HiMedia KB011-10KT Набор для идентификации Salmonella HiSalmonella (10 наборов)
HiMediaHiMedia·Арт.: 0048219·Арт. произв.: KB011-10KT

HiMedia KB011-10KT Набор для идентификации Salmonella HiSalmonella (10 наборов)

Под заказ16 986 руб.

Набор для идентификации Salmonella HiSalmonella (KB011) производства HiMedia представляет собой комбинированную систему из 12 биохимических тестов для определения видов Salmonella. Применяется для анализа клинических и неклинических образцов, а также для валидации известных лабораторных штаммов.

Описание

Набор для идентификации Salmonella HiSalmonella (KB011) производства HiMedia представляет собой комбинированную систему из 12 биохимических тестов для определения видов Salmonella. Применяется для анализа клинических и неклинических образцов, а также для валидации известных лабораторных штаммов.

Принцип измерения

Система основана на стандартизированном колориметрическом анализе, включающем семь традиционных биохимических тестов и пять тестов на утилизацию углеводов. Принцип работы базируется на изменении pH среды и использовании субстратов: в процессе инкубации Salmonella вызывает метаболические изменения, которые проявляются в изменении цвета среды. Результаты интерпретируются визуально или после добавления специфических реагентов.

Методика проведения анализа

Подготовка инокулята

  1. Изолируйте исследуемый организм на стандартной среде, например, на питательном агаре (M001) или агаре с триптоном и соей (M290).
  2. Перенесите одну изолированную колонию в 5 мл бульона BHI (M210) и инкубируйте при 35–37 °C в течение 4–6 часов до достижения мутности инокулята 0,1 OD при 620 нм или 0,5 по стандарту МакФарланда. При необходимости увеличьте время инкубации до достижения указанной плотности.
  3. Альтернативный метод: приготовьте гомогенную суспензию из 1–3 хорошо изолированных колоний в 2–3 мл стерильного физиологического раствора до достижения плотности 0,1 OD при 620 нм.

Инокуляция набора

  1. Асептически откройте набор, снимите защитную фольгу.
  2. Внесите в каждую лунку по 50 мкл подготовленного инокулята методом поверхностного нанесения.
  3. Альтернативно возможен метод инокуляции путем прокалывания (stabbing) каждой лунки петлей с инокулятом.

Инкубация

Инкубация проводится при следующих параметрах:

ПараметрЗначение
Температура инкубации35–37 °C
Продолжительность инкубации18–24 часа

Интерпретация результатов

Добавление реагентов (для лунок №1 и №2) производится строго по окончании периода инкубации (через 18–24 часа).

Описание тестов по лункам

  1. Метиловый красный (лунка №1): Добавьте 2–3 капли индикатора метилового красного (1007). Положительная реакция — красный цвет; отрицательная — желтовато-оранжевый.
  2. Тест Фогеса-Проскауэра (лунка №2): Добавьте 2–3 капли реагента Барритта А (R029) и 1 каплю реагента Барритта Б (R030). Положительная реакция — появление розово-красного цвета через 5–10 минут; отрицательная — отсутствие изменения цвета или медный цвет.
  3. Уреазный тест (лунка №3): Положительная реакция — изменение цвета на розовый; отрицательная — цвет не меняется.
  4. Продукция H₂S (лунка №4): Положительная реакция — изменение оранжево-желтого цвета на черный; отрицательная — отсутствие изменений или слабый желтовато-коричневый цвет.
  5. Утилизация цитрата (лунка №5): Положительная реакция — изменение цвета на синий; отрицательная — зеленый цвет или отсутствие изменений.
  6. Утилизация лизина (лунка №6): Положительная реакция — изменение цвета на пурпурный / темно-пурпурный; отрицательная — желтый цвет или отсутствие изменений.
  7. Тест ONPG (лунка №7): Положительная реакция — изменение цвета с бесцветного на желтый; отрицательная — среда остается бесцветной.
  8. Ферментация углеводов (лунки №8–12): Положительная реакция — изменение цвета на желтый; отрицательная — красный цвет или отсутствие изменений.

Сводная таблица интерпретации

ТестРеагенты после инкубацииПринципИсходный цвет средыПоложительная реакцияОтрицательная реакция
1Метиловый красный1–2 капли реагента метилового красногоОпределение продукции кислотыБесцветныйКрасныйЖелтовато-оранжевый
2Фогес-Проскауэр1–2 капли реагента Барритта А и 1–2 капли реагента Барритта БОпределение продукции ацетоинаБесцветный / светло-желтыйРозово-красныйБесцветный / слабый медный
3УреазаОпределение активности уреазыОранжево-желтыйРозовыйОранжево-желтый
4Продукция H₂SОпределение продукции H₂SОранжево-желтыйЧерныйОранжево-желтый
5Утилизация цитратаСпособность использовать цитрат как единственный источник углеродаЗеленыйСинийЗеленый
6Утилизация лизинаОпределение декарбоксилирования лизинаОливково-зеленый / светло-пурпурныйПурпурный / темно-пурпурныйЖелтый
7ONPGОпределение β\beta-галактозидазной активностиБесцветныйЖелтыйБесцветный
8ЛактозаУтилизация лактозыРозово-красный / красныйЖелтыйКрасный / розовый
9АрабинозаУтилизация арабинозыРозово-красный / красныйЖелтыйКрасный / розовый
10МальтозаУтилизация мальтозыРозово-красный / красныйЖелтыйКрасный / розовый
11СорбитолУтилизация сорбитолаРозово-красный / красныйЖелтыйКрасный / розовый
12ДульцитолУтилизация дульцитолаРозово-красный / красныйЖелтыйКрасный / розовый

Индекс идентификации видов Salmonella

ТестыШтаммыMethyl RedVoges Proskauer'sUreaseH₂S productionCitrate utilizationLysineONPGLactoseArabinoseMaltoseSorbitolDulcitol
Most serotypes+--+++--++++
Serotype Typhi+--+++--+++-
Serotype Choleraesuis subsp. choleraesuis+--+-+--++++
Serotype Paratyphi A+----+--+++-
Serotype Gallinarum+--+++--++V+
Serotype Pullorum+----+--+++V
S. serotype Typhimurium+--+++--++++
S. choleraesuis subsp. arizonaeGroup IIIa++-+++V+++++
S. choleraesuis subsp. diarizonaeGroup IIIb+--+++V+++++
S. choleraesuis subsp. houtenaeGroup IV+--++VVVVVVV
S. choleraesuis subsp. indicaGroup VI Strains+----V+V++-V
S. enterica subsp. salamaeGroup II+--++V++++++
S. enterica subsp. arizonaeGroup IIIa++-+++V+++++
S. enterica subsp. diarizonaeGroup IIIb+--+++V+++++
S. enterica subsp. houtenaeGroup IV+--++VVVVVVV
S. bongoriGroup V Strains+--+++-+++++
S. enterica subsp. indicaVI Strains+----V+V++-V

Примечание: + = положительная реакция (>90%), - = отрицательная реакция (>90%), V = вариабельная реакция (11–89%).

Технические характеристики

  • Тип системы: стандартизированная колориметрическая идентификационная система.
  • Состав лунок: 12 лунок с питательными средами (MR, VP, уреаза, H₂S, цитрат, лизин, ONPG и 5 углеводов).
  • Объем среды в каждой лунке: 0,8 мл.
  • Внешний вид: стерильная белая непрозрачная полоска с 12 лунками.
  • Требования к образцу: чистая культура (изолят) из клинического или неклинического материала.

Комплект поставки

  • Стерильные среды в лунках для проведения тестов (MR, VP, уреаза, H₂S, цитрат, лизин, ONPG, лактоза, арабиноза, мальтоза, сорбитол, дульцитол).
  • Реагент метиловый красный для MR-теста (1007).
  • Реагент Барритта А (R029) для VP-теста.
  • Реагент Барритта Б (R030) для VP-теста.
  • Технический вкладыш.
  • Таблица интерпретации результатов и лист регистрации данных.
  • Индекс идентификации.

Дополнительное оборудование (не входит в комплект)

  • Стандарт МакФарланда.
  • Инокуляционные петли, пипетки.
  • Среды для обогащения / изоляционные среды.

Ограничения и предостережения

  • Реагенты перед использованием необходимо довести до комнатной температуры.
  • При слабой реакции в тестах на ферментацию углеводов допускается продление инкубации до 48 часов. Оранжевый цвет через 48 часов считается отрицательным результатом.
  • Ошибочные ложноотрицательные результаты могут быть получены, если мутность инокулята ниже 0,1 OD.
  • Набор не предназначен для прямого использования с клиническими образцами; требуется предварительное выделение чистой культуры на соответствующих средах.
  • Из-за мутаций или особенностей используемых сред для изоляции возможны противоречивые результаты.

Условия эксплуатации и хранения

  • Хранение: при получении и в процессе использования хранить при температуре 2–8 °C.
  • Срок годности: указан на этикетке.
  • Утилизация: после использования наборы и инструменты (пипетки, петли) должны быть дезинфицированы подходящим средством, после чего утилизированы путем сжигания или автоклавирования.

Характеристики

Производитель/Серия

ПроизводительHiMedia

Назначение изделия

Назначение изделияСреда

Похожие товары

Запросить коммерческое предложение