HiMedia KB009B1-10KT Набор HiCarbo - Часть B (10 наборов)

Набор для биохимической идентификации HiMedia KB009B1-10KT Набор HiCarbo - Часть B (10 наборов) содержит 12 тестов на утилизацию углеводов. Набор предназначен для изучения биохимического профиля микроорганизмов и валидации известных лабораторных штаммов; непосредственное исследование клинических образцов не допускается, используются только выделенные чистые культуры.

Назначение

KB009 — комплексная тест-система для изучения биохимического профиля широкого спектра микроорганизмов и валидации известных лабораторных штаммов.

Полная система включает 35 тестов на утилизацию углеводов:

• часть A — 12 тестов на утилизацию углеводов;
• часть B — 12 тестов на утилизацию углеводов;
• часть C — 11 тестов на утилизацию сахаров и 1 контрольный тест.

HiCarbohydrate представляет собой стандартизированную колориметрическую систему идентификации. Тесты основаны на изменении pH и утилизации субстрата: при инкубации микроорганизмы претерпевают метаболические изменения, которые проявляются спонтанным изменением цвета питательной среды.

KB009 доступен как полный набор, а также отдельными частями A, B1 и C.

Состав набора

Каждый набор содержит материалы, достаточные для выполнения 10 тестов.

Для полного комплекта KB009 предусмотрены:

• 10 наборов части A (KB009A): лактоза, ксилоза, мальтоза, фруктоза, декстроза, галактоза, раффиноза, трегалоза, мелибиоза, сахароза, L-арабиноза, манноза.
• 10 наборов части B1 (KB009B1): инулин, глюконат натрия, глицерин, салицин, дульцитол, инозитол, сорбитол, маннитол, адонитол, арабитол, эритритол, α-метил-D-глюкозид.
• 10 наборов части C (KB009C): рамноза, целлобиоза, мелецитоза, α-метил-D-маннозид, ксилитол, ONPG, эскулин, D-арабиноза, цитрат, малонат, сорбоза и 1 контрольный тест.
• Техническая инструкция по применению.
• Таблица интерпретации результатов.
• Лист регистрации результатов.

Подготовка инокулята

KB009 нельзя использовать непосредственно с клиническими образцами. Предварительно выделяют и очищают идентифицируемые микроорганизмы; применяют только чистые культуры.

1. Выделите идентифицируемый микроорганизм на стандартной питательной среде, например на питательном агаре (M001/M1274) или агаре с мозгово-сердечной вытяжкой (M211).
2. Отберите одну изолированную колонию, внесите её в 5 мл бульона с мозгово-сердечной вытяжкой и инкубируйте при 35–37 °C в течение 4–6 ч, пока мутность инокулята не достигнет не менее 0,5 единицы оптической плотности при 620 нм.
3. Для некоторых требовательных микроорганизмов может потребоваться инкубация более 6 ч. В таком случае инкубируйте до достижения мутности инокулята 0,5 единицы оптической плотности при 620 нм.

Альтернативный способ подготовки инокулята:

1. Отберите 1–3 хорошо изолированные колонии.
2. Приготовьте однородную суспензию в 2–3 мл стерильного физиологического раствора.
3. Плотность суспензии должна соответствовать 0,5 единицы оптической плотности при 620 нм.

Важные замечания по подготовке инокулята

• При мутности инокулята менее 0,5 единицы оптической плотности могут быть получены ошибочные ложноотрицательные результаты.
• Более выраженные результаты получают при использовании обогащённой культуры, а не суспензии.

Инокуляция набора

1. Вскройте набор с соблюдением асептических условий.
2. Снимите герметизирующую фольгу.
3. Внесите в каждую лунку по 50 мкл подготовленного инокулята методом поверхностной инокуляции.

Альтернативно каждую отдельную лунку можно инокулировать прокалыванием петлёй, содержащей одну петлю инокулята.

Инкубация

• Температура инкубации: 35 ± 2 °C.
• Продолжительность инкубации: 18–24 ч.

Интерпретация результатов

Результаты интерпретируют в соответствии с таблицей интерпретации результатов.

Тест на ферментацию углеводов

• При положительном результате цвет среды изменяется с красного на жёлтый вследствие образования кислоты.
• При отрицательном результате среда остаётся красной.

Тест ONPG

• При положительном результате цвет среды изменяется с бесцветного на жёлтый.
• При отрицательном результате среда остаётся бесцветной.

Гидролиз эскулина

• При положительном результате цвет среды изменяется с кремового на чёрный.
• При отрицательном результате среда остаётся кремовой.

Утилизация цитрата

• При положительном результате цвет среды изменяется с желтовато-зелёного на синий.
• При отрицательном результате среда остаётся желтовато-зелёной.

Утилизация малоната

• При положительном результате цвет среды изменяется со светло-зелёного на синий.
• При отрицательном результате среда остаётся светло-зелёной.

Таблица интерпретации результатов

Особенности интерпретации

1. В тесте на ферментацию углеводов некоторые микроорганизмы могут давать слабую реакцию. В этом случае реакцию регистрируют как положительную (+) и продолжают инкубацию в течение 48 ч. Оранжевый цвет после 48 ч инкубации интерпретируют как отрицательную реакцию.
2. Иногда микроорганизмы дают противоречивые результаты вследствие мутации или из-за особенностей среды, использованной для выделения, культивирования и поддержания культуры.

Меры предосторожности

• Клинические образцы и микробные культуры следует рассматривать как потенциально патогенные и обращаться с ними с соблюдением соответствующих требований биобезопасности.
• При инокуляции и работе с наборами необходимо поддерживать асептические условия.

Утилизация использованных материалов

После использования наборы и инструменты, применявшиеся для выделения и инокуляции, включая пипетки и петли, необходимо обеззаразить подходящим дезинфицирующим средством, а затем утилизировать сжиганием или автоклавированием в пакете для утилизации.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Назначение изделия: питательная среда
• Количество тестов в одном наборе: 10
• Количество тестов на утилизацию углеводов в части B: 12
• Температура инкубации: 35 ± 2 °C
• Продолжительность инкубации: 18–24 ч
• Объём инокулята на одну лунку: 50 мкл
• Требования к культуре: чистая предварительно выделенная и очищенная культура
• Требуемая плотность инокулята: 0,5 единицы оптической плотности при 620 нм
• Условия хранения: 2–8 °C
• Срок годности: 12 месяцев

Условия хранения