HiMedia KB020-20KT Набор для идентификации лактобактерий HiLacto (20 наборов)

Набор для идентификации лактобактерий HiLacto HiMedia KB020-20KT (20 наборов) представляет собой стандартизированную колориметрическую систему для дифференциации видов рода Lactobacillus. Система основана на двух биохимических тестах и 10 тестах на ферментацию углеводов; идентификация проводится по изменению pH и утилизации субстратов.

Принцип работы

Система KB020 использует принцип изменения pH среды при метаболизме микроорганизмов. В ходе инкубации бактерии расщепляют специфические субстраты, что приводит к изменению цвета индикатора в среде. Результаты интерпретируются визуально или после добавления специфических реагентов.

Область применения

Набор предназначен для идентификации чистых культур лактобактерий, выделенных из:

• пищевых продуктов;
• молочных продуктов;
• клинических образцов.

Методика проведения анализа

Подготовка инокулята

1. Изолируйте целевой микроорганизм на подходящей среде, например, агаре Lactobacillus MRS (M641) или соево-казеиновом агаре (M290).
2. Подготовьте суспензию одним из двух способов:
   • Перенесите одну изолированную колонию в 5 мл бульона Lactobacillus MRS (M369) и инкубируйте при 35–37 °C (с добавлением 5–10 % CO₂ или без него, в зависимости от требований организма) в течение 6–18 часов до достижения мутности 0,10D при 620 нм или стандарта 0,5 по Макфарланду.
   • Создайте гомогенную суспензию из 1–3 изолированных колоний в 2–3 мл стерильного физиологического раствора до достижения плотности 0,10D при 620 нм или стандарта 0,5 по Макфарланду.

Важно: При мутности инокулята менее 0,1 OD возможны ложноотрицательные результаты. Использование обогащенной культуры предпочтительнее суспензии для получения более выраженных результатов.

Инокуляция набора

1. В асептических условиях откройте набор и снимите защитную ленту.
2. Внесите в каждую лунку по 50 мкл подготовленного инокулята методом поверхностного посева.
3. Альтернативно возможен метод посева путем прокалывания каждой лунки петлей с инокулятом.

Инкубация

• Температура: 35–37 °C.
• Условия: с добавлением 5–10 % CO₂ или без него.
• Продолжительность: 24–48 часов.

Интерпретация результатов

Результаты оцениваются согласно прилагаемой таблице интерпретации.

Тест на каталазу (лунка № 2)

Проводится в конце периода инкубации (через 24–48 часов):

1. Снимите петлей небольшое количество роста с поверхности лунки.
2. Опустите петлю в чистую пробирку с 3 % перекисью водорода (H₂O₂).
3. Положительная реакция: появление пузырьков газа (эффервесценция) на поверхности петли.
4. Отрицательная реакция: отсутствие пузырьков газа.

Примечание: 3 % H₂O₂ должна быть свежеприготовленной.

Биохимические реакции системы KB020

Индекс идентификации видов

Ключ: P: положительная реакция, N: отрицательная реакция, ND: не обнаружено, D: вариабельный результат.

Ограничения и предостережения

• Набор нельзя использовать непосредственно для анализа проб; требуется предварительное выделение и получение чистой культуры.
• При слабых реакциях в тестах на ферментацию углеводов рекомендуется продлить инкубацию до 48 часов.
• Возможны противоречивые результаты из-за мутаций штаммов или влияния сред, использованных для первичного выделения и культивирования.
• Только для диагностики in vitro.

Технические характеристики и хранение

• Срок годности: 12 месяцев.
• Условия хранения при получении: 2–8 °C.
• Температура инкубации: 35–37 °C.
• Время инкубации: 24–48 часов.

Комплект поставки

Каждый набор содержит материалы для проведения 10 тестов:

• 10 strips (полосок) KB020.
• Технический вкладыш.
• Таблица интерпретации результатов и лист записи данных.
• Индекс идентификации.

Дополнительно требуется (не входит в комплект): 3 % перекись водорода (H₂O₂).