HiMedia KB019-5KT Набор для идентификации неферментирующих бактерий Hi24 (5 наборов)

Набор для идентификации неферментирующих бактерий HiMedia KB019-5KT Hi24 (5 наборов) представляет собой комплексную колориметрическую систему для дифференциации грамотрицательных неспорообразующих микроорганизмов. Применяется для скрининга патогенных организмов в пробах мочи, кишечных экссудатах и других клинических образцах; включает 12 биохимических и 12 тестов на утилизацию углеводов.

Область применения

Система предназначена для идентификации неферментирующих бактерий, выделенных из клинического материала (кровь, моча, фекалии, нозокомиальные пробы и др.). Набор позволяет определить принадлежность изолята к следующим родам:

• Acinetobacter
• Bordetella
• Burkholderia
• Legionella
• Moraxella
• Pseudomonas
• Stenotrophomonas

Также система может использоваться для валидации известных лабораторных штаммов.

Принцип работы

Идентификация основана на использовании двенадцати стандартных биохимических тестов и двенадцати тестов на утилизацию углеводов. Принцип работы базируется на изменении pH среды и утилизации субстрата: в процессе инкубации микроорганизмы вызывают метаболические изменения, которые проявляются в виде изменения цвета среды. Результаты интерпретируются визуально или после добавления специфических реагентов.

Методика проведения анализа

Подготовка инокулята

1. Изолируйте целевой микроорганизм на стандартной среде, такой как питательный агар (Nutrient Agar) или агар инфузия мозга и сердца (BHI Agar).
2. Перенесите одну изолированную колонию в 5 мл бульона BHI и инкубируйте при 35–37 °C в течение 4–6 часов до достижения мутности 0,1 OD при 620 нм или стандарта 0,5 МакФарланда.
3. Альтернативно можно использовать гомогенную суспензию в 2–3 мл стерильного физиологического раствора, доведенную до плотности 0,1 OD при 620 нм или 0,5 МакФарланда.

Важно: при мутности инокулята ниже 0,1 OD возможны ложноотрицательные результаты. Использование обогащенной культуры предпочтительнее суспензии.

Инокуляция набора

1. Асептически откройте набор и снимите защитную ленту.
2. Внесите по 50 мкл подготовленного инокулята в каждую лунку методом поверхностного посева.
3. Альтернативный метод: внесение инокулята в каждую лунку с помощью петли (метод «укола»).

Инкубация

• Температура: 35–37 °C.
• Продолжительность: 24–48 часов.

Интерпретация результатов

Результаты оцениваются согласно таблице интерпретации. В лунки № 1, 5, 8 и 12 реагенты добавляются строго по окончании инкубационного периода (через 18–24 часа).

Специфика тестов с добавлением реагентов

• Тест на индол (лунка № 1): Добавьте 1–2 капли реагента Ковакса (R008). Появление красно-розового окрашивания в течение 10 секунд указывает на положительную реакцию.
• Тест на восстановление нитратов (лунка № 5): Добавьте 1–2 капли сульфаниловой кислоты (R015) и 1–2 капли раствора $\alpha$-нафтиламина (R009). Немедленное появление розово-красного цвета — положительная реакция.
• Тест на деаминацию фенилаланина (лунка № 8): Добавьте 2–3 капли реагента TDA. Появление темно-зеленого цвета в течение одной минуты указывает на положительную реакцию.
• Оксидазный тест (лунка № 12): Добавьте 1–2 капли реагента Гордона-Маклеода. Появление пурпурно-синего цвета в течение 5–10 секунд (допустимо до 60 с) указывает на положительную реакцию.

Технические характеристики и ограничения

• Температура хранения при получении: 2–8 °C.
• Срок годности: 12 месяцев.
• Ограничения:
  • Нельзя использовать напрямую на клинических образцах; требуется предварительное выделение и очистка культуры.
  • В тестах на ферментацию углеводов некоторые микроорганизмы дают слабую реакцию; в таких случаях результат фиксируется как «+» и инкубация продлевается до 48 часов.
  • Возможны противоречивые результаты из-за мутаций штаммов или влияния сред, использованных для первичного выделения.

Комплект поставки (на 1 набор)

• 10 стрипов KB019 (материала достаточно для проведения 10 тестов).
• Технический вкладыш.
• Таблица интерпретации результатов и лист записи данных.
• Индекс идентификации.

Индекс идентификации