HiMedia KB020-10KT Набор для идентификации лактобактерий HiLacto (10 наборов)

Система идентификации и дифференциации лактобактерий HiMedia KB020-10KT HiLacto (10 наборов) для определения видов рода Lactobacillus. Применяется для анализа пищевых, молочных и клинических образцов; включает 2 биохимических теста и 10 тестов на ферментацию углеводов.

Принцип измерения

Система KB020 основана на колориметрическом методе, использующем изменение pH среды при утилизации субстратов. В процессе инкубации микроорганизмы подвергаются метаболическим изменениям, что приводит к изменению цвета среды. Результаты интерпретируются визуально или после добавления специфических реагентов.

Область применения

Набор предназначен для идентификации чистых культур лактобактерий, выделенных из:

• пищевых продуктов;
• молочных продуктов;
• клинических образцов.

Методика проведения анализа

Подготовка инокулята

1. Изолируйте целевой микроорганизм на подходящей среде, например, агаре Lactobacillus MRS (M641) или соево-казеиновом агаре (M290).
2. Подготовьте суспензию одним из двух способов:
   • Перенесите одну изолированную колонию в 5 мл бульона Lactobacillus MRS (M369) и инкубируйте при 35–37 °C (с добавлением 5–10 % CO₂ или без, в зависимости от требований организма) в течение 6–18 ч до достижения мутности 0,10D при 620 нм или стандарта 0,5 по МакФарланду.
   • Создайте гомогенную суспензию из 1–3 изолированных колоний в 2–3 мл стерильного физиологического раствора до достижения мутности 0,10D при 620 нм или стандарта 0,5 по МакФарланду.

Важно: При мутности инокулята ниже 0,1 OD возможны ложноотрицательные результаты. Использование обогащенной культуры предпочтительнее суспензии.

Инокуляция набора

1. В асептических условиях откройте набор и снимите защитную ленту.
2. Внесите по 50 мкл подготовленного инокулята в каждую лунку методом поверхностного посева.
3. Альтернативно возможен метод посева путем прокалывания каждой лунки петлей с инокулятом.

Инкубация

• Температура: 35–37 °C.
• Условия: с добавлением 5–10 % CO₂ или без него (согласно требованиям вида).
• Продолжительность: 24–48 часов.

Интерпретация результатов

Результаты оцениваются согласно прилагаемой карте интерпретации.

Особенности теста на каталазу (лунка № 2): Проводится в конце периода инкубации (через 24–48 ч).

1. Снимите петлей рост с поверхности лунки.
2. Опустите петлю в чистую пробирку с 3 % раствором перекиси водорода (H₂O₂).
3. Положительная реакция: появление пузырьков газа (эффервесценция) на поверхности петли.
4. Отрицательная реакция: отсутствие пузырьков. Примечание: раствор 3 % H₂O₂ должен быть свежеприготовленным.

Биохимические реакции KB020

Индекс идентификации видов

Ключ: P: положительная реакция, N: отрицательная реакция, ND: не выявлено, D: вариабельный результат.

Ограничения и предостережения

• Набор предназначен только для диагностики in vitro.
• Нельзя использовать непосредственно для анализа проб; требуется предварительное выделение и очистка культур.
• При слабых реакциях в тестах на ферментацию углеводов рекомендуется продлить инкубацию до 48 часов.
• Возможны противоречивые результаты вследствие мутаций микроорганизмов или влияния сред, использованных для изоляции.

Технические характеристики

• Формат: набор из 10 стрипов (полосок)
• Температура хранения: 2–8 °C
• Срок годности: 12 месяцев
• Условия инкубации: 35–37 °C (± 5–10 % CO₂)
• Время инкубации: 24–48 часов

Комплект поставки

• 10 стрипов KB020
• Технический вкладыш
• Карта интерпретации результатов и лист регистрации данных
• Индекс идентификации

Дополнительно требуется (не входит в комплект): 3 % раствор перекиси водорода (H₂O₂).

Утилизация

Использованные наборы и расходные материалы (пипетки, петли) подлежат дезинфекции с последующим сжиганием или автоклавированием в одноразовых пакетах.