HiMedia KB013-10KT Набор для идентификации Bacillus HiBacillus (10 наборов)

Набор для идентификации HiMedia KB013-10KT Набор для идентификации Bacillus HiBacillus (10 наборов) — диагностическая система производства HiMedia для идентификации видов Bacillus по 12 биохимическим тестам. Набор предназначен для работы с чистыми изолятами из клинических и неклинических образцов, включая валидацию известных лабораторных штаммов, при инкубации 35–37 °C в течение 24–48 ч.

Идентификация товара

Назначение

KB013 представляет собой комбинацию из 12 тестов для идентификации видов Bacillus из клинических и неклинических образцов с использованием чистого изолята. Набор также может применяться для валидации известных лабораторных штаммов.

Состав набора

Вариант KB013-10KT содержит 10 наборов KB013, обеспечивающих выполнение 10 тестов. Набор содержит стерильные среды для идентификации видов Bacillus:

• малонат;
• тест Фогеса—Проскауэра;
• цитрат;
• ONPG;
• восстановление нитрата;
• каталаза;
• утилизация аргинина;
• утилизация пяти углеводов: сахарозы, маннита, глюкозы, арабинозы и трегалозы.

В комплект входят:

1. Стерильные среды для тестов на малонат, Фогеса—Проскауэра, цитрат, ONPG, восстановление нитрата, каталазу, утилизацию аргинина и пяти углеводов: сахарозы, маннита, глюкозы, арабинозы и трегалозы.
2. Техническая инструкция по применению.
3. Сульфаниловая кислота 0,8 % (R015) для теста на нитрат.
4. Раствор α-нафтиламина (R009) для теста на нитрат.
5. Индекс идентификации.
6. Реагент Баритта A (R029) для теста Фогеса—Проскауэра.
7. Реагент Баритта B (R030) для теста Фогеса—Проскауэра.
8. Таблица интерпретации результатов и лист регистрации результатов.

Необходимые материалы, не входящие в комплект

• Стандарт Мак-Фарланда.
• Инокуляционные петли и пипетки.
• Среда обогащения или изоляционная питательная среда.

Принцип идентификации

KB013 представляет собой стандартизированную колориметрическую тест-систему, основанную на утилизации углеводов и других биохимических тестах, специфичных для идентификации видов Bacillus. Тесты основаны на изменении pH и утилизации субстратов.

При инкубации виды Bacillus претерпевают метаболические изменения, которые проявляются изменением окраски среды. Результат интерпретируют визуально или после добавления соответствующего реагента, если это предусмотрено методикой.

Тип образца

Чистый изолят из клинического или неклинического образца.

Сбор и обращение с образцами

При сборе и обращении с образцами следует руководствоваться инструкцией по применению набора.

Подготовка посевного материала

KB013 нельзя использовать непосредственно с клиническими или пищевыми образцами. Микроорганизм, подлежащий идентификации, предварительно выделяют и очищают.

1. Отберите одну изолированную колонию.
2. Засейте колонию в 5 мл бульона мозга и сердца BHI (M210).
3. Инкубируйте при 35–37 °C в течение 6–8 ч до достижения мутности инокулята 0,1 оптической плотности при 620 нм.

Инокуляция набора

1. Вскройте набор с соблюдением асептических условий.
2. Снимите герметизирующую фольгу.
3. Внесите в каждую лунку по 50 мкл подготовленного инокулята методом поверхностного посева.
4. В качестве альтернативы каждую лунку можно инокулировать прокалыванием инокуляционной петлёй, содержащей порцию инокулята.

Инкубация

• Температура инкубации: 35–37 °C.
• Продолжительность инкубации: 24–48 ч.

Интерпретация результатов

Интерпретируйте результаты в соответствии с таблицей интерпретации результатов. Реагенты в лунки № 2, 5 и 6 следует добавлять в конце инкубации, то есть через 24–48 ч.

Ограничения и возможные источники ошибок

1. После извлечения из холодильника доведите реагенты до комнатной температуры.
2. В тесте ферментации углеводов некоторые микроорганизмы могут давать слабую реакцию. В таком случае зарегистрируйте реакцию как ± и продолжите инкубацию до 48 ч. Оранжевую окраску после 48 ч инкубации интерпретируйте как отрицательную реакцию.
3. Иногда микроорганизмы дают противоречивый результат вследствие мутации либо из-за использованной среды для выделения, культивирования и поддержания культуры.
4. Индекс идентификации составлен на основании стандартных справочных данных и результатов тестов, проведённых в лаборатории.
5. При мутности инокулята менее 0,1 оптической плотности могут быть получены ошибочные ложноотрицательные результаты.
6. Более выраженные результаты получают при использовании обогащённой культуры, а не суспензии.
7. Набор нельзя использовать непосредственно с клиническими образцами. Микроорганизмы для идентификации предварительно выделяют на подходящих изоляционных средах. Используют только чистые культуры.

Контроль качества

Внешний вид

Стерильная белая непрозрачная полоска с 12 лунками, содержащими среды для тестов на малонат, Фогеса—Проскауэра, цитрат, ONPG, восстановление нитрата, каталазу, утилизацию аргинина и пяти углеводов: сахарозы, маннита, глюкозы, арабинозы и трегалозы.

Объём среды

Объём среды в каждой лунке: 0,8 мл.

Проверка стерильности

Соответствует критериям выпуска.

Ожидаемые характеристики тестов

Утилизация малоната: лунка № 1

• Положительная реакция: изменение окраски на синюю.
• Отрицательная реакция: светло-зелёная окраска или отсутствие изменения окраски.

Тест Фогеса—Проскауэра: лунка № 2

1. Добавьте 2–3 капли реагента Баритта A (R029).
2. Добавьте 1 каплю реагента Баритта B (R030).
3. Положительная реакция: появление розово-красной окраски через 5–10 мин.
4. Отрицательная реакция: отсутствие изменения окраски или медная окраска, возникающая вследствие реакции реагентов A и B.

Утилизация цитрата: лунка № 3

• Положительная реакция: изменение окраски на синюю.
• Отрицательная реакция: зелёная окраска или отсутствие изменения окраски.

ONPG: лунка № 4

• Положительная реакция: изменение окраски с бесцветной на жёлтую.
• Отрицательная реакция: отсутствие изменения окраски.

Тест на восстановление нитрата: лунка № 5

1. Добавьте 1–2 капли сульфаниловой кислоты (R015).
2. Добавьте 1–2 капли реагента N,N-диметил-1-нафтиламина (R009).
3. Положительная реакция: немедленное появление розово-красной окраски после добавления реагентов.
4. Отрицательная реакция: отсутствие изменения окраски.

Тест на каталазу: лунка № 6

1. Снимите петлёй порцию роста с поверхности среды.
2. Погрузите петлю в небольшую чистую пробирку с 3 % H₂O.
3. Положительная реакция: выделение пузырьков газа с поверхности петли.
4. Отрицательная реакция: выделение пузырьков газа отсутствует.
5. Раствор 3 % H₂O₂ необходимо готовить непосредственно перед использованием.

Утилизация аргинина: лунка № 7

• Положительная реакция: изменение окраски на пурпурную или тёмно-пурпурную.
• Отрицательная реакция: отсутствие изменения окраски или появление жёлтой окраски.

Тест ферментации углеводов: лунки № 8–12

• Положительная реакция: изменение окраски на жёлтую.
• Отрицательная реакция: красная окраска или отсутствие изменения окраски.

Таблица интерпретации результатов