HiMedia KB012A-20KT Набор для идентификации Listeria HiListeria (20 наборов)

Набор для идентификации Listeria HiListeria HiMedia KB012A-20KT (20 наборов) — стандартизированная система из 12 биохимических тестов для идентификации видов Listeria. Набор применяют для анализа чистых изолятов из клинических и неклинических образцов, при этом прямое внесение клинических или пищевых образцов не допускается.

Назначение

KB012A предназначен для идентификации видов Listeria по комбинации тестов на каталазу, восстановление нитратов, гидролиз эскулина, реакцию Фогеса—Проскауэра, реакцию с метиловым красным и утилизацию 7 углеводов:

• ксилоза;
• лактоза;
• глюкоза;
• α-метил-D-маннозид;
• рамноза;
• сахароза;
• маннитол.

Набор также может применяться для подтверждения свойств известных лабораторных штаммов.

Идентификация товара

Принцип идентификации

KB012A представляет собой стандартизированную колориметрическую систему тестирования, основанную на определении подвижности, утилизации углеводов и других биохимических признаков, характерных для идентификации видов Listeria. Тесты основаны на изменении pH и утилизации субстратов.

При инкубации виды Listeria вызывают метаболические изменения, которые проявляются изменением цвета питательной среды. Результат интерпретируют визуально или после добавления соответствующего реагента.

Состав и содержимое набора

Каждый набор содержит 5, 10 или 20 комплектов KB012A, рассчитанных соответственно на проведение 5, 10 или 20 тестов. Комплекты содержат стерильные среды для следующих исследований:

• каталаза;
• восстановление нитратов;
• эскулин;
• реакция Фогеса—Проскауэра;
• метиловый красный;
• утилизация ксилозы;
• утилизация лактозы;
• утилизация глюкозы;
• утилизация α-метил-D-маннозида;
• утилизация рамнозы;
• утилизация сахарозы;
• утилизация маннитола.

В состав входят:

• сульфаниловая кислота 0,8 % (R015) для теста на восстановление нитратов;
• реагент N,N-диметил-1-нафтиламина (R009) для теста на восстановление нитратов;
• реагент Баритта A (R029) для теста Фогеса—Проскауэра;
• реагент Баритта B (R030) для теста Фогеса—Проскауэра;
• реагент «Метиловый красный» (1007) для теста с метиловым красным;
• техническая инструкция по применению;
• карта интерпретации результатов;
• бланк внесения результатов;
• индекс идентификации.

Материалы, необходимые для работы

В комплект не входят:

• стандарт Мак-Фарланда;
• инокуляционные петли;
• пипетки;
• обогатительная среда;
• изоляционная питательная среда.

Тип образца

Для проведения идентификации используют чистый изолят, полученный из клинического или неклинического образца.

KB012A нельзя использовать непосредственно с клиническими или пищевыми образцами. Микроорганизм предварительно выделяют на подходящей изоляционной среде и используют только чистую культуру.

Подготовка посевного материала

1. Выделите исследуемый микроорганизм на агаре PALCAM (M1064) или триптон-соевом агаре (M290).
2. Отберите одну изолированную колонию.
3. Внесите колонию в 5 мл бульона BHI (M210).
4. Инкубируйте при 35–37 °C в течение 6–8 ч.
5. Используйте инокулят с мутностью 1,0 OD при 620 нм.

Внесение инокулята в набор

1. Вскройте набор с соблюдением правил асептики.
2. Снимите герметизирующую фольгу.
3. Внесите в каждую лунку по 50 мкл подготовленного инокулята методом поверхностного посева.
4. В качестве альтернативного метода допускается прокалывание каждой лунки инокуляционной петлёй с захваченным инокулятом.

Инкубация

• Температура инкубации: 35–37 °C.
• Продолжительность инкубации: 24–48 ч.

Интерпретация результатов

Результаты интерпретируют в соответствии с картой интерпретации результатов.

Реагенты в лунки № 1, 2, 4 и 5 добавляют в конце инкубации, то есть через 24–48 ч.

1. Тест на каталазу: лунка № 1

1. Снимите инокуляционной петлёй часть роста с поверхности третьей лунки.
2. Погрузите петлю в небольшую чистую пробирку с 3%-ным раствором H₂O₂.
3. Положительная реакция на каталазу проявляется выделением пузырьков газа с поверхности петли.
4. При отрицательной реакции выделение газа отсутствует.

Раствор H₂O₂ концентрацией 3 % необходимо готовить непосредственно перед использованием.

2. Восстановление нитратов: лунка № 2

1. Добавьте 1–2 капли сульфаниловой кислоты (R015).
2. Добавьте 1–2 капли реагента N,N-диметил-1-нафтиламина (R009).
3. Немедленное появление розово-красной окраски свидетельствует о положительной реакции.
4. Отсутствие изменения окраски свидетельствует об отрицательной реакции.

3. Гидролиз эскулина: лунка № 3

• Положительная реакция проявляется изменением окраски на чёрную.
• Зелёная окраска или отсутствие изменения цвета свидетельствует об отрицательной реакции.

4. Тест Фогеса—Проскауэра: лунка № 4

1. Добавьте 1