HiMedia KB011-5KT Набор для идентификации Salmonella HiSalmonella (5 наборов)

Набор для идентификации HiMedia KB011-5KT Набор для идентификации Salmonella HiSalmonella (5 наборов) производства HiMedia представляет собой стандартизированную систему из 12 биохимических тестов. Набор предназначен для идентификации видов Salmonella в клинических и неклинических образцах, но применяется только после выделения чистой культуры.

Назначение

KB011 — комбинация из 12 тестов для идентификации видов Salmonella из клинических и неклинических образцов, а также для подтверждения идентичности известных лабораторных штаммов.

Идентификация продукта

Принцип измерения

Каждый набор KB011 представляет собой стандартизированную колориметрическую систему идентификации, включающую семь традиционных биохимических тестов и пять тестов на утилизацию углеводов. Тесты основаны на изменении pH и утилизации субстратов.

При инкубации метаболические изменения, характерные для Salmonella, проявляются изменением цвета питательной среды. Результат оценивают визуально или после добавления соответствующих реагентов.

Состав набора

• Стерильные среды для:
  • теста с метиловым красным (MR);
  • теста Фогеса—Проскауэра (VP);
  • определения продукции уреазы;
  • определения продукции H₂S;
  • утилизации цитрата;
  • утилизации лизина;
  • теста ONPG;
  • пяти тестов на утилизацию углеводов: лактозы, арабинозы, мальтозы, сорбитола и дульцитола.
• Реагент с метиловым красным для теста MR (1007).
• Реагент Барритта A для теста VP (R029).
• Реагент Барритта B для теста VP (R030).
• Техническая инструкция по применению.
• Таблица интерпретации результатов и лист регистрации результатов.
• Индекс идентификации.

Каждый комплект содержит 5, 10 или 20 наборов KB011; материала достаточно для выполнения соответственно 5, 10 или 20 тестов.

Материалы, необходимые для работы

В комплект не входят:

• стандарт Мак-Фарланда;
• инокуляционные петли и пипетки;
• обогатительная среда или среда для выделения культуры.

Тип образца

Чистая изолированная культура, выделенная из клинического или неклинического образца.

Подготовка и обращение с образцами

Сбор и обращение с образцами выполняют в соответствии с приведённой ниже методикой. Набор нельзя использовать непосредственно с клиническими образцами: микроорганизмы предварительно выделяют на подходящей среде для выделения. Для тестирования используют только чистые культуры.

Методика проведения анализа

Подготовка инокулята

1. Выделите исследуемый микроорганизм на стандартной питательной среде, например на питательном агаре (M001) или триптон-соевом агаре (M290).
2. Отберите одну изолированную колонию, внесите её в 5 мл бульона BHI (M210) и инкубируйте при 35–37 °C в течение 4–6 ч, пока мутность инокулята не достигнет оптической плотности 0,1 при 620 нм или значения 0,5 по стандарту Мак-Фарланда. Для некоторых микроорганизмов может потребоваться инкубация более 6 ч. В таком случае инкубируйте культуру до достижения мутности инокулята 0,1 единицы оптической плотности при 620 нм.
3. В качестве альтернативы приготовьте инокулят, отобрав 1–3 хорошо изолированные колонии и приготовив однородную суспензию в 2–3 мл стерильного физиологического раствора. Плотность суспензии должна соответствовать оптической плотности 0,1 при 620 нм.

Внесение инокулята в набор

1. Вскройте набор с соблюдением правил асептики. Снимите герметизирующую фольгу.
2. Внесите в каждую лунку по 50 мкл подготовленного инокулята методом поверхностного посева.
3. В качестве альтернативы каждую лунку можно инокулировать прокалыванием при помощи инокуляционной петли с набранным инокулятом.

Инкубация

Интерпретация результатов

Интерпретируйте результаты в соответствии с критериями, приведёнными в таблице интерпретации результатов. Реагенты, если они требуются, добавляйте после завершения периода инкубации — через 18–24 ч.

Контроль качества

Внешний вид

Стерильная белая непрозрачная полоска с 12 лунками, содержащими среды для:

• теста с метиловым красным;
• теста Фогеса—Проскауэра;
• определения продукции уреазы;
• определения продукции H₂S;
• утилизации цитрата;
• утилизации лизина;
• теста ONPG;
• тестов на утилизацию пяти углеводов: лактозы, арабинозы, мальтозы, сорбитола и дульцитола.

Количество среды

Количество среды в каждой лунке: 0,8 мл.

Проверка стерильности

Соответствует критериям выпуска.

Интерпретация отдельных тестов

Результаты интерпретируют в соответствии с критериями, приведёнными в индексе идентификации. Реагенты в лунки 1 и 2 добавляют после завершения инкубации, то есть через 18–24 ч.

1. Тест с метиловым красным: лунка 1

• Добавьте 2–3 капли индикатора метилового красного (1007).
• Положительная реакция определяется появлением красной окраски.
• Жёлто-оранжевая окраска указывает на отрицательную реакцию.

2. Тест Фогеса—Проскауэра: лунка 2

• Добавьте 2–3 капли реагента Барритта A (R029) и 1 каплю реагента Барритта B (R030).
• Положительная реакция определяется появлением розово-красной окраски через 5–10 мин.
• Отсутствие изменения окраски или медная окраска, обусловленная реакцией реагентов A и B, указывает на отрицательную реакцию.

3. Тест на уреазу: лунка 3

• Положительная реакция определяется изменением окраски на розовую.
• Отсутствие изменения окраски указывает на отрицательную реакцию.

4. Определение продукции H₂S: лунка 4

• Изменение окраски от оранжево-жёлтой до чёрной указывает на положительную реакцию.
• Отсутствие изменения окраски или появление слегка желтовато-коричневой окраски указывает на отрицательную реакцию.

5. Утилизация цитрата: лунка 5

• Положительная реакция определяется изменением окраски на синюю.
• Зелёная окраска или отсутствие изменения окраски указывает на отрицательную реакцию.

6. Утилизация лизина: лунка 6

• Изменение окраски на фиолетовую или тёмно-фиолетовую указывает на положительную реакцию.
• Отсутствие изменения окраски или появление жёлтой окраски указывает на отрицательную реакцию.

7. Тест ONPG: лунка 7

• При положительной реакции среда изменяет окраску с бесцветной на жёлтую.
• При отрицательной реакции среда остаётся бесцветной.

8. Тесты на ферментацию углеводов: лунки 8–12

• Положительная реакция определяется изменением окраски на жёлтую.
• Красная окраска или отсутствие изменения окраски указывает на отрицательную реакцию.

Таблица интерпретации результатов