HiMedia KB019-10KT Набор для идентификации неферментирующих бактерий Hi24 (10 наборов)

Набор для идентификации неферментирующих бактерий HiMedia KB019-10KT Hi24 (10 наборов) представляет собой комплексную колориметрическую систему для дифференциации грамотрицательных неспорообразующих микроорганизмов. Система предназначена для скрининга патогенов в образцах мочи, кишечных пробах и других клинических материалах, включая роды Acinetobacter, Bordetella, Burkholderia, Legionella, Moraxella, Pseudomonas и Stenotrophomonas.

Принцип работы

Идентификация основана на использовании двенадцати стандартных биохимических тестов и двенадцати тестов на утилизацию углеводов. Принцип работы базируется на изменении pH среды и использовании субстратов: в процессе инкубации микроорганизмы вызывают метаболические изменения, которые проявляются в виде изменения цвета среды. Результаты интерпретируются визуально или после добавления специфических реагентов.

Область применения

Набор используется для идентификации микроорганизмов, выделенных из следующих типов клинических образцов:

• кровь;
• моча;
• фекалии;
• кишечные пробы;
• нозокомиальные (больничные) образцы и другие релевантные материалы.

Система также может применяться для валидации известных лабораторных штаммов.

Методика проведения анализа

Подготовка инокулята

1. Выделите целевой микроорганизм на стандартной среде, например, на питательном агаре (M001/M1274) или агаре с мозгом и сердечником (M211).
2. Выберите одну изолированную колонию и инокулируйте её в 5 мл бульона с мозгом и сердцем.
3. Инкубируйте при температуре 35–37 °C в течение 4–6 часов до достижения мутности инокулята 0,1 OD при 620 нм или стандарта 0,5 по Макфарланду.
4. В качестве альтернативы можно использовать гомогенную суспензию в 2–3 мл стерильного физиологического раствора, доведенную до плотности 0,1 OD при 620 нм или 0,5 по Макфарланду.

Примечание: при мутности инокулята ниже 0,1 OD возможны ложноотрицательные результаты. Использование обогащенной культуры предпочтительнее суспензии для получения более выраженных результатов.

Инокуляция набора

1. В асептических условиях откройте набор и снимите защитную ленту.
2. Внесите в каждую лунку по 50 мкл подготовленного инокулята методом поверхностного посева.
3. Альтернативный метод: инокуляция каждой лунки петлёй с инокулятом (метод «укола»).

Инкубация

• Температура: 35–37 °C.
• Продолжительность: 24–48 часов.

Интерпретация результатов

Результаты оцениваются согласно таблице интерпретации, прилагаемой к набору. В лунки № 1, 5, 8 и 12 реагенты добавляются строго по окончании периода инкубации (через 18–24 часа).

Специфика тестов с добавлением реагентов

• Тест на индол (лунка № 1): Добавьте 1–2 капли реагента Ковача (R008). Появление красно-розового окрашивания в течение 10 секунд указывает на положительную реакцию. Отсутствие цвета — отрицательная реакция.
• Тест на восстановление нитратов (лунка № 5): Добавьте 1–2 капли сульфаниловой кислоты (R015) и 1–2 капли раствора $\alpha$-нафтиламина (R009). Немедленное появление розово-красного цвета указывает на положительную реакцию.
• Тест на дезаминирование фенилаланина (лунка № 8): Добавьте 2–3 капли реагента TDA. Появление темно-зеленого цвета в течение одной минуты указывает на положительную реакцию.
• Оксидазный тест (лунка № 12): Добавьте 1–2 капли реагента Гордона-Маклауда. Появление пурпурно-синего цвета в течение 5–10 секунд указывает на положительную реакцию. Замедленная реакция (до 60 секунд) может быть расценена как положительная; отсутствие изменений или задержка более 60 секунд — отрицательная реакция.

Ограничения и предостережения

1. Набор нельзя использовать непосредственно для клинических образцов; микроорганизмы должны быть предварительно выделены и очищены. Используются только чистые культуры.
2. В тестах на ферментацию углеводов некоторые микроорганизмы могут давать слабую реакцию; в таком случае результат записывается как «+» и инкубация продлевается до 48 часов.
3. Возможны противоречивые результаты из-за мутаций микроорганизмов или особенностей сред, использованных для изоляции и культивирования.
4. Реагенты должны быть доведены до комнатной температуры перед использованием.

Состав набора

• Материалы для проведения 10 тестов.
• 10 стрипов KB019.
• Технический вкладыш.
• Таблица интерпретации результатов и лист регистрации данных.
• Индекс идентификации.

Условия хранения и утилизация

• Хранение: При получении хранить при температуре 2–8 °C.
• Срок годности: 12 месяцев.
• Утилизация: Использованные наборы, пипетки и петли должны быть дезинфицированы подходящим средством, после чего утилизированы путем сжигания или автоклавирования в одноразовых пакетах.

Индекс идентификации