HiMedia KB009C-20KT Набор HiCarbohydrate - Часть C (20 наборов)

Набор питательных сред HiMedia KB009C-20KT Набор HiCarbohydrate - Часть C (20 наборов) — система из 11 биохимических тестов утилизации сахаров и одного контроля. HiMedia KB009C-20KT предназначен для изучения биохимического профиля выделенных чистых культур микроорганизмов и валидации известных лабораторных штаммов; непосредственное исследование клинических образцов не допускается.

Назначение и состав системы

KB009 — комплексная тест-система для изучения биохимического профиля широкого спектра микроорганизмов и валидации известных лабораторных штаммов.

Полная система HiCarbohydrate™ включает 35 тестов утилизации углеводов:

• часть A — 12 тестов утилизации углеводов;
• часть B — 12 тестов утилизации углеводов;
• часть C — 11 тестов утилизации сахаров и 1 контроль.

Полная система KB009 доступна как комплектом, так и отдельными частями A, B1 и C.

Принцип измерения

Каждый набор HiCarbohydrate™ представляет собой стандартизированную колориметрическую систему идентификации, использующую 35 тестов утилизации углеводов. Тесты основаны на изменении pH и утилизации субстрата. В процессе инкубации микроорганизмы претерпевают метаболические изменения, которые проявляются самопроизвольным изменением цвета среды.

Комплект поставки

1. Материалы, достаточные для выполнения 10 тестов в каждом наборе.
2. 10 наборов части A (KB009A): лактоза, ксилоза, мальтоза, фруктоза, декстроза, галактоза, раффиноза, трегалоза, мелибиоза, сахароза, L-арабиноза, манноза.
3. 10 наборов части B1 (KB009B1): инулин, глюконат натрия, глицерин, салицин, дульцит, инозитол, сорбитол, маннитол, адонитол, арабитол, эритритол, α-метил-D-глюкозид.
4. 10 наборов части C (KB009C): рамноза, целлобиоза, мелезитоза, α-метил-D-маннозид, ксилит, ONPG, эскулин, D-арабиноза, цитрат, малонат, сорбоза и 1 контроль.
5. Техническая инструкция по применению.
6. Таблица интерпретации результатов и бланк регистрации результатов.

Инструкция по применению

Подготовка инокулята

1. KB009 нельзя использовать непосредственно для клинических образцов. Микроорганизмы, подлежащие идентификации, сначала выделяют и очищают. Используют только чистые культуры.
2. Выделите исследуемый микроорганизм на обычной среде, например на питательном агаре (M001/M1274) или агаре для инфузии мозга и сердца (M211).
3. Отберите одну изолированную колонию, внесите её в 5 мл бульона для инфузии мозга и сердца и инкубируйте при 35–37 °C в течение 4–6 ч, пока мутность инокулята не достигнет значения ≥0,5 OD при 620 нм. Для некоторых требовательных микроорганизмов может потребоваться инкубация более 6 ч. В таком случае инкубируйте до достижения мутности инокулята 0,5 OD при 620 нм.
4. В качестве альтернативы приготовьте инокулят, отобрав 1–3 хорошо изолированные колонии и приготовив гомогенную суспензию в 2–3 мл стерильного физиологического раствора. Плотность суспензии должна составлять 0,5 OD при 620 нм.

Важные замечания по подготовке инокулята

• При мутности инокулята менее 0,5 OD возможны ошибочные ложноотрицательные результаты.
• Более выраженные результаты получают при использовании обогащённой культуры вместо суспензии.

Внесение инокулята в набор

1. Вскройте набор с соблюдением асептических условий.
2. Снимите герметизирующую фольгу.
3. Внесите в каждую лунку по 50 мкл подготовленного инокулята методом поверхностного посева.
4. В качестве альтернативы набор можно инокулировать прокалыванием каждой отдельной лунки петлёй с инокулятом.

Инкубация

• Температура инкубации: 35 ± 2 °C.
• Продолжительность инкубации: 18–24 ч.

Интерпретация результатов

Результаты интерпретируют в соответствии с таблицей интерпретации результатов.

Тест ферментации углеводов

• При положительном результате цвет среды изменяется с красного на жёлтый вследствие образования кислоты.
• При отрицательном результате среда остаётся красной.

Тест ONPG

• При положительном результате цвет среды изменяется с бесцветного на жёлтый.
• При отрицательном результате среда остаётся бесцветной.

Гидролиз эскулина

• При положительном результате цвет среды изменяется с кремового на чёрный.
• При отрицательном результате среда остаётся кремовой.

Утилизация цитрата

• При положительном результате цвет среды изменяется с желтовато-зелёного на синий.
• При отрицательном результате среда остаётся желтовато-зелёной.

Утилизация малоната

• При положительном результате цвет среды изменяется со светло-зелёного на синий.
• При отрицательном результате среда остаётся светло-зелёной.

Таблица интерпретации результатов

Особенности интерпретации

1. В тесте ферментации углеводов некоторые микроорганизмы могут давать слабую реакцию. В этом случае реакцию регистрируют как положительную (+) и продолжают инкубацию в течение 48 ч. Оранжевый цвет после 48 ч инкубации интерпретируют как отрицательную реакцию.
2. Иногда микроорганизмы дают противоречивые результаты вследствие мутаций или из-за использованной среды для выделения, культивирования и поддержания культуры.

Меры предосторожности

• Клинические образцы и микробные культуры следует рассматривать как потенциально патогенные и обращаться с ними с соблюдением соответствующих требований биологической безопасности.
• Во время инокуляции и работы с наборами необходимо поддерживать асептические условия.

Утилизация использованных материалов

После использования наборы, а также инструменты, применявшиеся для выделения и инокуляции, включая пипетки и петли, необходимо обеззаразить подходящим дезинфицирующим средством, а затем утилизировать сжиганием или автоклавированием в пакете для утилизации.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения: 2–8 °C.
• Срок годности: 12 месяцев.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Назначение изделия: среда
• Тип продукта: стандартизированная колориметрическая система идентификации
• Общее количество тестов в системе KB009: 35 тестов утилизации углеводов
• Состав части C: 11 тестов на сахара и 1 контроль
• Объём инокулята на одну лунку: 50 мкл
• Температура инкубации: 35 ± 2 °C
• Продолжительность инкубации: 18–24 ч
• Условия хранения: 2–8 °C
• Срок годности: 12 месяцев