HiMedia KB016-10KT Набор для идентификации энтеробактерий Hi24 (10 наборов)

Набор для идентификации энтеробактерий Hi24 (модифицированный) HiMedia KB016-10KT представляет собой стандартизированную колориметрическую систему из 24 тестов. Применяется для идентификации видов семейства Enterobacteriaceae из клинических и неклинических образцов с использованием чистых изолятов.

Принцип работы

Система основана на использовании десяти традиционных биохимических тестов, трех тестов на использование хромогенных субстратов и одиннадцати тестов на утилизацию углеводов. В основе анализа лежит принцип изменения pH и использования субстратов: в процессе инкубации микроорганизмы вызывают метаболические изменения, которые проявляются в виде изменения цвета среды (спонтанно или после добавления специфического реагента).

Область применения

Набор предназначен для профессионального использования в микробиологических лабораториях для идентификации чистых культур энтеробактерий. Не предназначен для прямого использования с клиническим материалом; требуется предварительное выделение и очистка микроорганизма.

Методика проведения анализа

Подготовка инокулята

1. Изолируйте целевой микроорганизм на общей среде, например, питательном агаре (M001), или дифференциальной среде, такой как агар МакКонки (M082).
2. Перенесите одну изолированную колонию в 5 мл бульона BHI (M210).
3. Инкубируйте при температуре 35–37 °C в течение 4–6 часов до достижения мутности 0,1 OD при 620 нм (или 0,5 по стандарту МакФарланда). Для привередливых организмов время инкубации может быть увеличено.
4. Альтернативный метод: создать гомогенную суспензию из 1–3 изолированных колоний в 2–3 мл стерильного физиологического раствора с плотностью 0,1 OD при 620 нм.
5. Важно: Обязательно проведите тест на оксидазу для дифференциации Enterobacteriaceae от других грамотрицательных палочек.

Инокуляция набора

1. Асептически откройте набор и снимите защитную фольгу.
2. Внесите по 50 мкл подготовленного инокулята в каждую лунку методом поверхностного нанесения.
3. Альтернативно возможен метод инокуляции путем прокалывания каждой лунки петлей с инокулятом.

Инкубация

• Температура: 35 ± 2 °C.
• Продолжительность: 18–24 часа.

Интерпретация результатов

Результаты оцениваются согласно идентификационному индексу. Реагенты в лунки № 5 и № 9 добавляются строго по окончании периода инкубации (через 18–24 часа).

Технические характеристики

Состав набора (на 10 наборов)

• Стрипы Часть I: 10 шт.
• Стрипы Часть II: 10 шт.
• Технический вкладыш.
• Таблица интерпретации результатов и лист регистрации данных.
• Идентификационный индекс.
• Реагент TDA (R036) для теста на дезаминацию фенилаланина.
• Реагент Баритта А (R029) для теста Вогеса-Проскауэра.
• Реагент Баритта B (R030) для теста Вогеса-Проскауэра.
• Реагент метилового красного (1007) для теста на метиловый красный.
• Реагент Ковача (R008) для теста на индол.
• Реагент PYR (R043) для теста на PYR.

Параметры среды

• Объем среды в каждой лунке: 0,8 мл.
• Вид: два стерильных белых непрозрачных стрипа по 12 лунок в каждом.

Интерпретация результатов

Стрип I (Биохимические и ферментативные тесты)

Стрип II (Гидролиз эскулина и ферментация углеводов)

Ограничения и предостережения

• Температурный режим: Перед использованием реагенты должны быть доведены до комнатной температуры.
• Слабые реакции: При ферментации углеводов некоторые микроорганизмы дают слабую реакцию (записывается как $\pm$). В этом случае инкубацию продлевают до 48 часов; оранжевый цвет через 48 часов считается отрицательным результатом.
• Мутации: Возможны противоречивые результаты из-за мутаций штаммов или влияния сред, использованных для изоляции и культивирования.
• Плотность инокулята: Если мутность инокулята ниже 0,1 OD, возможны ложноотрицательные результаты.
• Тип культуры: Использование обогащенной культуры вместо суспензии делает результаты более выраженными.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение: При получении и в процессе хранения — от +2 до +8 °C.
• Срок годности: Согласно этикетке.
• Утилизация: После использования стрипы и инструменты (петли, пипетки) подлежат дезинфекции с последующим сжиганием или автоклавированием в специальных пакетах для утилизации.

Дополнительное оборудование (не входит в комплект)

• Стандарт МакФарланда.
• Инокуляционные петли, пипетки.
• Среды для обогащения и изоляции.