HiMedia KB016-20KT Набор для идентификации энтеробактерий Hi24 (20 наборов)

Набор для идентификации энтеробактерий Hi24 (KB016-20KT) производства HiMedia представляет собой стандартизированную колориметрическую систему из 24 тестов. Применяется для видового определения бактерий семейства Enterobacteriaceae из клинических и неклинических образцов с использованием чистых изолятов.

Принцип работы

Система основана на использовании десяти традиционных биохимических тестов, трех тестов на использование хромогенных субстратов и одиннадцати тестов на утилизацию углеводов. Определение базируется на принципе изменения pH среды и утилизации субстратов: в процессе инкубации микроорганизмы вызывают метаболические изменения, которые проявляются в виде изменения цвета среды (спонтанно или после добавления специфического реагента).

Область применения

Набор предназначен для работы с чистыми изолятами, полученными из клинических и неклинических проб. Не допускается использование набора непосредственно для анализа клинического материала без предварительного выделения и очистки культуры.

Методика проведения анализа

Подготовка инокулята

1. Изолируйте микроорганизм на общей среде (например, питательный агар M001) или дифференциальной среде (например, агар МакКонки M082).
2. Перенесите одну изолированную колонию в 5 мл бульона BHI (M210) и инкубируйте при 35–37 °C в течение 4–6 часов до достижения мутности 0,1 OD при 620 нм (или 0,5 по стандарту МакФарланда). Для требовательных организмов время инкубации может быть увеличено.
3. Альтернативный метод: создать гомогенную суспензию из 1–3 изолированных колоний в 2–3 мл стерильного физиологического раствора до достижения плотности 0,1 OD при 620 нм.
4. Важно: Обязательно проведите тест на оксидазу, чтобы дифференцировать Enterobacteriaceae от других грамотрицательных палочек.

Инокуляция и инкубация

1. Асептически откройте набор и снимите защитную фольгу.
2. Внесите в каждую лунку по 50 мкл подготовленного инокулята методом поверхностного посева или путем прокалывания каждой лунки петлей с инокулятом.
3. Инкубируйте при температуре 35 ± 2 °C в течение 18–24 часов.

Интерпретация результатов

Результаты оцениваются согласно идентификационному индексу. Реагенты в лунки № 5 и № 9 добавляются строго по окончании периода инкубации (через 18–24 часа).

Технические характеристики

Состав набора (на 20 наборов)

• Стрипы Часть I (20 шт.)
• Стрипы Часть II (20 шт.)
• Техническая вставка
• Таблица интерпретации результатов и лист записи данных
• Идентификационный индекс
• Реагент TDA (R036) для теста на дезаминазу фенилаланина
• Реагент Баритта А (R029) для теста Фогеса-Проскауэра
• Реагент Баритта B (R030) для теста Фогеса-Проскауэра
• Реагент метилового красного (1007) для теста на метиловый красный
• Реагент Ковакса (R008) для теста на индол
• Реагент PYR (R043) для теста на PYR

Параметры среды

• Объем среды в каждой лунке: 0,8 мл
• Внешний вид: две стерильные белые непрозрачные полоски по 12 лунок каждая.

Интерпретация результатов

Стрип I (Биохимические тесты)

Стрип II (Гидролиз эскулина и углеводы)

Ограничения и предостережения

• Температурный режим: Перед использованием реагенты должны быть доведены до комнатной температуры.
• Слабые реакции: При ферментации углеводов некоторые микроорганизмы могут давать слабую реакцию (записывается как $\pm$). В таких случаях инкубацию продлевают до 48 часов; оранжевый цвет через 48 часов считается отрицательным результатом.
• Погрешности: Ошибочные ложноотрицательные результаты возможны, если мутность инокулята ниже 0,1 OD.
• Мутации: В отдельных случаях возможны противоречивые результаты из-за мутаций штаммов или влияния сред, использованных для первичного выделения.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение: При получении и в процессе хранения — от +2 до +8 °C.
• Безопасность: Только для профессионального использования in vitro. При работе использовать средства индивидуальной защиты (перчатки, халаты, очки).
• Утилизация: После использования наборы и инструменты (петли, пипетки) подлежат дезинфекции с последующим сжиганием или автоклавированием в соответствии с правилами работы с инфекционным материалом.

Дополнительное оборудование

Для работы с набором требуются (не входят в комплект):

• Стандарт МакФарланда
• Инокуляционные петли, пипетки
• Среды для обогащения и изоляции