HiMedia KB011-10KT Набор для идентификации Salmonella HiSalmonella (10 наборов)

Набор для идентификации Salmonella HiMedia KB011-10KT Набор для идентификации Salmonella HiSalmonella (10 наборов) — стандартизированная система для 12 биохимических тестов. Применяется для идентификации видов Salmonella из клинических и не связанных с клиникой образцов, а также для подтверждения лабораторных штаммов; непосредственно для первичного анализа клинических образцов не используется.

Назначение

HiMedia KB011-10KT предназначен для идентификации видов Salmonella в чистых изолятах, полученных из клинических и неклинических образцов. Набор также может применяться для валидации известных лабораторных штаммов.

Идентификация продукта

Принцип измерения и идентификации

Каждый набор KB011 представляет собой стандартизированную колориметрическую систему идентификации, включающую семь общепринятых биохимических тестов и пять тестов на утилизацию углеводов. Тесты основаны на изменении pH и утилизации субстратов.

Во время инкубации Salmonella вызывает метаболические изменения, которые проявляются изменением цвета питательной среды. Результаты можно интерпретировать визуально или после добавления соответствующих реагентов.

Состав и содержимое набора

Комплект содержит стерильные среды для следующих тестов:

• реакция с метиловым красным (MR);
• тест Фогеса—Проскауэра (VP);
• образование уреазы;
• образование H₂S;
• утилизация цитрата;
• утилизация лизина;
• тест ONPG;
• утилизация лактозы;
• утилизация арабинозы;
• утилизация мальтозы;
• утилизация сорбитола;
• утилизация дульцитола.

Комплекты выпускаются в вариантах по 5, 10 или 20 наборов KB011; соответствующее количество материала рассчитано на проведение 5, 10 или 20 тестов. Исполнение HiMedia KB011-10KT содержит 10 наборов.

В состав входят:

• реагент метилового красного для MR-теста (1007);
• реагент Баррита A для VP-теста (R029);
• реагент Баррита B для VP-теста (R030);
• техническая инструкция к продукту;
• таблица интерпретации результатов и лист регистрации результатов;
• индекс идентификации.

Необходимые материалы, не входящие в комплект

• стандарт мутности Мак-Фарланда;
• инокуляционные петли;
• пипетки;
• обогатительная среда или среда для выделения культуры.

Тип образца

Чистый изолят из клинического или неклинического образца.

Пробоподготовка и получение инокулята

Подготовка инокулята

1. Выделите идентифицируемый микроорганизм на стандартной среде, например на питательном агаре (M001) или триптон-соевом агаре (M290).
2. Отберите одну изолированную колонию, внесите её в 5 мл бульона BHI (M210) и инкубируйте при 35–37 °C в течение 4–6 ч, пока мутность инокулята не достигнет 0,1 OD при 620 нм или значения 0,5 по стандарту Мак-Фарланда. Для некоторых микроорганизмов может потребоваться инкубация более 6 ч. В этом случае инкубируйте культуру до достижения мутности инокулята 0,1 OD при 620 нм.
3. Альтернативный способ подготовки инокулята: отберите 1–3 хорошо изолированные колонии и приготовьте однородную суспензию в 2–3 мл стерильного физиологического раствора. Плотность суспензии должна составлять 0,1 OD при 620 нм.

Внесение инокулята в набор

1. Вскройте набор с соблюдением правил асептики. Снимите герметизирующую фольгу.
2. Внесите в каждую лунку по 50 мкл подготовленного инокулята методом поверхностного посева.
3. В качестве альтернативы каждую лунку можно инокулировать прокалыванием инокуляционной петлёй, содержащей порцию инокулята.

Инкубация

Интерпретация результатов

Результаты интерпретируют в соответствии с критериями, приведёнными в таблице интерпретации результатов и индексе идентификации.

Добавление реагентов, если оно предусмотрено методикой, выполняют в конце периода инкубации, то есть через 18–24 ч.

Контроль качества

Внешний вид

Стерильная белая непрозрачная полоска с 12 лунками, содержащими среды для MR-теста, теста Фогеса—Проскауэра, определения образования уреазы, образования H₂S, утилизации цитрата, утилизации лизина, теста ONPG и пяти тестов на утилизацию углеводов: лактозы, арабинозы, мальтозы, сорбитола и дульцитола.

Количество среды

Количество среды в каждой лунке: 0,8 мл.

Проверка стерильности

Соответствует критериям выпуска.

Реакции в лунках

1. Тест с метиловым красным: лунка № 1

• Добавьте 2–3 капли индикатора метилового красного (1007).
• Положительная реакция сопровождается появлением красного окрашивания.
• Желтовато-оранжевое окрашивание указывает на отрицательную реакцию.

2. Тест Фогеса—Проскауэра: лунка № 2

• Добавьте 2–3 капли реагента Баррита A (R029) и 1 каплю реагента Баррита B (R030).
• Положительная реакция сопровождается появлением розово-красного окрашивания через 5–10 мин.
• Отсутствие изменения окраски или медное окрашивание, возникающее вследствие реакции реагентов A и B, указывает на отрицательную реакцию.

3. Тест на уреазу: лунка № 3

• Положительная реакция сопровождается изменением окраски на розовую.
• Отсутствие изменения окраски указывает на отрицательную реакцию.

4. Образование H₂S: лунка № 4

• Изменение окраски от оранжево-жёлтой до чёрной указывает на положительную реакцию.
• Отсутствие изменения окраски или слабое желтовато-коричневое окрашивание указывает на отрицательную реакцию.

5. Утилизация цитрата: лунка № 5

• Положительная реакция сопровождается изменением окраски на синюю.
• Зелёное окрашивание или отсутствие изменения окраски указывает на отрицательную реакцию.

6. Утилизация лизина: лунка № 6

• Изменение окраски на фиолетовую или тёмно-фиолетовую указывает на положительную реакцию.
• Отсутствие изменения окраски или появление жёлтой окраски указывает на отрицательную реакцию.

7. Тест ONPG: лунка № 7

• При положительной реакции среда изменяет окраску с бесцветной на жёлтую.
• При отрицательной реакции среда остаётся бесцветной.

8. Тест ферментации углеводов: лунки № 8–12

• Положительная реакция сопровождается изменением окраски на жёлтую.
• Красная окраска или отсутствие изменения окраски указывает на отрицательную реакцию.

Таблица интерпретации результатов