HiMedia KB009B1-20KT Набор HiCarbo - Часть B (20 наборов)

Набор для биохимических тестов HiMedia KB009B1-20KT Набор HiCarbo - Часть B (20 наборов) предназначен для выполнения 12 тестов утилизации углеводов. Набор применяется для изучения биохимического профиля микроорганизмов и валидации известных лабораторных штаммов; для анализа используют только предварительно выделенные и очищенные чистые культуры, а не клинические образцы.

Назначение

KB009 — комплексная тест-система для изучения биохимического профиля широкого спектра микроорганизмов и валидации известных лабораторных штаммов.

Набор HiCarbohydrate включает 35 тестов утилизации углеводов:

• часть A — 12 тестов утилизации углеводов;
• часть B — 12 тестов утилизации углеводов;
• часть C — 11 тестов утилизации сахаров и 1 контрольный тест.

Набор KB009 доступен как полный комплект, а также отдельными частями A, B1 и C.

Принцип измерения

Наборы HiCarbohydrate представляют собой стандартизованную колориметрическую систему идентификации, основанную на 35 тестах утилизации углеводов. Тесты используют изменение pH и утилизацию субстрата: в процессе инкубации микроорганизмы претерпевают метаболические изменения, которые проявляются самопроизвольным изменением цвета питательной среды.

Состав набора

Каждый набор содержит материалы для выполнения 10 тестов.

• 10 наборов части A (KB009A): лактоза, ксилоза, мальтоза, фруктоза, декстроза, галактоза, раффиноза, трегалоза, мелибиоза, сахароза, L-арабиноза, манноза.
• 10 наборов части B1 (KB009B1): инулин, глюконат натрия, глицерин, салицин, дульцитол, инозитол, сорбитол, маннитол, адонитол, арабитол, эритритол, α-метил-D-глюкозид.
• 10 наборов части C (KB009C): рамноза, целлобиоза, мелезитоза, α-метил-D-маннозид, ксилитол, ONPG, эскулин, D-арабиноза, цитрат, малонат, сорбоза и 1 контрольный тест.
• Техническая инструкция по применению.
• Таблица интерпретации результатов.
• Лист регистрации результатов.

Методика проведения анализа

Подготовка инокулята

1. KB009 нельзя использовать непосредственно для анализа клинических образцов. Микроорганизмы, подлежащие идентификации, предварительно выделяют и очищают. Используют только чистые культуры.
2. Выделите исследуемый микроорганизм на стандартной среде, например на питательном агаре (M001/M1274) или агаре с мозгово-сердечным настоем (M211).
3. Отберите одну изолированную колонию, внесите её в 5 мл бульона с мозгово-сердечным настоем и инкубируйте при 35–37 °C в течение 4–6 ч, пока мутность инокулята не достигнет значения не менее 0,5 OD при 620 нм. Для некоторых требовательных микроорганизмов может потребоваться инкубация более 6 ч. В таком случае инкубируйте до достижения мутности инокулята 0,5 OD при 620 нм.
4. В качестве альтернативы подготовьте инокулят из 1–3 хорошо изолированных колоний, приготовив однородную суспензию в 2–3 мл стерильного физиологического раствора. Плотность суспензии должна составлять 0,5 OD при 620 нм.

Если мутность инокулята ниже 0,5 OD, возможны ошибочные ложноотрицательные результаты. Более выраженные результаты получают при использовании обогащённой культуры вместо суспензии.

Внесение инокулята

1. Вскройте набор с соблюдением асептических условий.
2. Снимите герметизирующую фольгу.
3. Внесите в каждую лунку по 50 мкл подготовленного инокулята методом поверхностного посева.
4. В качестве альтернативы каждую отдельную лунку можно инокулировать прокалыванием петлёй с инокулятом.

Инкубация

• Температура инкубации: 35 ± 2 °C.
• Продолжительность инкубации: 18–24 ч.

Интерпретация результатов

Интерпретируйте результаты в соответствии с таблицей интерпретации результатов.

Тест ферментации углеводов

• Положительная реакция: цвет среды изменяется с красного на жёлтый вследствие образования кислоты.
• Отрицательная реакция: среда остаётся красной.

Тест ONPG

• Положительная реакция: цвет среды изменяется с бесцветного на жёлтый.
• Отрицательная реакция: среда остаётся бесцветной.

Гидролиз эскулина

• Положительная реакция: цвет среды изменяется с кремового на чёрный.
• Отрицательная реакция: среда остаётся кремовой.

Утилизация цитрата

• Положительная реакция: цвет среды изменяется с желтовато-зелёного на синий.
• Отрицательная реакция: среда остаётся желтовато-зелёной.

Утилизация малоната

• Положительная реакция: цвет среды изменяется со светло-зелёного на синий.
• Отрицательная реакция: среда остаётся светло-зелёной.

Таблица интерпретации результатов

Особенности интерпретации

1. В тесте ферментации углеводов некоторые микроорганизмы могут давать слабую реакцию. В этом случае зарегистрируйте реакцию как положительную (+) и продолжите инкубацию в течение 48 ч. Оранжевый цвет после 48 ч инкубации интерпретируйте как отрицательную реакцию.
2. Иногда микроорганизмы дают противоречивые результаты из-за мутации или вследствие влияния среды, использованной для выделения, культивирования и поддержания культуры.

Меры предосторожности

• Клинические образцы и микробные культуры следует рассматривать как потенциально патогенные и обращаться с ними соответствующим образом.
• При инокуляции и работе с наборами необходимо соблюдать асептические условия.

Утилизация использованных материалов

После использования наборы, а также инструменты, применявшиеся для выделения и инокуляции, включая пипетки и петли, необходимо обеззаразить подходящим дезинфицирующим средством, затем утилизировать сжиганием или автоклавированием в пакете для утилизации.

Хранение и срок годности

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Назначение изделия: среда
• Количество тестов утилизации углеводов в полной системе KB009: 35
• Количество тестов в части B1: 12
• Температура подготовки и инкубации культуры: 35–37 °C
• Мутность инокулята: не менее 0,5 OD при 620 нм
• Объём бульона для подготовки инокулята: 5 мл
• Объём стерильного физиологического раствора для альтернативной подготовки инокулята: 2–3 мл
• Объём инокулята на одну лунку: 50 мкл
• Температура инкубации набора: 35 ± 2 °C
• Продолжительность инкубации набора: 18–24 ч
• Условия хранения: 2–8 °C
• Срок годности: 12 месяцев

Комплект поставки

• 10 наборов части B1 (KB009B1) с тестами на утилизацию инулина, глюконата натрия, глицерина, салицина, дульцитола, инозитола, сорбитола, маннитола, адонитола, арабитола, эритритола и α-метил-D-глюкозида.
• Техническая инструкция по применению.
• Таблица интерпретации результатов.
• Лист регистрации результатов.