HiMedia KB016-5KT Набор для идентификации энтеробактерий Hi24 (5 наборов)

Набор для идентификации энтеробактерий HiMedia KB016-5KT Hi24 (5 наборов) — стандартизированная колориметрическая система из 24 биохимических тестов для идентификации видов Enterobacteriaceae. Набор предназначен для работы с чистыми изолятами из клинических и не клинических образцов и не применяется непосредственно для исследования клинических образцов.

Идентификация товара

Параметр	Значение
Наименование	Набор для идентификации энтеробактерий Hi24™, модифицированный
Артикул	KB016

Назначение

KB016 — стандартизированная колориметрическая система идентификации, объединяющая 24 теста для определения видов Enterobacteriaceae в клинических и не клинических образцах с использованием чистого изолята.

Принцип идентификации

Набор Hi24™ представляет собой стандартизированную колориметрическую систему идентификации, включающую:

• 10 традиционных биохимических тестов;
• 3 теста на утилизацию хромогенных субстратов;
• 11 тестов на утилизацию углеводов.

Тесты основаны на изменении pH и утилизации субстрата. В процессе инкубации микроорганизмы претерпевают метаболические изменения, которые проявляются изменением цвета среды — самопроизвольно или после добавления реагента.

Состав набора

• 5/10/20 комплектов части I.
• 5/10/20 комплектов части II.
• Техническая инструкция к продукту.
• Таблица интерпретации результатов и лист внесения результатов.
• Индекс идентификации.
• Реактив TDA (R036) для теста на дезаминирование фенилаланина.
• Реактив Баритта A (R029) для теста Фогеса—Проскауэра.
• Реактив Баритта B (R030) для теста Фогеса—Проскауэра.
• Реактив метилового красного (1007) для теста с метиловым красным.
• Реактив Ковача (R008) для теста на индол.
• Реактив PYR (R043) для теста PYR.

Необходимые, но не входящие в комплект материалы

1. Стандарт Мак-Фарланда.
2. Инокуляционные петли, пипетки.
3. Обогатительная или выделительная питательная среда.

Тип образца

Чистый изолят, полученный из клинического или не клинического образца.

Подготовка и обращение с образцами

Сбор и обращение с образцами выполняют в соответствии с инструкцией по проведению анализа.

Подготовка инокулята

1. KB016 нельзя использовать непосредственно с клиническими образцами. Микроорганизмы, подлежащие идентификации, необходимо предварительно выделить и очистить. Используют только чистые культуры.
2. Выделите исследуемый микроорганизм на стандартной среде, например на питательном агаре (M001), или на дифференциальной среде, например на агаре МакКонки (M082).
3. Отберите одну изолированную колонию, внесите её в 5 мл бульона BHI (M210) и инкубируйте при 35–37 °C в течение 4–6 ч, пока мутность инокулята не достигнет оптической плотности 0,1 OD при 620 нм или значения 0,5 по стандарту Мак-Фарланда.
4. Для некоторых требовательных микроорганизмов может потребоваться инкубация более 6 ч. В этом случае инкубируйте культуру до достижения мутности инокулята 0,1 OD при 620 нм.
5. В качестве альтернативы приготовьте инокулят из 1–3 хорошо изолированных колоний, приготовив однородную суспензию в 2–3 мл стерильного физиологического раствора. Плотность суспензии должна соответствовать 0,1 OD при 620 нм.
6. Внесите полученный результат в лист внесения результатов.
7. Тест на оксидазу необходимо выполнять как неотъемлемую часть системы идентификации. Тест используют для дифференциации Enterobacteriaceae от других грамотрицательных палочек.

Внесение инокулята в набор

1. Вскройте набор с соблюдением асептических условий.
2. Снимите герметизирующую фольгу.
3. Внесите в каждую лунку по 50 мкл подготовленного инокулята методом поверхностного посева.
4. В качестве альтернативы каждую отдельную лунку можно инокулировать прокалыванием инокуляционной петлёй с набранным инокулятом.

Инкубация

• Температура инкубации: 35 ± 2 °C.
• Продолжительность инкубации: 18–24 ч.

Интерпретация результатов

Интерпретируйте результаты в соответствии с критериями, приведёнными в индексе идентификации.

Реактивы в лунки № 5–9 добавляйте в конце периода инкубации, то есть через 18–24 ч. Добавление реагентов выполняйте после завершения инкубации.

Технические характеристики

• Количество тестов: 24.
• Количество лунок: 2 стерильные непрозрачные белые полоски по 12 лунок.
• Объём среды в каждой лунке: 0,8 мл.
• Условия хранения при получении: 2–8 °C.
• Стерильность: соответствует критериям выпуска.
• Срок применения: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

Контроль качества

Внешний вид и распределение тестов

Набор содержит две стерильные непрозрачные белые полоски по 12 лунок. Полоска 1 содержит стерильные среды для тестов на ONPG, утилизацию лизина, утилизацию орнитина, определение уреазы, дезаминирование фенилаланина (TDA), реакцию Фогеса—Проскауэра, реакцию с метиловым красным, тест на индол, тест PYR, β-глюкуронидазу, α-галактозидазу и β-ксилозидазу.

Полоска 2 предназначена для гидролиза эскулина и тестов на утилизацию 11 углеводов: сахарозы, сорбитола, трегалозы, глюкозы, целлобиозы, мелибиозы, салицина, маннозы, мальтозы, рафинозы и лактозы.

Количество среды

Объём среды: 0,8 мл в каждой лунке.

Проверка стерильности

Результат: соответствует критериям выпуска.

Часть I

Тест ONPG — лунка № 1

• Изменение цвета с бесцветного на жёлтый указывает на положительную реакцию.
• Отсутствие изменения цвета указывает на отрицательную реакцию.

Утилизация лизина — лунка № 2

• Изменение цвета на фиолетовый или тёмно-фиолетовый указывает на положительную реакцию.
• Отсутствие изменения цвета или появление жёлтого цвета указывает на отрицательную реакцию.

Утилизация орнитина — лунка № 3

• Изменение цвета на фиолетовый или тёмно-фиолетовый указывает на положительную реакцию.
• Отсутствие изменения цвета или появление жёлтого цвета указывает на отрицательную реакцию.

Тест на уреазу — лунка № 4

• Изменение цвета на розовый указывает на положительную реакцию.
• Отсутствие изменения цвета указывает на отрицательную реакцию.

Тест на дезаминирование фенилаланина — лунка № 5

• Добавьте 2–3 капли реактива TDA (R036).
• Появление тёмно-зелёного цвета в течение 1 мин указывает на положительную реакцию.
• Отсутствие изменения цвета указывает на отрицательную реакцию.

Тест Фогеса—Проскауэра — лунка № 6

• Добавьте 2–3 капли реактива Баритта A (R029) и 1 каплю реактива Баритта B (R030).
• Положительная реакция характеризуется появлением розовато-красного цвета через 5–10 мин.
• Отсутствие изменения цвета или появление медного цвета вследствие реакции реагентов A и B указывает на отрицательную реакцию.

Тест с метиловым красным — лунка № 7

• Добавьте 2–3 капли индикатора метилового красного (1007).
• Положительная реакция характеризуется появлением красного цвета.
• Желтовато-оранжевый цвет указывает на отрицательную реакцию.

Тест на индол — лунка № 8

• Добавьте 2–3 капли реактива Ковача (R008).
• Положительная реакция характеризуется появлением розовато-красного кольца.
• Отсутствие красного кольца указывает на отрицательную реакцию.

Тест PYR — лунка № 9

• Добавьте 1–2 капли реактива PYR (R043).
• Положительная реакция характеризуется появлением и сохранением вишнёво-красного цвета.
• Появление розового, оранжевого или жёлтого цвета указывает на отрицательную реакцию.

β-глюкуронидаза — лунка № 10

• Положительная реакция характеризуется изменением цвета на синий или голубовато-зелёный.
• Отсутствие изменения цвета указывает на отрицательную реакцию.

α-галактозидаза — лунка № 11

• Положительная реакция характеризуется изменением цвета на розовый.
• Бесцветный или светло-жёлтый цвет указывает на отрицательную реакцию.

β-ксилозидаза — лунка № 12

• Положительная реакция характеризуется изменением цвета на фиолетовый.
• Бесцветный или светло-жёлтый цвет указывает на отрицательную реакцию.

Часть II

Гидролиз эскулина — лунка № 1

• Изменение кремового цвета на чёрный указывает на положительную реакцию.
• Отсутствие изменения цвета или появление коричневато-жёлтого цвета указывает на отрицательную реакцию.

Тест на ферментацию углеводов — лунки № 2–12

• Положительная реакция характеризуется изменением цвета на жёлтый.
• Красный цвет или отсутствие изменения цвета указывает на отрицательную