HiMedia KB011-5KT Набор для идентификации Salmonella HiSalmonella (5 наборов)

HiMedia·Арт.: 0048221·Арт. произв.: KB011-5KT

HiMedia KB011-5KT Набор для идентификации Salmonella HiSalmonella (5 наборов)

Name: HiMedia KB011-5KT Набор для идентификации Salmonella HiSalmonella (5 наборов)
Brand: HiMedia
SKU: 0048221
Price: 9965 RUB
Availability: PreOrder

Под заказ9 965 руб.

Набор для идентификации Salmonella HiSalmonella KB011 производства HiMedia представляет собой комбинированную колориметрическую систему из 12 биохимических тестов. Применяется для идентификации видов Salmonella в клинических и неклинических образцах, а также для валидации известных лабораторных штаммов.

Описание

Принцип измерения

Идентификация основана на использовании семи традиционных биохимических тестов и пяти тестов на утилизацию углеводов. В основе метода лежит принцип изменения pH среды и использования субстратов. При инкубации Salmonella вызывают метаболические изменения, которые проявляются в изменении цвета среды; результат интерпретируется визуально или после добавления специфических реагентов.

Методика проведения анализа

Подготовка инокулята

Изолируйте определяемый организм на стандартной среде, например, на питательном агаре (M001) или агаре с триптоном и соей (M290).
Перенесите одну изолированную колонию в 5 мл бульона BHI (M210) и инкубируйте при 35–37 °C в течение 4–6 часов до достижения мутности инокулята 0,1 OD при 620 нм или 0,5 по стандарту МакФарланда. При необходимости увеличьте время инкубации до достижения указанной плотности.
Альтернативный метод: создайте гомогенную суспензию из 1–3 хорошо изолированных колоний в 2–3 мл стерильного физиологического раствора до достижения плотности 0,1 OD при 620 нм.

Инокуляция набора

Асептически откройте набор и снимите защитную фольгу.
Внесите в каждую лунку по 50 мкл подготовленного инокулята методом поверхностного нанесения.
Альтернативно возможен метод инокуляции путем прокалывания каждой лунки петлей с инокулятом.

Инкубация

Параметр	Значение
Температура инкубации	35–37 °C
Продолжительность инкубации	18–24 часа

Интерпретация результатов

Результаты интерпретируются согласно таблице интерпретации. Реагенты добавляются строго по окончании периода инкубации (через 18–24 часа).

Оценка по отдельным тестам

Метиловый красный (лунка №1): Добавьте 2–3 капли индикатора метилового красного (1007). Положительный результат: красный цвет. Отрицательный: желтовато-оранжевый цвет.
Тест Фогеса-Проскауэра (лунка №2): Добавьте 2–3 капли реагента Барритта А (R029) и 1 каплю реагента Барритта B (R030). Положительный результат: появление розово-красного цвета через 5–10 минут. Отрицательный: отсутствие изменения цвета или медный цвет.
Уреаза (лунка №3): Положительный результат: изменение цвета на розовый. Отрицательный: цвет не меняется.
Продукция H₂S (лунка №4): Положительный результат: изменение оранжево-желтого цвета на черный. Отрицательный: отсутствие изменений или слабый желтовато-коричневый цвет.
Утилизация цитрата (лунка №5): Положительный результат: изменение цвета на синий. Отрицательный: зеленый цвет или отсутствие изменений.
Утилизация лизина (лунка №6): Положительный результат: изменение цвета на фиолетовый или темно-фиолетовый. Отрицательный: отсутствие изменений или желтый цвет.
Тест ONPG (лунка №7): Положительный результат: изменение бесцветной среды на желтую. Отрицательный: среда остается бесцветной.
Ферментация углеводов (лунки №8–12): Положительный результат: изменение цвета на желтый. Отрицательный: красный цвет или отсутствие изменений.

Технические характеристики

Общие параметры

Назначение: идентификация видов Salmonella
Количество тестов в наборе: 12
Объем среды в каждой лунке: 0,8 мл
Тип образца: чистая культура из клинических и неклинических проб
Внешний вид: стерильная белая непрозрачная полоска с 12 лунками

Таблица интерпретации результатов

№	Тест	Реагенты (после инкубации)	Принцип	Исходный цвет среды	Положительная реакция	Отрицательная реакция
1	Метиловый красный	1–2 капли реагента метилового красного	Определение продукции кислоты	Бесцветный	Красный	Желтовато-оранжевый
2	Фогеса-Проскауэра	1–2 капли реагента Барритта А и 1–2 капли реагента Барритта B	Определение продукции ацетоина	Бесцветный / светло-желтый	Розово-красный	Бесцветный / слабый медный
3	Уреаза	—	Определение активности уреазы	Оранжево-желтый	Розовый	Оранжево-желтый
4	Продукция H₂S	—	Определение продукции H₂S	Оранжево-желтый	Черный	Оранжево-желтый
5	Утилизация цитрата	—	Способность использовать цитрат как единственный источник углерода	Зеленый	Синий	Зеленый
6	Утилизация лизина	—	Определение декарбоксилирования лизина	Оливково-зеленый / светло-фиолетовый	Фиолетовый / темно-фиолетовый	Желтый
7	ONPG	—	Определение $\beta$ -галактозидазной активности	Бесцветный	Желтый	Бесцветный
8	Лактоза	—	Утилизация лактозы	Розово-красный / красный	Желтый	Красный / розовый
9	Арабиноза	—	Утилизация арабинозы	Розово-красный / красный	Желтый	Красный / розовый
10	Мальтоза	—	Утилизация мальтозы	Розово-красный / красный	Желтый	Красный / розовый
11	Сорбитол	—	Утилизация сорбитола	Розово-красный / красный	Желтый	Красный / розовый
12	Дульцитол	—	Утилизация дульцитола	Розово-красный / красный	Желтый	Красный / розовый

Индекс идентификации различных видов Salmonella

Тесты	Штаммы	MR	VP	Уреаза	H₂S	Цитрат	Лизин	ONPG	Лактоза	Арабиноза	Мальтоза	Сорбитол	Дульцитол
Большинство серотипов		+	-	-	+	+	+	-	-	+	+	+	+
Серотип Typhi		+	-	-	+	+	+	-	-	+	+	+	-
Серотип Choleraesuis subsp. choleraesuis		+	-	-	+	-	+	-	-	+	+	+	+
Серотип Paratyphi A		+	-	-	-	-	+	-	-	+	+	+	-
Серотип Gallinarum		+	-	-	+	+	+	-	-	+	+	V	+
Серотип Pullorum		+	-	-	-	-	+	-	-	+	+	+	V
S. serotype Typhimurium		+	-	-	+	+	+	-	-	+	+	+	+
S. choleraesuis subsp. arizonae	Group IIIa	+	+	-	+	+	+	V	+	+	+	+	+
S. choleraesuis subsp. diarizonae	Group IIIb	+	-	-	+	+	+	V	+	+	+	+	+
S. choleraesuis subsp. houtenae	Group IV	+	-	-	+	+	V	V	V	V	V	V	V
S. choleraesuis subsp. indica	Group VI	+	-	-	-	-	V	+	V	+	+	-	V
S. enterica subsp. salamae	Group II	+	-	-	+	+	V	+	+	+	+	+	+
S. enterica subsp. arizonae	Group IIIa	+	+	-	+	+	+	V	+	+	+	+	+
S. enterica subsp. diarizonae	Group IIIb	+	-	-	+	+	+	V	+	+	+	+	+
S. enterica subsp. houtenae	Group IV	+	-	-	+	+	V	V	V	V	V	V	V
S. bongori	Group V	+	-	-	+	+	+	-	+	+	+	+	+
S. enterica subsp. indica	VI Strains	+	-	-	-	-	V	+	V	+	+	-	V

Примечание: + = положительная реакция (>90%), - = отрицательная реакция (>90%), V = вариабельный результат (11–89%).

Ограничения и предостережения

Не предназначен для прямого использования с клиническими образцами; требуется предварительное выделение чистой культуры на соответствующих средах.
Ошибочные ложноотрицательные результаты могут быть получены, если мутность инокулята ниже 0,1 OD.
В некоторых тестах на ферментацию углеводов микроорганизмы могут давать слабую реакцию; в таких случаях следует продлить инкубацию до 48 часов. Оранжевый цвет через 48 часов считается отрицательным результатом.
Реагенты должны быть доведены до комнатной температуры перед использованием.

Комплект поставки

Стерильные среды в лунках для тестов: MR, VP, уреаза, H₂S, цитрат, лизин, ONPG и 5 тестов на углеводы (лактоза, арабиноза, мальтоза, сорбитол, дульцитол).
Реагент метиловый красный для MR-теста (1007).
Реагент Барритта A (R029) для VP-теста.
Реагент Барритта B (R030) для VP-теста.
Техническая вставка.
Таблица интерпретации результатов и лист записи данных.
Индекс идентификации.

Дополнительно требуемые материалы

Стандарт МакФарланда.
Инокуляционные петли, пипетки.
Среды для обогащения и изоляции.

Условия эксплуатации и хранения

Хранение при поступлении: 2–8 °C.
Использовать до истечения срока годности, указанного на этикетке.
Утилизация: после использования наборы и инструменты (пипетки, петли) должны быть продезинфицированы и уничтожены путем сжигания или автоклавирования.