HiMedia KB014-5KT Набор для идентификации Acinetobacter HiAcinetobacter (5 наборов)

Система идентификации Acinetobacter HiMedia KB014-5KT (HiAcinetobacter) представляет собой набор из 24 биохимических тестов для дифференциации бактерий рода Acinetobacter. Комплект включает 5 наборов, каждый из которых рассчитан на проведение 10 определений.

Принцип измерения

Система KB014 основана на использовании 24 стандартных колориметрических биохимических тестов. Определение базируется на принципе изменения pH и утилизации субстратов: в процессе инкубации микроорганизмы подвергаются метаболическим изменениям, которые проявляются в виде изменения цвета среды (спонтанно или после добавления специфического реагента).

Область применения

Набор предназначен для идентификации чистых культур микроорганизмов. Система не может быть использована напрямую для анализа клинических образцов; предварительно микроорганизмы должны быть изолированы на соответствующих средах.

Методика проведения анализа

Подготовка инокулята

1. Изолируйте микроорганизм на стандартной среде, например, на питательном агаре (M001) или соево-казеиновом агаре (M290).
2. Возьмите одну изолированную колонию и инокулируйте в 5 мл бульона Brain Heart Infusion.
3. Инкубируйте при 37 °C в течение 4–6 часов до достижения мутности 0,1 OD при 620 нм (или 0,5 по стандарту МакФарланда). Для требовательных организмов время инкубации может быть увеличено.
4. Альтернативный метод: приготовьте гомогенную суспензию из 1–3 хорошо изолированных колоний в 2–3 мл стерильного физиологического раствора до достижения плотности 0,1 OD при 620 нм.

Примечание: при плотности инокулята ниже 0,1 OD возможны ложноотрицательные результаты.

Инокуляция и инкубация

1. В асептических условиях откройте набор.
2. Внесите в каждую лунку по 50 мкл подготовленного инокулята методом поверхностного нанесения или путем прокалывания каждой лунки петлей с инокулятом.
3. Инкубируйте при температуре 35–37 °C в течение 18–24 часов.

Интерпретация результатов

Результаты оцениваются согласно таблицам интерпретации. Реагенты в лунки № 1, 2, 7 и 10 части А добавляются строго по окончании периода инкубации (через 18–24 часа).

Особенности части А:

• Лунка 1 (Индол): добавить 1–2 капли реагента Ковача. Положительный результат — появление красно-розового цвета в течение 10 с.
• Лунка 2 (Фогес-Проскапер): добавить 2–3 капли реагента Баритта А и 1–2 капли реагента Баритта Б. Положительный результат — красно-розовый цвет через 5–10 мин.
• Лунка 3 (Цитрат): без реагентов. Положительный результат — изменение цвета с зеленого на синий.
• Лунка 4 (Лизин): без реагентов. Положительный результат — изменение цвета с оливково-зеленого на пурпурный; желтый цвет — отрицательный результат.
• Лунка 5 (Орнитин): без реагентов. Положительный результат — изменение цвета с оливково-зеленого на пурпурный; желтый цвет — отрицательный результат.
• Лунка 6 (Аргинин): без реагентов. Положительный результат — изменение цвета с оливково-зеленого на пурпурный; желтый цвет — отрицательный результат.
• Лунка 7 (Восстановление нитратов): добавить 1–2 капли сульфаниловой кислоты и 1–2 капли раствора $\alpha$-нафтиламина. Положительный результат — розово-красный цвет.
• Лунка 8 (Малонат): без реагентов. Положительный результат — изменение цвета со светло-зеленого на синий.
• Лунка 9 (Уреаза): без реагентов. Положительный результат — изменение цвета с оранжево-желтого на розовый.
• Лунка 10 (Деаминирование фенилаланина): добавить 2–3 капли реагента TDA. Положительный результат — зеленый цвет.
• Лунка 11 (Продукция H₂S): без реагентов. Положительный результат — изменение цвета с оранжево-желтого на черный.
• Лунка 12 (ONPG): без реагентов. Положительный результат — изменение цвета с бесцветного на желтый.

Особенности части B:

• Лунки 1–12 (Ферментация углеводов): без реагентов. Положительный результат (продукция кислоты) — изменение цвета с красного на желтый. Отрицательный результат — среда остается красной.

Технические характеристики

Биохимические реакции (Часть А)

Интерпретация результатов (Часть B)

Комплект поставки

Каждый набор рассчитан на 10 тестов и содержит:

• 10 стрипов KB014;
• Технический вкладыш;
• Таблицу интерпретации результатов и бланк записи данных;
• Индекс идентификации;
• Реагент Ковача (R008);
• Реагент Баритта А (R029);
• Реагент Баритта Б (R030);
• Реагент TDA (R036);
• Раствор $\alpha$-нафтиламина (R009);
• Сульфаниловая кислота 0,8 % (R015).

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения: 2–8 °C.
• Срок годности: 12 месяцев.
• Меры предосторожности:
  • Работа с клиническими образцами и культурами должна проводиться с учетом их потенциальной патогенности.
  • Соблюдение асептических условий при инокуляции и работе со стрипами обязательно.
  • Избегайте контакта реагентов с кожей, глазами и одеждой.
• Утилизация: использованные стрипы и инструменты (пипетки, петли) подлежат дезинфекции с последующим сжиганием или автоклавированием в специальных пакетах для отходов.

Дополнительные рекомендации по интерпретации

• Перед использованием реагенты должны быть доведены до комнатной температуры.
• При слабой реакции в тестах на ферментацию углеводов следует зафиксировать результат как «+» и продолжить инкубацию до 48 часов. Оранжевый цвет через 48 часов интерпретируется как отрицательная реакция.
• Возможны противоречивые результаты вследствие мутаций микроорганизмов или влияния сред, использованных для изоляции и культивирования.