HiMedia KB009C-10KT Набор HiCarbohydrate - Часть C (10 наборов)

Набор питательных сред HiMedia KB009C-10KT Набор HiCarbohydrate - Часть C (10 наборов) для 11 тестов утилизации сахаров и одного контрольного теста. Набор применяют для изучения биохимического профиля выделенных чистых культур микроорганизмов и валидации известных лабораторных штаммов; непосредственное исследование клинических образцов не допускается.

Назначение

KB009 — комплексная тест-система для изучения биохимического профиля широкого спектра микроорганизмов и валидации известных лабораторных штаммов.

Система HiCarbohydrate™ включает 35 тестов утилизации углеводов:

• часть A — 12 тестов утилизации углеводов;
• часть B1 — 12 тестов утилизации углеводов;
• часть C — 11 тестов утилизации сахаров и 1 контрольный тест.

Набор KB009 доступен как в составе полной тест-системы, так и по отдельным частям A, B1 и C.

Принцип измерения

Каждый набор HiCarbohydrate™ представляет собой стандартизированную колориметрическую систему идентификации, использующую 35 тестов утилизации углеводов. Тесты основаны на изменении pH и утилизации субстрата.

При инкубации микроорганизмы претерпевают метаболические изменения, которые проявляются самопроизвольным изменением цвета питательной среды.

Состав набора

1. Каждый набор содержит материалы, достаточные для выполнения 10 тестов.
2. 10 наборов части A (KB009A): лактоза, ксилоза, мальтоза, фруктоза, декстроза, галактоза, раффиноза, трегалоза, мелибиоза, сахароза, L-арабиноза, манноза.
3. 10 наборов части B1 (KB009B1): инулин, глюконат натрия, глицерин, салицин, дульцитол, инозитол, сорбитол, маннитол, адонитол, арабитол, эритритол, α-метил-D-глюкозид.
4. 10 наборов части C (KB009C): рамноза, целлобиоза, мелецитоза, α-метил-D-маннозид, ксилитол, ONPG, эскулин, D-арабиноза, цитрат, малонат, сорбоза и 1 контрольный тест.
5. Техническая инструкция по применению.
6. Таблица интерпретации результатов и лист регистрации результатов.

Методика проведения анализа

Подготовка посевного материала

KB009 нельзя использовать непосредственно с клиническими образцами. Идентифицируемые микроорганизмы предварительно выделяют и очищают; для анализа используют только чистые культуры.

1. Выделите идентифицируемый микроорганизм на стандартной питательной среде, например на питательном агаре (M001/M1274) или мозгово-сердечном агаре (M211).
2. Отберите одну изолированную колонию, внесите её в 5 мл мозгово-сердечного бульона и инкубируйте при 35–37 °C в течение 4–6 ч, пока мутность инокулята не достигнет значения не менее 0,5 OD при 620 нм.
3. Для некоторых требовательных микроорганизмов может потребоваться инкубация более 6 ч. В таком случае инкубируйте культуру до достижения мутности инокулята 0,5 OD при 620 нм.
4. В качестве альтернативы подготовьте инокулят из 1–3 хорошо изолированных колоний, приготовив однородную суспензию в 2–3 мл стерильного физиологического раствора. Плотность суспензии должна составлять 0,5 OD при 620 нм.

Примечания к подготовке инокулята

• При мутности инокулята менее 0,5 OD могут быть получены ошибочные ложноотрицательные результаты.
• Более выраженные результаты получают при использовании обогащённой культуры, а не суспензии.

Внесение инокулята в набор

1. Вскройте набор с соблюдением асептических условий.
2. Снимите герметизирующую фольгу.
3. Внесите в каждую лунку по 50 мкл подготовленного инокулята методом поверхностного посева.
4. В качестве альтернативы набор можно инокулировать прокалыванием каждой отдельной лунки петлёй с инокулятом.

Инкубация

• Температура инкубации: 35 ± 2 °C.
• Продолжительность инкубации: 18–24 ч.

Интерпретация результатов

Результаты интерпретируют в соответствии с таблицей интерпретации результатов.

Тест ферментации углеводов

• При положительном результате цвет среды изменяется с красного на жёлтый вследствие образования кислоты.
• При отрицательном результате среда остаётся красной.

Тест ONPG

• При положительном результате цвет среды изменяется с бесцветного на жёлтый.
• При отрицательном результате среда остаётся бесцветной.

Гидролиз эскулина

• При положительном результате цвет среды изменяется с кремового на чёрный.
• При отрицательном результате среда остаётся кремовой.

Утилизация цитрата

• При положительном результате цвет среды изменяется с желтовато-зелёного на синий.
• При отрицательном результате среда остаётся желтовато-зелёной.

Утилизация малоната

• При положительном результате цвет среды изменяется со светло-зелёного на синий.
• При отрицательном результате среда остаётся светло-зелёной.

Таблица интерпретации результатов

Особенности интерпретации

1. При тесте ферментации углеводов некоторые микроорганизмы дают слабую реакцию. В этом случае реакцию регистрируют как положительную (+) и продолжают инкубацию в течение 48 ч. Оранжевый цвет через 48 ч инкубации интерпретируют как отрицательную реакцию.
2. Иногда микроорганизмы дают противоречивые результаты вследствие мутации или из-за особенностей среды, использованной для выделения, культивирования и поддержания культуры.

Меры предосторожности

• Клинические образцы и микробные культуры следует рассматривать как потенциально патогенные и обращаться с ними соответственно.
• При инокуляции и работе с наборами необходимо соблюдать асептические условия.

Утилизация использованных материалов

После применения наборы, а также инструменты, использованные для выделения и инокуляции, включая пипетки и петли, необходимо дезинфицировать подходящим дезинфицирующим средством, а затем утилизировать сжиганием или автоклавированием в пакете для утилизации.

Хранение и срок годности

• Условия хранения: 2–8 °C.
• Условия при получении: 2–8 °C.
• Срок годности: 12 месяцев.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Назначение изделия: среда
• Тип изделия: стандартизированная колориметрическая система идентификации
• Количество тестов в полной системе KB009: 35 тестов утилизации углеводов
• Состав части C: 11 тестов утилизации сахаров и 1 контрольный тест
• Количество наборов части C: 10
• Метод выявления: изменение цвета питательной среды вследствие изменения pH и утилизации субстрата
• Температура инкубации: 35 ± 2 °C
• Продолжительность инкубации: 18–24 ч
• Условия хранения: 2–8 °C
• Срок годности: 12 месяцев

Комплект поставки

• 10 наборов части C (KB009C).
• Техническая инструкция по применению.
• Таблица интерпретации результатов.
• Лист регистрации результатов.