HiMedia KB013-5KT Набор для идентификации Bacillus HiBacillus (5 наборов)

Набор для идентификации бактерий HiMedia KB013-5KT HiBacillus предназначен для определения видов Bacillus по 12 биохимическим тестам и содержит материалы на 5 анализов. Набор применяют с чистыми изолятами из клинических и неклинических образцов, а также для валидации известных лабораторных штаммов; непосредственное исследование клинических или пищевых образцов не допускается.

Идентификация изделия

Назначение

KB013 представляет собой комбинацию из 12 тестов для идентификации видов Bacillus из клинических и неклинических образцов с использованием чистого изолята. Набор также может применяться для валидации известных лабораторных штаммов.

Принцип измерения

KB013 — стандартизированная колориметрическая тест-система для идентификации видов Bacillus, основанная на определении утилизации углеводов и других биохимических реакций. Тесты используют изменение pH и утилизацию субстратов как аналитический принцип. При инкубации виды Bacillus вызывают метаболические изменения, которые проявляются изменением цвета питательной среды; результат оценивают визуально или после добавления соответствующего реагента.

Технические характеристики

• Тип изделия: набор для идентификации бактерий Bacillus
• Количество тестов: 12
• Количество наборов в поставляемой модификации KB013-5KT: 5
• Количество среды: 0,8 мл в каждой лунке
• Количество лунок в полоске: 12
• Формат: стерильная белая непрозрачная полоска с 12 лунками
• Тесты в составе полоски: утилизация малоната, тест Фогеса—Проскауэра, утилизация цитрата, ONPG, восстановление нитрата, каталаза, утилизация аргинина и утилизация 5 углеводов
• Углеводы: сахароза, маннитол, глюкоза, арабиноза, трегалоза
• Контроль стерильности: соответствует критериям выпуска
• Тип образца: чистый изолят из клинического образца или неклинической пробы
• Условия хранения после получения: 2–8 °C
• Срок годности: использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке

Комплект поставки

Каждый набор содержит стерильные среды для проведения тестов с видами Bacillus. В зависимости от исполнения комплект может содержать 5, 10 или 20 наборов KB013, достаточных для выполнения соответственно 5, 10 или 20 тестов. Для модификации KB013-5KT предусмотрено 5 наборов.

В комплект входят:

1. Стерильные среды для тестов на утилизацию малоната, теста Фогеса—Проскауэра, утилизации цитрата, ONPG, восстановления нитрата, каталазы, утилизации аргинина и утилизации сахарозы, маннитола, глюкозы, арабинозы и трегалозы.
2. Техническая инструкция к продукту.
3. Сульфаниловая кислота 0,8 % (R015) для теста на восстановление нитрата.
4. Раствор α-нафтиламина (R009) для теста на восстановление нитрата.
5. Индекс идентификации.
6. Реагент Баритта A (R029) для теста Фогеса—Проскауэра.
7. Реагент Баритта B (R030) для теста Фогеса—Проскауэра.
8. Таблица интерпретации результатов и бланк внесения результатов.

Дополнительно необходимые материалы

В комплект не входят:

1. Стандарт Мак-Фарланда.
2. Инокуляционные петли и пипетки.
3. Обогатительная или изоляционная питательная среда.

Тип образца и пробоподготовка

Тип образца

Для анализа используют чистый изолят из клинического образца или неклинической пробы.

Подготовка инокулята

KB013 нельзя использовать непосредственно с клиническими или пищевыми образцами. Микроорганизм, подлежащий идентификации, предварительно изолируют и очищают.

1. Отберите одну изолированную колонию.
2. Инокулируйте колонию в 5 мл бульона BHI (M210).
3. Инкубируйте при 35–37 °C в течение 6–8 ч до достижения мутности инокулята 0,1 OD при 620 нм.

Методика проведения анализа

Инокуляция набора

1. Вскройте набор с соблюдением асептических условий.
2. Снимите герметизирующую фольгу.
3. Внесите в каждую лунку по 50 мкл подготовленного инокулята методом поверхностной инокуляции.
4. В качестве альтернативы каждую лунку можно инокулировать прокалыванием отдельной лунки петлёй с инокулятом.

Инкубация

• Температура инкубации: 35–37 °C.
• Продолжительность инкубации: 24–48 ч.

Интерпретация результатов

Результаты интерпретируют в соответствии с таблицей интерпретации результатов. Реагенты в лунки № 2, 5 и 6 добавляют в конце периода инкубации — через 24–48 ч.

Реакции по лункам

Утилизация малоната: лунка № 1

• Положительная реакция: изменение цвета на синий.
• Отрицательная реакция: светло-зелёный цвет или отсутствие изменения цвета.

Тест Фогеса—Проскауэра: лунка № 2

1. Добавьте 2–3 капли реагента Баритта A (R029).
2. Добавьте 1 каплю реагента Баритта B (R030).
3. Положительная реакция: появление розово-красного окрашивания через 5–10 мин.
4. Отрицательная реакция: отсутствие изменения цвета или медное окрашивание, возникающее вследствие реакции реагентов A и B.

Утилизация цитрата: лунка № 3

• Положительная реакция: изменение цвета на синий.
• Отрицательная реакция: зелёный цвет или отсутствие изменения цвета.

ONPG: лунка № 4

• Положительная реакция: изменение цвета с бесцветного на жёлтый.
• Отрицательная реакция: отсутствие изменения цвета.

Тест на восстановление нитрата: лунка № 5

1. Добавьте 1–2 капли сульфаниловой кислоты (R015).
2. Добавьте 1–2 капли реагента N,N-диметил-1-нафтиламина (R009).
3. Положительная реакция: немедленное появление розово-красного окрашивания после добавления реагентов.
4. Отрицательная реакция: отсутствие изменения цвета.

Тест на каталазу: лунка № 6

1. Снимите петлёй часть роста с поверхности среды.
2. Погрузите петлю в небольшую чистую пробирку с 3 % раствором H₂O₂.
3. Положительная реакция: выделение пузырьков газа с поверхности петли.
4. Отрицательная реакция: отсутствие выделения пузырьков газа.
5. Раствор 3 % H₂O₂ необходимо готовить непосредственно перед использованием.

Утилизация аргинина: лунка № 7

• Положительная реакция: изменение цвета на фиолетовый или тёмно-фиолетовый.
• Отрицательная реакция: отсутствие изменения цвета или появление жёлтого цвета.

Тесты на ферментацию углеводов: лунки № 8–12

• Положительная реакция: изменение цвета на жёлтый.
• Отрицательная реакция: красный цвет или отсутствие изменения цвета.

Таблица интерпретации результатов

Бланк внесения результатов

| № | Тест | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 |