HiMedia KB016-5KT Набор для идентификации энтеробактерий Hi24 (5 наборов)

Набор для идентификации энтеробактерий Hi24 (модифицированный) HiMedia KB016-5KT представляет собой стандартизированную колориметрическую систему из 24 тестов. Применяется для идентификации видов семейства Enterobacteriaceae из клинических и неклинических образцов с использованием чистых изолятов.

Принцип измерения

Система основана на использовании десяти традиционных биохимических тестов, трех тестов на использование хромогенных субстратов и одиннадцати тестов на утилизацию углеводов. В основе лежит принцип изменения pH и использования субстратов: в процессе инкубации микроорганизмы вызывают метаболические изменения, которые проявляются в виде изменения цвета среды (спонтанно или после добавления специфического реагента).

Методика проведения анализа

Подготовка инокулята

Набор KB016 не предназначен для прямого использования с клиническими образцами; требуется предварительное выделение и очистка культуры.

1. Выделите целевой микроорганизм на общей среде (например, питательный агар M001) или дифференциальной среде (например, агар МакКонки M082).
2. Перенесите одну изолированную колонию в 5 мл бульона BHI (M210) и инкубируйте при 35–37 °C в течение 4–6 часов до достижения мутности 0,1 OD при 620 нм или 0,5 по стандарту МакФарланда. Для требовательных организмов время инкубации может быть увеличено.
3. Альтернативный метод: создать гомогенную суспензию из 1–3 изолированных колоний в 2–3 мл стерильного физиологического раствора до достижения плотности 0,1 OD при 620 нм.
4. Обязательно проведите тест на оксидазу для дифференциации Enterobacteriaceae от других грамотрицательных палочек.

Инокуляция набора

1. Асептически откройте набор и снимите защитную фольгу.
2. Внесите по 50 мкл подготовленного инокулята в каждую лунку методом поверхностного посева.
3. Альтернативно возможен метод посева путем «прокола» каждой лунки петлей с инокулятом.

Инкубация

• Температура: 35 ± 2 °C.
• Продолжительность: 18–24 часа.

Интерпретация результатов

Результаты оцениваются согласно идентификационному индексу. Реагенты в лунки № 5 и № 9 добавляются строго по окончании периода инкубации (через 18–24 часа).

Технические характеристики

Состав и контроль качества

• Вид: две стерильные белые непрозрачные полоски по 12 лунок в каждой.
• Объем среды: 0,8 мл в каждой лунке.
• Стерильность: соответствует критериям выпуска.
• Стрип 1: среды для тестов на ONPG, утилизацию лизина и орнитина, уреазу, дезаминирование фенилаланина (TDA), Фогеса-Проскауэра, метиловый красный, индол, PYR, $\beta$-глюкуронидазу, $\beta$-галактозидазу, $\beta$-ксилозидазу.
• Стрип 2: среды для гидролиза эскулина и утилизации 11 углеводов (сахароза, сорбитол, трегалоза, глюкоза, целлобиоза, мелибиоза, салицин, манноза, мальтоза, раффиноза, лактоза).

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение при получении: 2–8 °C.
• Использовать до истечения срока годности, указанного на этикетке.

Интерпретация результатов

Стрип I (Биохимические тесты)

Стрип II (Утилизация субстратов)

Ограничения и предостережения

• Мутность инокулята: при плотности менее 0,1 OD могут быть получены ложноотрицательные результаты.
• Слабые реакции: при тестах на ферментацию углеводов некоторые микроорганизмы дают слабую реакцию (записывается как $\pm$); в этом случае инкубацию продлевают до 48 часов. Оранжевый цвет через 48 часов считается отрицательным результатом.
• Мутации: возможны противоречивые результаты из-за мутаций или влияния сред, использованных для изоляции и культивирования.
• Температурный режим: перед использованием реагенты должны быть доведены до комнатной температуры.

Комплект поставки

• Наборы Часть I (в количестве 5/10/20 шт).
• Наборы Часть II (в количестве 5/10/20 шт).
• Технический вкладыш.
• Таблица интерпретации результатов и лист записи данных.
• Идентификационный индекс.
• Реагент TDA (R036) для теста на дезаминирование фенилаланина.
• Реагент Барритта A (R029) для теста Фогеса-Проскауэра.
• Реагент Барритта B (R030) для теста Фогеса-Проскауэра.
• Реагент метилового красного (1007).
• Реагент Ковакса (R008) для теста на индол.
• PYR-реагент (R043).

Необходимые дополнительные материалы

• Стандарт МакФарланда.
• Инокуляционные петли, пипетки.
• Среды для обогащения / изоляционные среды.