HiMedia KB016-20KT Набор для идентификации энтеробактерий Hi24 (20 наборов)

Колориметрический набор для идентификации энтеробактерий HiMedia KB016-20KT Набор для идентификации энтеробактерий Hi24 (20 наборов) рассчитан на проведение 24 биохимических тестов с использованием чистых изолятов. Набор предназначен для идентификации видов Enterobacteriaceae из клинических и неклинических образцов и не применяется непосредственно к клиническим пробам.

Назначение и принцип работы

HiMedia KB016-20KT представляет собой стандартизированную колориметрическую систему идентификации энтеробактерий, включающую 10 традиционных биохимических тестов, 3 теста на утилизацию хромогенных субстратов и 11 тестов на утилизацию углеводов.

Тесты основаны на изменении pH и утилизации субстратов. Во время инкубации микроорганизмы претерпевают метаболические изменения, которые проявляются изменением цвета среды — визуально непосредственно или после добавления соответствующего реактива.

Идентификация товара

Комплект набора

• 5, 10 или 20 наборов части I.
• 5, 10 или 20 наборов части II.
• Техническая инструкция к продукту.
• Таблица интерпретации результатов и бланк регистрации результатов.
• Индекс идентификации.
• Реактив ТДА (R036) для теста на дезаминазу фенилаланина.
• Реактив Баритта A (R029) для теста Фогеса—Проскауэра.
• Реактив Баритта B (R030) для теста Фогеса—Проскауэра.
• Реактив метилового красного (1007) для теста с метиловым красным.
• Реактив Ковача (R008) для теста на индол.
• Реактив PYR (R043) для теста PYR.

Материалы, необходимые, но не входящие в комплект

1. Стандарт Мак-Фарланда.
2. Инокуляционные петли и пипетки.
3. Обогатительная или изоляционная питательная среда.

Тип образца

Чистый изолят, полученный из клинического или неклинического образца.

Подготовка инокулята

1. Набор KB016 нельзя использовать непосредственно с клиническими образцами. Идентифицируемые микроорганизмы необходимо предварительно выделить и очистить; допускается использовать только чистые культуры.
2. Выделите идентифицируемый микроорганизм на стандартной среде, например на питательном агаре (M001), или на дифференциальной среде, например на агаре МакКонки (M082).
3. Отберите одну изолированную колонию, внесите её в 5 мл бульона BHI (M210) и инкубируйте при 35–37 °C в течение 4–6 ч, пока мутность инокулята не достигнет оптической плотности 0,1 OD при 620 нм или показателя 0,5 по стандарту Мак-Фарланда.
4. Для некоторых требовательных микроорганизмов может потребоваться инкубация более 6 ч. В таком случае инкубируйте культуру до достижения мутности инокулята 0,1 OD при 620 нм.
5. Альтернативный способ приготовления инокулята: отберите 1–3 хорошо изолированные колонии и приготовьте однородную суспензию в 2–3 мл стерильного физиологического раствора. Плотность суспензии должна составлять 0,1 OD при 620 нм.
6. Зарегистрируйте результат в бланке регистрации результатов.
7. Тест на оксидазу должен быть выполнен как составная часть системы идентификации. Тест используют для дифференциации Enterobacteriaceae от других грамотрицательных палочек.

Внесение инокулята в набор

1. Вскройте набор с соблюдением правил асептики.
2. Снимите герметизирующую фольгу.
3. Внесите в каждую лунку по 50 мкл приготовленного инокулята методом поверхностного посева.
4. В качестве альтернативы каждую отдельную лунку можно инокулировать прокалыванием инокуляционной петлёй с порцией инокулята.

Инкубация

• Температура инкубации: 35 ± 2 °C.
• Продолжительность инкубации: 18–24 ч.

Интерпретация результатов

Интерпретируйте результаты в соответствии с критериями, приведёнными в индексе идентификации.

Реактивы в лунки № 5 и № 9 следует добавлять в конце периода инкубации, то есть через 18–24 ч. В соответствии с разделом контроля качества добавление реактивов выполняют в конце инкубации через 18–24 ч.

Часть I

Тест ONPG, лунка № 1

• Изменение цвета с бесцветного на жёлтый указывает на положительную реакцию.
• Отсутствие изменения цвета указывает на отрицательную реакцию.

Утилизация лизина, лунка № 2

• Изменение цвета на пурпурный или тёмно-пурпурный указывает на положительную реакцию.
• Отсутствие изменения цвета или появление жёлтого цвета указывает на отрицательную реакцию.

Утилизация орнитина, лунка № 3

• Изменение цвета на пурпурный или тёмно-пурпурный указывает на положительную реакцию.
• Отсутствие изменения цвета или появление жёлтого цвета указывает на отрицательную реакцию.

Тест на уреазу, лунка № 4

• Изменение цвета на розовый указывает на положительную реакцию.
• Отсутствие изменения цвета указывает на отрицательную реакцию.

Тест на дезаминирование фенилаланина, лунка № 5

1. Добавьте 2–3 капли реактива ТДА (R036).
2. Появление тёмно-зелёного цвета в течение 1 мин указывает на положительную реакцию.
3. Отсутствие изменения цвета указывает на отрицательную реакцию.

Тест Фогеса—Проскауэра, лунка № 6

1. Добавьте 2–3 капли реактива Баритта A (R029) и 1 каплю реактива Баритта B (R030).
2. Появление розово-красного цвета через 5–10 мин указывает на положительную реакцию.
3. Отсутствие изменения цвета или появление медного цвета вследствие реакции реактивов A и B указывает на отрицательную реакцию.

Тест с метиловым красным, лунка № 7

1. Добавьте 2–3 капли индикатора метилового красного (1007).
2. Появление красного цвета указывает на положительную реакцию.
3. Желтовато-оранжевый цвет указывает на отрицательную реакцию.

Тест на индол, лунка № 8

1. Добавьте 2–3 капли реактива Ковача (R008).
2. Появление розово-красного кольца указывает на положительную реакцию.
3. Отсутствие красного кольца указывает на отрицательную реакцию.

Тест PYR, лунка № 9

1. Добавьте 1–2 капли реактива PYR (R043).
2. Появление и сохранение вишнёво-красного цвета указывает на положительную реакцию.
3. Появление розового, оранжевого или жёлтого цвета указывает на отрицательную реакцию.

β-глюкуронидаза, лунка № 10

• Изменение цвета на синий или голубовато-зелёный указывает на положительную реакцию.
• Отсутствие изменения цвета указывает на отрицательную реакцию.

α-галактозидаза, лунка № 11

• Изменение цвета на розовый указывает на положительную реакцию.
• Бесцветный или светло-жёлтый цвет указывает на отрицательную реакцию.

β-ксилозидаза, лунка № 12

• Изменение цвета на пурпурный указывает на положительную реакцию.
• Бесцветный или светло-жёлтый цвет указывает на отрицательную реакцию.

Часть II

Гидролиз эскулина, лунка № 1

• Изменение кремового цвета на чёрный указывает на положительную реакцию.
• Отсутствие изменения цвета или появление коричневато-жёлтого цвета указывает на отрицательную реакцию.

Тесты на ферментацию углеводов, лунки № 2–12

• Изменение цвета на жёлтый указывает на положительную реакцию.
• Красный цвет или отсутствие изменения цвета указывает на отрицательную реакцию.

Таблица интерпретации результатов — полоска I