HiMedia KB009B1-10KT Набор HiCarbo - Часть B (10 наборов)

Набор для биохимического анализа HiCarbo — Часть B (KB009B1-10KT) производства HiMedia. Представляет собой систему из 12 тестов на утилизацию углеводов для изучения биохимического профиля микроорганизмов и валидации лабораторных штаммов.

Принцип измерения

Система HiCarbohydrate™ основана на колориметрическом методе идентификации. Принцип работы базируется на изменении pH среды вследствие утилизации субстрата: в процессе инкубации микроорганизмы вызывают метаболические изменения, которые проявляются в виде спонтанного изменения цвета индикатора в среде.

Состав набора

Набор KB009B1 (Часть B1) рассчитан на проведение 10 тестов для каждого из следующих 12 углеводов:

• Инулин
• Глюконат натрия
• Глицерин
• Салицин
• Дульцит
• Инозитол
• Сорбитол
• Маннитол
• Адонит
• Арабитол
• Эритритол
• $\alpha$-метил-D-глюкозид

В комплект также входят технический вкладыш, таблица интерпретации результатов и лист регистрации данных.

Методика проведения анализа

Подготовка инокулята

Набор не предназначен для прямого использования с клиническими образцами; требуются предварительно изолированные и очищенные чистые культуры.

1. Изолируйте микроорганизм на стандартной среде, например, на питательном агаре (M001/M1274) или агаре Brain Heart Infusion (M211).
2. Подготовьте суспензию одним из двух способов:
   • Внесите одну изолированную колонию в 5 мл бульона Brain Heart Infusion и инкубируйте при 35–37 °C в течение 4–6 часов до достижения мутности $\ge$ 0,5 OD при 620 нм (для требовательных организмов время инкубации может быть увеличено до достижения указанной плотности).
   • Создайте гомогенную суспензию из 1–3 изолированных колоний в 2–3 мл стерильного физиологического раствора до плотности 0,5 OD при 620 нм.

Примечание: при плотности инокулята ниже 0,5 OD возможны ложноотрицательные результаты. Использование обогащенной культуры вместо суспензии делает результаты более выраженными.

Инокуляция и инкубация

1. В асептических условиях откройте набор и снимите защитную фольгу.
2. Внесите по 50 мкл подготовленного инокулята в каждую лунку методом поверхностного нанесения. Альтернативно возможен метод инокуляции путем прокалывания каждой лунки петлей с инокулятом.
3. Инкубируйте при температуре 35 $\pm$ 2 °C в течение 18–24 часов.

Интерпретация результатов

Оценка реакций

Результаты оцениваются по изменению цвета среды согласно таблице:

Особенности интерпретации

• При слабой реакции в тестах на ферментацию углеводов зафиксируйте результат как «+» и продлите инкубацию до 48 часов. Оранжевый цвет после 48 часов считается отрицательной реакцией.
• Противоречивые результаты могут быть следствием мутаций микроорганизма или влияния сред, использованных для изоляции и культивирования.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение: при температуре 2–8 °C.
• Срок годности: 12 месяцев.
• Меры предосторожности: клинические образцы и культуры следует рассматривать как потенциально патогенные. Соблюдайте строгие асептические условия.
• Утилизация: после использования наборы и инструменты (пипетки, петли) подлежат дезинфекции с последующим сжиганием или автоклавированием в специальных пакетах.