HiMedia KB020-10KT Набор для идентификации лактобактерий HiLacto (10 наборов)

Система идентификации лактобактерий HiMedia KB020-10KT Набор для идентификации лактобактерий HiLacto (10 наборов) — стандартизованная колориметрическая система для выполнения 10 тестов на один набор. HiMedia KB020-10KT применяется для идентификации и дифференциации представителей рода Lactobacillus в пищевых, молочных и клинических образцах, при этом анализ проводят только с предварительно выделенными чистыми культурами.

Назначение

HiMedia KB020-10KT предназначен для идентификации и дифференциации представителей рода Lactobacillus. Полный перечень организмов, которые могут быть идентифицированы с помощью системы, приведён в идентификационном указателе, входящем в комплект.

Тип образцов:

• пищевые образцы;
• молочные образцы;
• клинические образцы.

Набор предназначен только для диагностики in vitro.

Принцип измерения

KB020 представляет собой стандартизованную колориметрическую систему идентификации, включающую два традиционных биохимических теста и 10 тестов ферментации углеводов. Тесты основаны на изменении pH и утилизации субстрата.

В процессе инкубации микроорганизмы претерпевают метаболические изменения, которые проявляются изменением окраски среды. Результат оценивают визуально либо после добавления реагента, если это предусмотрено соответствующим тестом.

Состав набора

Каждый набор содержит материалы, необходимые для выполнения 10 тестов:

• 10 стрипов KB020;
• техническая инструкция к изделию;
• таблица интерпретации результатов;
• лист регистрации результатов;
• идентификационный указатель.

Реагент, необходимый для работы и не входящий в комплект

• 3 % пероксид водорода (H₂O₂).

Подготовка и обращение с образцами

Для пищевых, молочных и клинических образцов необходимо применять соответствующие методы обращения с образцами в соответствии с установленными руководствами.

KB020 нельзя использовать непосредственно с пищевыми, молочными или клиническими образцами. Организмы, подлежащие идентификации, сначала выделяют и очищают; используют только чистые культуры.

Методика проведения анализа

Подготовка инокулята

1. Выделите организм, подлежащий идентификации, на среде типа агара MRS для лактобактерий (Lactobacillus MRS Agar, M641) или соево-казеинового агаризованного переваренного агара (Soyabean Casein Digest Agar, M290).
2. Отберите одну изолированную колонию, внесите её в 5 мл бульона MRS для лактобактерий (Lactobacillus MRS Broth, M369) и инкубируйте при 35–37 °C либо при 35–37 °C с 5–10 % CO₂ в соответствии с требованиями организма в течение 6–18 ч.
3. Инкубацию продолжайте до достижения мутности инокулята 0,10 единицы оптической плотности при 620 нм либо значения 0,5 по стандарту Мак-Фарланда.
4. В качестве альтернативы приготовьте инокулят, отобрав 1–3 хорошо изолированные колонии и приготовив однородную суспензию в 2–3 мл стерильного физиологического раствора. Плотность суспензии должна соответствовать 0,10 единицы оптической плотности при 620 нм либо 0,5 по стандарту Мак-Фарланда.

Если мутность инокулята ниже 0,1 единицы оптической плотности, возможны ошибочные ложноотрицательные результаты. Более выраженные результаты получают при использовании обогащённой культуры вместо суспензии.

Инокуляция набора

1. Вскройте набор с соблюдением асептических условий.
2. Снимите герметизирующую ленту.
3. Внесите в каждую лунку по 50 мкл подготовленного инокулята методом поверхностной инокуляции.
4. В качестве альтернативы каждую отдельную лунку можно инокулировать прокалыванием петлёй с одной петлёй инокулята.

Инкубация

• Температура инкубации: 35–37 °C.
• Атмосфера: с 5–10 % CO₂ или без CO₂.
• Продолжительность инкубации: 24–48 ч.

Интерпретация результатов

Результаты интерпретируют в соответствии с критериями, приведёнными в таблице интерпретации результатов.

После завершения инкубации, через 24–48 ч, в лунку № 2 добавляют 3 % H₂O₂. Добавление выполняют при инкубации с 5–10 % CO₂ или без CO₂.

Лунка № 2: тест на каталазу

1. Снимите петлёй небольшое количество роста с поверхности лунки.
2. Погрузите петлю в небольшую чистую пробирку, содержащую 3 % пероксида водорода.
3. Положительный результат теста на каталазу проявляется выделением пузырьков газа с поверхности петли.
4. При отрицательном результате выделение пузырьков газа отсутствует.

3 % H₂O₂ необходимо готовить непосредственно перед использованием.

Условия интерпретации

После извлечения реагентов из холодильника дождитесь их достижения комнатной температуры.

Биохимические реакции KB020

Обозначения в таблице профилей реакций: P — положительная реакция; N — отрицательная реакция; ND — реакция не обнаружена; D — вариабельная реакция.