HiMedia KB014-20KT Набор для идентификации Acinetobacter HiAcinetobacter (20 наборов)

Набор для идентификации Acinetobacter HiAcinetobacter (KB014-20KT) производства HiMedia, включающий 24 биохимических теста. Система предназначена для дифференциации видов Acinetobacter на основе анализа метаболических свойств микроорганизмов.

Принцип измерения

Система KB014 представляет собой стандартизированную колориметрическую систему идентификации, использующую 24 традиционных биохимических теста. Принцип работы основан на изменении pH среды и утилизации субстратов: в процессе инкубации микроорганизмы вызывают метаболические изменения, которые проявляются в виде изменения цвета среды (спонтанно или после добавления специфического реагента).

Область применения

Набор используется для идентификации чистых культур микроорганизмов рода Acinetobacter. Система не может быть использована напрямую для анализа клинических образцов; предварительно требуется изоляция микроорганизмов на соответствующих селективных средах.

Методика проведения анализа

Подготовка инокулята

1. Изолируйте исследуемый организм на стандартной среде, например, на питательном агаре (M001) или агаре с соевым казеином (M290).
2. Выберите одну изолированную колонию и инокулируйте в 5 мл бульона Brain Heart Infusion.
3. Инкубируйте при 37 °C в течение 4–6 часов до достижения мутности 0,1 OD при 620 нм (соответствует стандарту 0,5 по МакФарланду). Для требовательных организмов время инкубации может превысить 6 часов.
4. Альтернативный метод: создайте гомогенную суспензию из 1–3 изолированных колоний в 2–3 мл стерильного физиологического раствора до достижения плотности 0,1 OD при 620 нм.

Примечание: при плотности инокулята ниже 0,1 OD возможны ложноотрицательные результаты.

Инокуляция и инкубация

1. В асептических условиях откройте набор.
2. Внесите в каждую лунку по 50 мкл подготовленного инокулята методом поверхностного посева или путем прокалывания каждой лунки петлей с инокулятом.
3. Инкубируйте при температуре 35–37 °C в течение 18–24 часов.

Интерпретация результатов

Результаты оцениваются согласно таблицам интерпретации. Реагенты в лунки № 1, 2, 7 и 10 части А добавляются строго по окончании периода инкубации (18–24 часа).

Часть А: Биохимические тесты

• Лунка № 1 (Индол): добавить 1–2 капли реагента Ковача. Положительный результат: появление красно-розового цвета в течение 10 секунд.
• Лунка № 2 (Фогес-Проскапер): добавить 2–3 капли реагента Барит А и 1–2 капли реагента Барит Б. Положительный результат: появление красно-розового цвета через 5–10 минут.
• Лунка № 3 (Цитрат): без реагентов. Положительный результат: изменение цвета с зеленого на синий.
• Лунка № 4 (Лизин): без реагентов. Положительный результат: изменение цвета с оливково-зеленого на пурпурный.
• Лунка № 5 (Орнитин): без реагентов. Положительный результат: изменение цвета с оливково-зеленого на пурпурный.
• Лунка № 6 (Аргинин): без реагентов. Положительный результат: изменение цвета с оливково-зеленого на пурпурный.
• Лунка № 7 (Восстановление нитратов): добавить 1–2 капли сульфаниловой кислоты и 1–2 капли раствора $\alpha$-нафтиламина. Положительный результат: появление розово-красного цвета.
• Лунка № 8 (Малонат): без реагентов. Положительный результат: изменение цвета со светло-зеленого на синий.
• Лунка № 9 (Уреаза): без реагентов. Положительный результат: изменение цвета с оранжево-желтого на розовый.
• Лунка № 10 (Деаминация фенилаланина): добавить 2–3 капли реагента TDA. Положительный результат: появление зеленого цвета.
• Лунка № 11 (Продукция H₂S): без реагентов. Положительный результат: изменение цвета с оранжево-желтого на черный.
• Лунка № 12 (ONPG): без реагентов. Положительный результат: изменение цвета с бесцветного на желтый.

Часть Б: Ферментация углеводов

• Лунки № 1–12: без реагентов. Положительный результат (продукция кислоты) характеризуется изменением цвета среды с красного на желтый.

Технические характеристики

Биохимические реакции (Часть А)

Интерпретация результатов (Часть Б)

Комплект поставки

Набор рассчитан на выполнение 10 тестов и включает:

• 10 стрипов KB014;
• Технический вкладыш;
• Таблицу интерпретации результатов и лист записи данных;
• Индекс идентификации;
• Реагент Ковача (R008);
• Реагент Барит А (R029);
• Реагент Барит Б (R030);
• Реагент TDA (R036);
• Раствор $\alpha$-нафтиламина (R009);
• Сульфаниловая кислота, 0,8 % (R015).

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения: 2–8 °C.
• Срок годности: 12 месяцев.
• Меры предосторожности:
  • Работа с клиническими образцами и культурами должна проводиться с учетом их потенциальной патогенности.
  • Соблюдение асептических условий при инокуляции и работе со стрипами.
  • Избегать контакта реагентов с кожей, глазами и одеждой.
• Утилизация: Использованные стрипы и инструменты (пипетки, петли) подлежат дезинфекции с последующим сжиганием или автоклавированием в специальных пакетах для утилизации.

Особенности интерпретации

1. Перед использованием доведите реагенты до комнатной температуры.
2. При слабой реакции в тестах на ферментацию углеводов зафиксируйте результат как «+» и продлите инкубацию до 48 часов. Оранжевый цвет через 48 часов считается отрицательным результатом.
3. Возможны противоречивые результаты вследствие мутаций микроорганизмов или влияния сред, использованных для изоляции и культивирования.