателе, входящем в комплект.

Тип образца:

• пищевые образцы;
• молочные образцы;
• клинические образцы.

Набор нельзя использовать непосредственно с пищевыми, молочными или клиническими образцами: микроорганизмы необходимо предварительно выделить и очистить, после чего использовать только чистые культуры.

Принцип измерения

KB020 представляет собой стандартизированную колориметрическую систему идентификации, включающую два традиционных биохимических теста и 10 тестов ферментации углеводов. Тесты основаны на изменении pH и утилизации субстрата.

При инкубации микроорганизмы претерпевают метаболические изменения, которые проявляются изменением цвета среды. Результат интерпретируют визуально или после добавления реагента, если это предусмотрено соответствующим тестом.

Состав набора

Каждый набор содержит материалы для выполнения 10 тестов:

• 10 полосок KB020;
• техническая инструкция к продукту;
• таблица интерпретации результатов;
• лист регистрации результатов;
• идентификационный указатель.

Реагент, необходимый для работы и не входящий в комплект

• 3 % раствор пероксида водорода (H₂O₂).

Подготовка образцов

Для пищевых, молочных и клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с образцами в соответствии с установленными методическими рекомендациями.

Методика проведения анализа

Подготовка инокулюма

1. Выделите идентифицируемый микроорганизм на среде, например на агаре MRS для лактобацилл (M641) или соево-казеиновом агаре (M290).
2. Отберите одну изолированную колонию, внесите её в 5 мл бульона MRS для лактобацилл (M369) и инкубируйте при 35–37 °C или при 35–37 °C с 5–10 % CO₂ в соответствии с требованиями организма в течение 6–18 ч. Инкубацию проводят до достижения мутности инокулюма 0,10D при 620 нм или значения 0,5 по стандарту Мак-Фарланда.
3. В качестве альтернативы приготовьте инокулюм, отобрав 1–3 хорошо изолированные колонии и приготовив однородную суспензию в 2–3 мл стерильного физиологического раствора. Плотность суспензии должна соответствовать 0,10D при 620 нм или 0,5 по стандарту Мак-Фарланда.

Мутность инокулюма ниже 0,1 OD может приводить к ошибочным ложноотрицательным результатам. Более выраженные результаты получают при использовании обогащённой культуры вместо суспензии.

Внесение инокулюма в набор

1. Вскройте набор с соблюдением асептических условий.
2. Снимите герметизирующую ленту.
3. Внесите в каждую лунку по 50 мкл подготовленного инокулюма методом поверхностного посева.
4. В качестве альтернативы инокуляцию можно выполнить прокалыванием каждой отдельной лунки петлёй с инокулюмом.

Инкубация

• Температура инкубации: 35–37 °C.
• Атмосфера: с 5–10 % CO₂ или без него.
• Продолжительность инкубации: 24–48 ч.

Интерпретация результатов

Интерпретируйте результаты в соответствии с критериями, приведёнными в таблице интерпретации результатов.

Добавление 3 % H₂O₂ в лунку № 2 выполняют в конце периода инкубации, то есть через 24–48 ч, при инкубации с 5–10 % CO₂ или без него.

Лунка № 2: тест на каталазу

1. Снимите петлёй небольшое количество роста с поверхности лунки.
2. Погрузите петлю в небольшую чистую пробирку, содержащую 3 % раствор пероксида водорода.
3. Положительный тест на каталазу определяется по выделению пузырьков газа с поверхности петли.
4. При отрицательном тесте на каталазу выделения пузырьков газа не наблюдается.

3 % раствор H₂O₂ необходимо готовить непосредственно перед использованием.

Условия интерпретации

Реагентам необходимо дать нагреться до комнатной температуры после извлечения из холодильника.

Биохимические реакции KB020

Профили биохимических реакций

Обозначения: P — положительная реакция; N — отрицательная реакция; ND — реакция не обнаружена; D — вариабельная реакция.