HiMedia KB009C-10KT Набор HiCarbohydrate - Часть C (10 наборов)

Набор для биохимической идентификации HiMedia KB009C-10KT HiCarbohydrate (Часть C), состоящий из 10 наборов. Предназначен для изучения биохимического профиля различных микроорганизмов и валидации известных лабораторных штаммов посредством анализа утилизации углеводов.

Принцип измерения

Система основана на колориметрическом методе идентификации. В основе тестов лежит принцип изменения pH среды при утилизации субстрата: в процессе инкубации микроорганизмы подвергаются метаболическим изменениям, что приводит к спонтанному изменению цвета индикатора в среде.

Состав набора

Один набор содержит достаточное количество материалов для проведения 10 тестов. В состав части C (KB009C) входят тесты на следующие субстраты:

• Рамноза
• Целлобиоза
• Мелезитоза
• $\alpha$-метил-D-маннозид
• Ксилитол
• ONPG
• Эскулин
• D-арабиноза
• Цитрат
• Малонат
• Сорбоза
• 1 контрольный тест

В комплект также включены технический вкладыш, таблица интерпретации результатов и лист регистрации данных.

Методика проведения анализа

Подготовка инокулята

Набор KB009 не предназначен для прямого использования с клиническим материалом; предварительно требуется изоляция и очистка культур.

1. Изолируйте микроорганизм на стандартной среде, например, на питательном агаре (M001/M1274) или агаре BHI (Brain Heart Infusion Agar, M211).
2. Перенесите одну изолированную колонию в 5 мл бульона BHI и инкубируйте при 35–37 °C в течение 4–6 часов до достижения мутности $\ge 0,5$ OD при 620 нм. Для требовательных организмов время инкубации может быть увеличено до достижения указанной плотности.
3. Альтернативный метод: создайте гомогенную суспензию из 1–3 изолированных колоний в 2–3 мл стерильного физиологического раствора до плотности 0,5 OD при 620 нм.

Примечание: при плотности инокулята ниже 0,5 OD возможны ложноотрицательные результаты. Использование обогащенной культуры вместо суспензии делает результаты более выраженными.

Инокуляция и инкубация

1. Асептически откройте набор, снимите защитную фольгу.
2. Внесите в каждую лунку по 50 мкл подготовленного инокулята методом поверхностного нанесения или путем введения петлей с инокулятом в каждую лунку.
3. Инкубируйте при температуре $35 \pm 2$ °C в течение 18–24 часов.

Интерпретация результатов

Оценка реакций

Результаты оцениваются согласно таблице интерпретации.

• Ферментация углеводов: положительная реакция — изменение цвета среды с красного на жёлтый (продукция кислоты); отрицательная — среда остаётся красной.
• Тест ONPG: положительная реакция — изменение цвета с бесцветного на жёлтый; отрицательная — среда остаётся бесцветной.
• Гидролиз эскулина: положительная реакция — изменение цвета с кремового на чёрный; отрицательная — среда остаётся кремовой.
• Утилизация цитрата: положительная реакция — изменение цвета с желтовато-зелёного на синий; отрицательная — среда остаётся желтовато-зелёной.
• Утилизация малоната: положительная реакция — изменение цвета со светло-зелёного на синий; отрицательная — среда остаётся светло-зелёной.

Таблица интерпретации результатов

Особенности интерпретации

• При слабой реакции в тестах на ферментацию углеводов результат фиксируется как «+», и инкубация продлевается до 48 часов. Оранжевый цвет после 48 часов считается отрицательным результатом.
• Возможны противоречивые результаты из-за мутаций микроорганизмов или влияния сред, использованных для изоляции и культивирования.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение: при температуре 2–8 °C.
• Срок годности: 12 месяцев.
• Меры предосторожности: все микробиологические культуры должны рассматриваться как потенциально патогенные. Соблюдайте строгие асептические условия при инокуляции.
• Утилизация: после использования наборы и инструменты (пипетки, петли) подлежат дезинфекции с последующим сжиганием или автоклавированием в специальных пакетах для отходов.