HiMedia KB016-10KT Набор для идентификации энтеробактерий Hi24 (10 наборов)

Набор для идентификации энтеробактерий HiMedia KB016-10KT Hi24 (10 наборов) — стандартизованная колориметрическая система из 24 биохимических тестов. Набор предназначен для идентификации видов Enterobacteriaceae из клинических и не клинических образцов после выделения чистой культуры; непосредственное исследование клинических образцов не допускается.

Назначение

HiMedia KB016-10KT применяют для идентификации энтеробактерий по результатам 24 тестов:

• 10 стандартных биохимических тестов;
• 3 теста утилизации хромогенных субстратов;
• 11 тестов утилизации углеводов.

Тип образца: чистая изолированная культура из клинического или не клинического образца.

Система основана на изменении pH и утилизации субстратов. При инкубации микроорганизмы претерпевают метаболические изменения, которые проявляются изменением цвета среды — спонтанно или после добавления реагента.

Идентификация товара

Состав набора

В комплект входят:

• 5, 10 или 20 наборов части I;
• 5, 10 или 20 наборов части II;
• техническая инструкция к продукту;
• таблица интерпретации результатов и бланк регистрации результатов;
• индекс идентификации;
• реагент TDA (R036) для теста на дезаминирование фенилаланина;
• реагент Баритта A (R029) для теста Фогеса—Проскауэра;
• реагент Баритта B (R030) для теста Фогеса—Проскауэра;
• реагент метилового красного (1007) для теста с метиловым красным;
• реагент Ковача (R008) для теста на индол;
• реагент PYR (R043) для теста PYR.

Материалы и оборудование, не входящие в комплект

• стандарт Мак-Фарланда;
• иноку丄яционные петли;
• пипетки;
• среда обогащения или среда для выделения культуры.

Подготовка посевного материала

1. Набор KB016 нельзя использовать непосредственно с клиническими образцами. Идентифицируемые микроорганизмы предварительно выделяют и очищают; используют только чистые культуры.
2. Выделяют микроорганизм на обычной среде, например на питательном агаре (M001), или на дифференциальной среде, например на агаре МакКонки (M082).
3. Отбирают одну изолированную колонию, инокулируют в 5 мл бульона BHI (M210) и инкубируют при 35–37 °C в течение 4–6 ч до достижения мутности посевного материала 0,1 OD при 620 нм или соответствия стандарту Мак-Фарланда 0,5.
4. Для некоторых требовательных микроорганизмов может потребоваться инкубация более 6 ч. В этом случае инкубируют до достижения мутности посевного материала 0,1 OD при 620 нм.
5. В качестве альтернативы отбирают 1–3 хорошо изолированные колонии и готовят однородную суспензию в 2–3 мл стерильного физиологического раствора. Плотность суспензии должна составлять 0,1 OD при 620 нм.
6. Результат регистрируют в бланке регистрации результатов.
7. Тест на оксидазу выполняют обязательно, поскольку он является составной частью системы идентификации и необходим для дифференциации Enterobacteriaceae от других грамотрицательных палочек.

Инокуляция набора

1. Вскройте набор с соблюдением асептических условий.
2. Снимите герметизирующую фольгу.
3. Внесите в каждую лунку по 50 мкл подготовленного посевного материала методом поверхностного посева.
4. Альтернативный способ инокуляции — прокалывание каждой отдельной лунки инокуляционной петлёй с посевным материалом.

Инкубация

• Температура инкубации: 35 ± 2 °C.
• Продолжительность инкубации: 18–24 ч.

Интерпретация результатов

Результаты интерпретируют в соответствии с критериями, приведёнными в индексе идентификации.

Реагенты в лунки № 5–9 добавляют в конце периода инкубации, то есть через 18–24 ч. Для тестов, предусматривающих добавление реагентов, реагенты добавляют после завершения инкубации в течение 18–24 ч.

Тесты части I

Лунка № 1 — тест ONPG

• Изменение цвета с бесцветного на жёлтый указывает на положительную реакцию.
• Отсутствие изменения цвета указывает на отрицательную реакцию.

Лунка № 2 — утилизация лизина

• Изменение цвета на фиолетовый или тёмно-фиолетовый указывает на положительную реакцию.
• Отсутствие изменения цвета или появление жёлтого цвета указывает на отрицательную реакцию.

Лунка № 3 — утилизация орнитина

• Изменение цвета на фиолетовый или тёмно-фиолетовый указывает на положительную реакцию.
• Отсутствие изменения цвета или появление жёлтого цвета указывает на отрицательную реакцию.

Лунка № 4 — тест на уреазу

• Изменение цвета на розовый указывает на положительную реакцию.
• Отсутствие изменения цвета указывает на отрицательную реакцию.

Лунка № 5 — дезаминирование фенилаланина

1. Добавьте 2–3 капли реагента TDA (R036).
2. Появление тёмно-зелёного цвета в течение 1 мин указывает на положительную реакцию.
3. Отсутствие изменения цвета указывает на отрицательную реакцию.

Лунка № 6 — тест Фогеса—Проскауэра

1. Добавьте 2–3 капли реагента Баритта A (R029).
2. Добавьте 1 каплю реагента Баритта B (R030).
3. Появление розовато-красного цвета через 5–10 мин указывает на положительную реакцию.
4. Отсутствие изменения цвета или появление медного цвета вследствие реакции реагентов A и B указывает на отрицательную реакцию.

Лунка № 7 — тест с метиловым красным

1. Добавьте 2–3 капли индикатора метилового красного (1007).
2. Появление красного цвета указывает на положительную реакцию.
3. Желтовато-оранжевый цвет указывает на отрицательную реакцию.

Лунка № 8 — тест на индол

1. Добавьте 2–3 капли реагента Ковача (R008).
2. Появление розовато-красного кольца указывает на положительную реакцию.
3. Отсутствие красного кольца указывает на отрицательную реакцию.

Лунка № 9 — тест PYR

1. Добавьте 1–2 капли реагента PYR (R043).
2. Появление и сохранение вишнёво-красного цвета указывает на положительную реакцию.
3. Появление розового, оранжевого или жёлтого цвета указывает на отрицательную реакцию.

Лунка № 10 — β-глюкуронидаза

• Изменение цвета на синий или синевато-зелёный указывает на положительную реакцию.
• Отсутствие изменения цвета указывает на отрицательную реакцию.

Лунка № 11 — α-галактозидаза

• Изменение цвета на розовый указывает на положительную реакцию.
• Бесцветный или светло-жёлтый цвет указывает на отрицательную реакцию.

Лунка № 12 — β-ксилозидаза

• Изменение цвета на фиолетовый указывает на положительную реакцию.
• Бесцветный или светло-жёлтый цвет указывает на отрицательную реакцию.

Тесты части II

Лунка № 1 — гидролиз эскулина

• Изменение кремового цвета на чёрный указывает на положительную реакцию.
• Отсутствие изменения цвета или появление коричневато-жёлтого цвета указывает на отрицательную реакцию.

Лунки № 2–12 — ферментация углеводов

• Изменение цвета на жёлтый указывает на положительную реакцию.
• Красный цвет или отсутствие изменения цвета указывает на отрицательную реакцию.

Таблица интерпретации результатов — полоска I