HiMedia KB009C-5KT Набор HiCarbo - Часть C (5 наборов)

Набор для биохимической идентификации HiCarbo — Часть C (5 наборов) производства HiMedia. Представляет собой стандартизированную колориметрическую систему для изучения биохимического профиля микроорганизмов и валидации лабораторных штаммов.

Принцип измерения

Система основана на определении способности микроорганизмов утилизировать конкретные углеводы и субстраты. В основе метода лежит изменение pH среды: в процессе метаболизма микроорганизмов происходят изменения, которые фиксируются спонтанным изменением цвета индикатора в среде.

Область применения

Набор используется для идентификации широкого спектра микроорганизмов путем анализа их биохимических свойств. Применяется в микробиологических лабораториях для дифференциации видов и проверки чистоты культур.

Состав набора (Часть C)

Набор KB009C содержит материалы для проведения 10 тестов по следующим параметрам:

• Рамноза
• Целлобиоза
• Мелезитоза
• $\alpha$-метил-D-маннозид
• Ксилитол
• ONPG
• Эскулин
• D-арабиноза
• Цитрат
• Малонат
• Сорбоза
• 1 контрольный образец

В комплект также входят технический вкладыш, таблица интерпретации результатов и лист регистрации данных.

Методика проведения анализа

Подготовка инокулята

Набор нельзя использовать непосредственно для клинических образцов; микроорганизмы должны быть предварительно изолированы и очищены. Допускается использование только чистых культур.

1. Изолируйте исследуемый микроорганизм на стандартной среде, например, на питательном агаре (M001/M1274) или агаре с инфузией мозга и сердца (M211).
2. Перенесите одну изолированную колонию в 5 мл бульона с инфузией мозга и сердца. Инкубируйте при 35–37 °C в течение 4–6 часов до достижения мутности инокулята $\ge 0,5$ OD при 620 нм. Для требовательных организмов время инкубации может быть увеличено до достижения указанного значения OD.
3. Альтернативный метод: создайте гомогенную суспензию 1–3 изолированных колоний в 2–3 мл стерильного физиологического раствора с плотностью 0,5 OD при 620 нм.

Важно: при плотности инокулята ниже 0,5 OD возможны ложноотрицательные результаты. Использование обогащенной культуры вместо суспензии делает результаты более выраженными.

Инокуляция и инкубация

1. Асептически откройте набор, снимите защитную фольгу.
2. Внесите в каждую лунку по 50 мкл подготовленного инокулята методом поверхностного нанесения.
3. Альтернативно возможна инокуляция путем прокалывания каждой лунки петлей с инокулятом.
4. Инкубируйте при температуре $35 \pm 2$ °C в течение 18–24 часов.

Интерпретация результатов

Оценка реакций

• Ферментация углеводов: положительная реакция — изменение цвета среды с красного на жёлтый (продукция кислоты); отрицательная — среда остаётся красной.
• Тест ONPG: положительная реакция — изменение цвета с бесцветного на жёлтый; отрицательная — среда остаётся бесцветной.
• Гидролиз эскулина: положительная реакция — изменение цвета с кремового на чёрный; отрицательная — среда остаётся кремовой.
• Утилизация цитрата: положительная реакция — изменение цвета с желтовато-зелёного на синий; отрицательная — среда остаётся желтовато-зелёной.
• Утилизация малоната: положительная реакция — изменение цвета со светло-зелёного на синий; отрицательная — среда остаётся светло-зелёной.

Таблица интерпретации результатов

Особенности интерпретации

• При слабой реакции в тестах на ферментацию углеводов зафиксируйте результат как «+» и продлите инкубацию до 48 часов. Оранжевый цвет после 48 часов считается отрицательной реакцией.
• Возможны противоречивые результаты вследствие мутаций или особенностей сред, использованных для изоляции и культивирования.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение: при температуре 2–8 °C.
• Срок годности: 12 месяцев.
• Меры предосторожности: клинические образцы и культуры следует рассматривать как потенциально патогенные. Соблюдайте строгие асептические условия при инокуляции.
• Утилизация: после использования наборы и инструменты (пипетки, петли) должны быть продезинфицированы, затем подвергнуты автоклавированию или сжиганию в специальных пакетах для утилизации.