HiMedia KB009B1-20KT Набор HiCarbo - Часть B (20 наборов)

Набор для биохимического анализа HiCarbo - Часть B (20 наборов) HiMedia KB009B1-20KT представляет собой стандартизированную колориметрическую систему для изучения профиля утилизации углеводов. Применяется для идентификации широкого спектра микроорганизмов и валидации известных лабораторных штаммов; включает 12 тестов на утилизацию специфических субстратов.

Принцип измерения

Система основана на принципе изменения pH среды при утилизации субстрата. В процессе инкубации микроорганизмы подвергаются метаболическим изменениям, которые проявляются в виде спонтанного изменения цвета индикатора в среде.

Область применения

Набор используется для определения биохимического профиля микроорганизмов. Часть B1 (KB009B1) содержит тесты на следующие субстраты:

• Инулин
• Глюконат натрия
• Глицерин
• Салицин
• Дульцит
• Инозитол
• Сорбитол
• Маннит
• Адонит
• Арабитол
• Эритритол
• $\alpha$-метил-D-глюкозид

Методика проведения анализа

Подготовка инокулята

Набор KB009 не предназначен для прямого использования с клиническими образцами. Требуется предварительное выделение и очистка культур.

1. Выделите исследуемый микроорганизм на стандартной среде, например, питательном агаре (M001/M1274) или агаре с инфузией мозга и сердца (M211).
2. Подготовьте инокулят одним из двух способов:
   • Внесите одну изолированную колонию в 5 мл бульона с инфузией мозга и сердца; инкубируйте при 35–37 °C в течение 4–6 часов до достижения мутности $\ge$ 0,5 OD при 620 нм. Для требовательных организмов время инкубации может быть увеличено до достижения указанной плотности.
   • Подготовьте гомогенную суспензию из 1–3 хорошо изолированных колоний в 2–3 мл стерильного физиологического раствора до плотности 0,5 OD при 620 нм. Примечание: при плотности инокулята ниже 0,5 OD возможны ложноотрицательные результаты. Использование обогащенной культуры вместо суспензии делает результаты более выраженными.

Инокуляция набора

1. Асептически откройте набор и снимите защитную фольгу.
2. Внесите в каждую лунку по 50 мкл подготовленного инокулята методом поверхностного нанесения.
3. Альтернативно возможен метод инокуляции путем прокалывания каждой лунки петлей с инокулятом.

Инкубация

• Температура: 35 $\pm$ 2 °C.
• Продолжительность: 18–24 часа.

Интерпретация результатов

Оценка реакций

Результаты интерпретируются согласно таблице интерпретации.

• Ферментация углеводов: положительная реакция — изменение цвета среды с красного на жёлтый (за счёт образования кислоты); отрицательная — среда остаётся красной.
• Тест ONPG: положительная реакция — изменение цвета с бесцветного на жёлтый; отрицательная — среда остаётся бесцветной.
• Гидролиз эскулина: положительная реакция — изменение цвета с кремового на чёрный; отрицательная — среда остаётся кремовой.
• Утилизация цитрата: положительная реакция — изменение цвета с жёлто-зелёного на синий; отрицательная — среда остаётся жёлто-зелёной.
• Утилизация малоната: положительная реакция — изменение цвета со светло-зелёного на синий; отрицательная — среда остаётся светло-зелёной.

Таблица интерпретации результатов

Важные примечания по интерпретации

• При слабой реакции в тестах на ферментацию углеводов результат записывается как «+», и инкубация продлевается до 48 часов. Оранжевый цвет после 48 часов инкубации следует интерпретировать как отрицательную реакцию.
• Возможны противоречивые результаты вследствие мутаций микроорганизмов или влияния сред, использованных для изоляции и культивирования.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения: 2–8 °C.
• Срок годности: 12 месяцев.

Меры предосторожности и утилизация

• Клинические образцы и микробные культуры должны рассматриваться как потенциально патогенные.
• При инокуляции и работе с наборами необходимо строго соблюдать асептические условия.
• После использования наборы и инструменты (пипетки, петли и т. п.) подлежат дезинфекции с последующим уничтожением путём сжигания или автоклавирования в специальных пакетах для утилизации.