HiMedia KB011-20KT Набор для идентификации Salmonella HiSalmonella (20 наборов)

Набор для идентификации Salmonella HiMedia KB011-20KT HiSalmonella предназначен для проведения 12 биохимических тестов и тестов утилизации углеводов. Набор применяется для идентификации видов Salmonella из клинических и неклинических образцов, а также для подтверждения известных лабораторных штаммов; для анализа используют только предварительно выделенную чистую культуру.

Идентификация товара

Назначение

KB011 представляет собой комплекс из 12 тестов для идентификации видов Salmonella из клинических и неклинических образцов. Набор также может использоваться для подтверждения известных лабораторных штаммов.

Принцип измерения

Набор KB011 представляет собой стандартизированную колориметрическую систему идентификации, включающую семь традиционных биохимических тестов и пять тестов утилизации углеводов. Тесты основаны на изменении pH и утилизации субстратов. При инкубации Salmonella вызывают метаболические изменения, которые проявляются изменением цвета питательной среды; результат оценивают визуально или после добавления соответствующих реагентов.

Состав набора

Каждый набор содержит 5, 10 или 20 комплектов KB011, рассчитанных соответственно на проведение 5, 10 или 20 тестов. Для исполнения на 20 тестов набор KB011-20KT содержит материалы для следующих исследований:

• тест на метиловый красный (MR);
• тест Фогеса—Проскауэра (VP);
• образование уреазы;
• образование H₂S;
• утилизация цитрата;
• утилизация лизина;
• тест ONPG;
• пять тестов утилизации углеводов: лактозы, арабинозы, мальтозы, сорбитола и дульцитола.

Также в комплект входят:

• реагент метилового красного для MR-теста (1007);
• реагент Барритта A для VP-теста (R029);
• реагент Барритта B для VP-теста (R030);
• техническая инструкция по применению;
• таблица интерпретации результатов и лист регистрации результатов;
• индекс идентификации.

Материал, необходимый для работы

В комплект не входят:

• стандарт Мак-Фарланда;
• инокуляционные петли и пипетки;
• обогатительная или изоляционная питательная среда.

Тип образца

Чистая изолированная культура, полученная из клинического или неклинического образца.

Подготовка и обращение с образцами

Образец не используют непосредственно в наборе. Микроорганизмы необходимо предварительно выделить на подходящей изоляционной среде; для исследования применяют только чистые культуры.

Методика проведения анализа

Подготовка инокулята

1. Выделите исследуемый микроорганизм на стандартной питательной среде, например на питательном агаре (M001) или триптон-соевом агаре (M290).
2. Отберите одну изолированную колонию, внесите её в 5 мл бульона BHI (M210) и инкубируйте при 35–37 °C в течение 4–6 ч до достижения мутности инокулята 0,1 OD при 620 нм или соответствия стандарту Мак-Фарланда 0,5. Для некоторых микроорганизмов может потребоваться инкубация более 6 ч. В этом случае инкубируйте культуру до достижения мутности инокулята 0,1 OD при 620 нм.
3. В качестве альтернативы приготовьте инокулят, отобрав 1–3 хорошо изолированные колонии и приготовив однородную суспензию в 2–3 мл стерильного физиологического раствора. Плотность суспензии должна соответствовать 0,1 OD при 620 нм.

Инокуляция набора

1. Вскройте набор с соблюдением асептических условий. Снимите герметизирующую фольгу.
2. Внесите в каждую лунку по 50 мкл подготовленного инокулята методом поверхностной инокуляции.
3. В качестве альтернативы каждую лунку можно инокулировать прокалыванием инокуляционной петлёй, предварительно набрав петлёй инокулят.

Инкубация

Интерпретация результатов

Интерпретируйте результаты в соответствии с указаниями таблицы интерпретации результатов. Если для теста требуются реагенты, добавляйте их в конце периода инкубации, то есть через 18–24 ч.

Контроль качества

Внешний вид

Стерильная белая непрозрачная полоска с 12 лунками, содержащими среды для:

• MR-теста;
• теста Фогеса—Проскауэра;
• определения образования уреазы;
• определения образования H₂S;
• определения утилизации цитрата;
• определения утилизации лизина;
• теста ONPG;
• пяти тестов утилизации углеводов: лактозы, арабинозы, мальтозы, сорбитола и дульцитола.

Количество среды

Объём среды в каждой лунке: 0,8 мл.

Проверка стерильности

Соответствует критериям выпуска.

Интерпретация реакций по лункам

Результаты интерпретируют в соответствии со стандартами, приведёнными в индексе идентификации. Реагенты в лунки № 1 и № 2 добавляют в конце инкубации, то есть через 18–24 ч.

1. Тест на метиловый красный — лунка № 1

• Добавьте 2–3 капли индикатора метилового красного (1007).
• Положительная реакция: появление красной окраски.
• Желтовато-оранжевая окраска: отрицательная реакция.

2. Тест Фогеса—Проскауэра — лунка № 2

• Добавьте 2–3 капли реагента Барритта A (R029) и 1 каплю реагента Барритта B (R030).
• Положительная реакция: появление розово-красной окраски через 5–10 мин.
• Отрицательная реакция: отсутствие изменения окраски или медная окраска, обусловленная реакцией реагентов A и B.

3. Тест на уреазу — лунка № 3

• Положительная реакция: изменение окраски на розовую.
• Отсутствие изменения окраски: отрицательная реакция.

4. Образование H₂S — лунка № 4

• Положительная реакция: изменение окраски от оранжево-жёлтой до чёрной.
• Отрицательная реакция: отсутствие изменения окраски или слабая желтовато-коричневая окраска.

5. Утилизация цитрата — лунка № 5

• Положительная реакция: изменение окраски на синюю.
• Отрицательная реакция: зелёная окраска или отсутствие изменения окраски.

6. Утилизация лизина — лунка № 6

• Положительная реакция: изменение окраски на фиолетовую или тёмно-фиолетовую.
• Отрицательная реакция: отсутствие изменения окраски или жёлтая окраска.

7. Тест ONPG — лунка № 7

• Положительная реакция: изменение окраски среды с бесцветной на жёлтую.
• Отрицательная реакция: среда остаётся бесцветной.

8. Ферментация углеводов — лунки № 8–12

• Положительная реакция: изменение окраски на жёлтую.
• Отрицательная реакция: красная окраска или отсутствие изменения окраски.

Таблица интерпретации результатов

Индекс идентификации видов Salmonella

KB011: набор для идентификации HiSalmonella™.

| Тесты | Штаммы группы | Метиловый красный | Фогес—Проскауэр | Уреаза | Образование H₂S | Утилизация цитрата | Лизин | ONPG | Лактоза | А