HiMedia KB010-5KT Набор для идентификации E. coli HiE. coli (5 наборов)

Набор для идентификации HiMedia KB010-5KT Набор для идентификации E. coli HiE. coli (5 наборов) — стандартизированная колориметрическая система с восемью традиционными биохимическими тестами и четырьмя тестами утилизации углеводов. Набор предназначен для идентификации и дифференциации Escherichia coli из чистой культуры, но не применяется непосредственно для клинических образцов.

Назначение и принцип работы

KB010 — стандартизированная колориметрическая система идентификации, включающая восемь традиционных биохимических тестов и четыре теста утилизации углеводов. Тесты основаны на изменении pH и использовании субстратов.

При инкубации метаболические изменения, характерные для Escherichia coli, проявляются изменением цвета питательной среды. Цветовая реакция может быть видна непосредственно или проявляться после добавления реагента.

Escherichia coli — грамотрицательные коккобациллярные палочки, ферментирующие лактозу; микроорганизмы этого вида часто выделяют из клинических и неклинических образцов.

Идентификация товара

Подготовка инокулята

1. Выделите идентифицируемый микроорганизм на стандартной среде, например на питательном агаре (M001), или на дифференциальной среде, например на агаре МакКонки (M082).
2. Отберите одну изолированную колонию, внесите её в 5 мл мозгово-сердечного бульона BHI (M210) и инкубируйте при 35–37 °C в течение 4–6 ч, пока мутность инокулята не достигнет 0,1 OD при 620 нм или значения 0,5 по стандарту Мак-Фарланда. Для некоторых микроорганизмов может потребоваться инкубация более 6 ч. В этом случае продолжайте инкубацию до достижения мутности инокулята 0,1 OD при 620 нм.
3. В качестве альтернативы подготовьте инокулят, отобрав 1–3 хорошо изолированные колонии и приготовив однородную суспензию в 2–3 мл стерильного физиологического раствора. Плотность суспензии должна соответствовать 0,1 OD при 620 нм.

Внесение инокулята в набор

1. Вскройте набор с соблюдением правил асептики. Снимите герметизирующую фольгу.
2. Внесите в каждую лунку по 50 мкл подготовленного инокулята методом поверхностного посева.
3. В качестве альтернативы набор можно инокулировать прокалыванием каждой отдельной лунки петлёй с инокулятом.

Инкубация

• Температура инкубации: 35–37 °C
• Продолжительность инкубации: 18–24 ч

Интерпретация результатов

Интерпретируйте результаты в соответствии со стандартами, приведёнными в индексе идентификации. Реагенты в лунки № 1, 2, 4 и 6 добавляйте в конце периода инкубации, то есть через 18–24 ч.

Подробная последовательность интерпретации

1. Тест на метиловый красный, лунка № 1

   • Добавьте 2–3 капли индикатора метилового красного (I007).
   • Положительная реакция: появление красного цвета.
   • Желтовато-оранжевый цвет: отрицательная реакция.

2. Тест Фогеса—Проскауэра, лунка № 2

   • Добавьте 2–3 капли реагента Баритта A (R029) и 1 каплю реагента Баритта B (R030).
   • Положительная реакция: появление розово-красного цвета через 5–10 мин.
   • Отсутствие изменения цвета или медный цвет, обусловленный реакцией реагентов A и B: отрицательная реакция.

3. Тест на утилизацию цитрата, лунка № 3

   • Положительная реакция: изменение цвета на синий.
   • Зелёный цвет или отсутствие изменения цвета: отрицательная реакция.

4. Индольный тест, лунка № 4

   • Добавьте 2–3 капли реагента Ковача (R008).
   • Положительная реакция: появление розово-красного кольца.
   • Отсутствие красного кольца: отрицательная реакция.

5. Тест на глюкуронидазу, лунка № 5

   • Положительная реакция: бесцветная среда становится голубовато-зелёной.
   • Сохранение бесцветной среды: отрицательная реакция.

6. Восстановление нитрата, лунка № 6

   • Добавьте 1–2 капли сульфаниловой кислоты (R015) и 1–2 капли реагента N,N-диметил-1-нафтиламина (R009).
   • Положительная реакция: появление розово-красного цвета.
   • Сохранение бесцветной среды: отрицательная реакция.

7. Тест ONPG, лунка № 7

   • Положительная реакция: бесцветная среда становится жёлтой.
   • Сохранение бесцветной среды: отрицательная реакция.

8. Утилизация лизина, лунка № 8

   • Положительная реакция: изменение цвета от оливково-зелёного до светло- или тёмно-фиолетового.
   • Жёлтый цвет среды: отрицательная реакция.

9. Ферментация углеводов, лунки № 9–12

   • Положительная реакция: изменение цвета на жёлтый.
   • Красный цвет или отсутствие изменения цвета: отрицательная реакция.

Состав набора и технические характеристики