HiMedia KB019-20KT Набор для идентификации неферментирующих бактерий Hi24 (20 наборов)

Набор для идентификации неферментирующих бактерий HiMedia KB019-20KT Hi24 предназначен для стандартизированной идентификации по 12 обычным биохимическим и 12 тестам утилизации углеводов. Система применяется для скрининга клинических изолятов, включая образцы мочи, кала и крови, и требует использования предварительно выделенных чистых культур.

Назначение и область применения

HiMedia KB019-20KT Hi24 — набор для идентификации грамотрицательных неспорообразующих неферментирующих бактерий, выделенных из клинических образцов. Система предназначена для:

• скрининга патогенных микроорганизмов в образцах мочи, кишечного содержимого и других релевантных клинических образцах;
• идентификации изолятов родов Acinetobacter, Bordetella, Burkholderia, Legionella, Moraxella, Pseudomonas и Stenotrophomonas;
• проверки известных лабораторных штаммов;
• идентификации микроорганизмов, полный перечень которых приведён в идентификационном указателе, входящем в комплект.

Типы образцов

Допустимые клинические образцы:

• кровь;
• моча;
• фекалии;
• кишечное содержимое;
• образцы, связанные с внутрибольничными инфекциями;
• другие релевантные клинические образцы.

Принцип идентификации

Каждый набор Hi24 представляет собой стандартизированную колориметрическую систему идентификации, включающую 12 обычных биохимических тестов и 12 тестов утилизации углеводов. Тесты основаны на изменении pH и утилизации субстратов.

Во время инкубации в микроорганизмах происходят метаболические изменения, которые проявляются изменением цвета среды. Результат может интерпретироваться визуально или после добавления соответствующего реагента.

Подготовка образца и посевной суспензии

KB019 нельзя использовать непосредственно с клиническими образцами. Идентифицируемые микроорганизмы необходимо предварительно выделить и очистить; для исследования используют только чистые культуры.

Приготовление посевной суспензии

1. Выделите исследуемый микроорганизм на обычной питательной среде, например на питательном агаре Nutrient Agar (M001/M1274) или агаре Brain Heart Infusion Agar (M211).
2. Отберите одну хорошо изолированную колонию.
3. Внесите колонию в 5 мл бульона Brain Heart Infusion.
4. Инкубируйте при 35–37 °C в течение 4–6 ч, пока мутность посевной суспензии не достигнет 0,1 OD при 620 нм или стандарта 0,5 по Мак-Фарланду.
5. В качестве альтернативы приготовьте однородную суспензию в 2–3 мл стерильного физиологического раствора и используйте её для инокуляции.
6. Плотность суспензии отрегулируйте до 0,1 OD при 620 нм или стандарта 0,5 по Мак-Фарланду.

Результаты могут быть ошибочно отрицательными, если мутность посевной суспензии ниже 0,1 OD. Более выраженные результаты получают при использовании обогащённой культуры, а не суспензии.

Инокуляция набора

1. Вскройте набор в асептических условиях.
2. Снимите герметизирующую ленту.
3. Внесите в каждую лунку по 50 мкл подготовленной посевной суспензии методом поверхностной инокуляции.
4. В качестве альтернативы инокулируйте набор прокалыванием каждой отдельной лунки петлёй с одной петлёй посевного материала.

Инкубация

• Температура инкубации: 35–37 °C.
• Продолжительность инкубации: 24–48 ч.

Интерпретация результатов

Результаты интерпретируют в соответствии с критериями, приведёнными в таблице интерпретации результатов.

Добавление реагентов в лунки № 1, 5, 8 и 12 выполняют в конце инкубации, то есть через 18–24 ч. После инкубации в соответствующие лунки добавляют следующие реагенты.

Индольный тест — лунка № 1

Добавьте 1–2 капли реагента Ковача (R008).

• Положительная реакция: появление красновато-розовой окраски в течение 10 с.
• Отрицательная реакция: реагент сохраняет бледную окраску.

Тест на восстановление нитрата — лунка № 5

Добавьте 1–2 капли сульфаниловой кислоты (R015) и 1–2 капли раствора α-нафтиламина (R009).

• Положительная реакция: немедленное появление розовато-красной окраски после добавления реагентов.
• Отрицательная реакция: изменения окраски нет.

Тест на дезаминирование фенилаланина — лунка № 8

Добавьте 2–3 капли реагента TDA.

• Положительная реакция: появление тёмно-зелёной окраски в течение 1 мин.
• Отрицательная реакция: изменения окраски нет.

Оксидазный тест — лунка № 12

Добавьте 1–2 капли реагента Gordon McLeod.

• Положительная реакция: появление пурпурно-синей окраски в течение 5–10 с.
• Отсроченная положительная реакция: развитие окраски в течение до 60 с может быть зарегистрировано отдельно.
• Отрицательная реакция: изменения окраски нет либо положительная реакция развивается с задержкой до 60 с.

Требования к реагентам перед интерпретацией

После извлечения из холодильника доведите реагенты до комнатной температуры.

Ограничения метода

1. KB019 нельзя использовать непосредственно с клиническими образцами. Идентифицируемые микроорганизмы необходимо предварительно выделить и очистить; исследованию подлежат только чистые культуры.
2. В тесте ферментации углеводов некоторые микроорганизмы могут давать слабую реакцию. В таком случае реакцию регистрируют как «+» и продолжают инкубацию до 48 ч.
3. Иногда микроорганизмы дают противоречивые результаты вследствие мутаций либо из-за питательной среды, использованной для выделения, культивирования и поддержания культуры.
4. Идентификационный указатель составлен на основе стандартных справочных данных и результатов тестов, полученных в лаборатории.

Сбор и обращение с образцами

При работе с клиническими образцами соблюдайте соответствующие методики обращения с образцами в соответствии с установленными руководствами.

Предупреждения и меры предосторожности

• Только для диагностики in vitro.
• Перед вскрытием набора прочитайте маркировку.
• Клинические образцы и микробные культуры следует считать потенциально патогенными и обращаться с ними соответственно.
• Во время инокуляции и работы с наборами необходимо соблюдать асептические условия.
• Не допускайте контакта реагентов с кожей, глазами и одеждой.
• Используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При работе с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При обращении с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Правила безопасности могут быть приведены в паспортах безопасности реагентов.

Дезинфекция и утилизация

После использования наборы, а также материалы, применявшиеся для выделения и инокуляции, включая пипетки и петли, необходимо обеззаразить подходящим дезинфицирующим средством, затем утилизировать сжиганием или автоклавированием в одноразовом пакете.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения после получения: 2–8 °C.
• Срок годности: 12 мес.
• Условия применения: используйте набор в пределах указанного срока годности и при рекомендованной температуре хранения.
• Условия транспортирования и получения: хранить при 2–8 °C сразу после получения.

Комплект поставки

Согласно данным производителя, каждый набор содержит материалы для выполнения 10 тестов:

1. 10 тест-полосок KB019.
2. Техническая инструкция по применению.
3. Таблица интерпретации результатов и лист регистрации результатов.
4. Идентификационный указатель.

Наименование товара указывает на комплектацию 20 наборами: HiMedia KB019-20KT.

Идентификационный указатель