HiMedia KB009A-5KT Набор HiCarbo - Часть A (5 наборов)

Набор питательной среды HiMedia KB009A-5KT Набор HiCarbo - Часть A (5 наборов) производства HiMedia предназначен для выполнения 12 тестов утилизации углеводов. Набор применяется для изучения биохимического профиля микроорганизмов, при этом анализ проводят только с предварительно выделенными и очищенными чистыми культурами.

Назначение

HiMedia KB009A-5KT входит в стандартизированную цветометрическую систему идентификации HiCarbohydrate™ для исследования утилизации углеводов микроорганизмами и валидации известных лабораторных штаммов.

Полная система KB009 включает 35 тестов утилизации углеводов:

• часть A — 12 тестов;
• часть B1 — 12 тестов;
• часть C — 11 тестов на сахара и 1 контроль.

Система KB009 выпускается как полный набор, а также по отдельным частям: Part A, Part B1 и Part C.

Принцип измерения

Тесты основаны на изменении pH и утилизации субстрата. Во время инкубации микроорганизмы подвергают питательные среды метаболическим изменениям, которые проявляются самопроизвольным изменением окраски среды.

Состав части A

Часть A содержит тесты утилизации следующих углеводов:

• лактоза;
• ксилоза;
• мальтоза;
• фруктоза;
• декстроза;
• галактоза;
• раффиноза;
• трегалоза;
• мелибиоза;
• сахароза;
• L-арабиноза;
• манноза.

Подготовка посевного материала

1. Набор KB009 нельзя использовать непосредственно с клиническими образцами. Микроорганизмы, подлежащие идентификации, предварительно выделяют и очищают. Используют только чистые культуры.
2. Выделите исследуемый микроорганизм на обычной питательной среде, например на питательном агаре M001/M1274 или агаре на основе мозгово-сердечной вытяжки M211.
3. Отберите одну изолированную колонию, внесите её в 5 мл бульона на основе мозгово-сердечной вытяжки и инкубируйте при 35–37 °C в течение 4–6 ч, пока мутность посевного материала не достигнет значения ≥0,5 OD при 620 нм. Для некоторых требовательных микроорганизмов может потребоваться инкубация более 6 ч. В этом случае инкубируйте посевной материал до достижения мутности 0,5 OD при 620 нм.
4. В качестве альтернативы отберите 1–3 хорошо изолированные колонии и приготовьте однородную суспензию в 2–3 мл стерильного физиологического раствора. Плотность суспензии должна составлять 0,5 OD при 620 нм.

При мутности посевного материала менее 0,5 OD возможно получение ошибочных ложноотрицательных результатов. Более выраженные результаты получают при использовании обогащённой культуры, а не суспензии.

Внесение посевного материала

1. Вскройте набор с соблюдением правил асептики.
2. Снимите герметизирующую фольгу.
3. Внесите в каждую лунку по 50 мкл подготовленного посевного материала методом поверхностного посева.
4. В качестве альтернативы каждую отдельную лунку можно инокулировать прокалыванием петлёй с одной петлёй посевного материала.

Инкубация

• Температура инкубации: 35 ± 2 °C.
• Продолжительность инкубации: 18–24 ч.

Интерпретация результатов

Результаты интерпретируют по таблице интерпретации результатов.

Тест ферментации углеводов

• Положительная реакция: цвет среды изменяется с красного на жёлтый вследствие образования кислоты.
• Отрицательная реакция: среда остаётся красной.

При слабой реакции некоторых микроорганизмов результат регистрируют как «+» и продолжают инкубацию в течение 48 ч. Оранжевую окраску после 48 ч инкубации интерпретируют как отрицательную реакцию.

Тест ONPG

• Положительная реакция: цвет среды изменяется с бесцветного на жёлтый.
• Отрицательная реакция: среда остаётся бесцветной.

Гидролиз эскулина

• Положительная реакция: цвет среды изменяется с кремового на чёрный.
• Отрицательная реакция: среда остаётся кремовой.

Утилизация цитрата

• Положительная реакция: цвет среды изменяется с желтовато-зелёного на синий.
• Отрицательная реакция: среда остаётся желтовато-зелёной.

Утилизация малоната

• Положительная реакция: цвет среды изменяется со светло-зелёного на синий.
• Отрицательная реакция: среда остаётся светло-зелёной.

Таблица интерпретации результатов

При возникновении противоречивых результатов причиной могут быть мутация микроорганизма или особенности среды, использованной для выделения, культивирования и поддержания культуры.

Комплект и состав полной системы KB009

Ниже приведён состав полной системы KB009, указанный производителем; он не заменяет идентификацию комплекта KB009A-5KT как части A в количестве 5 наборов.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения: 2–8 °C.
• Температура при получении: 2–8 °C.
• Срок годности: 12 месяцев.

Меры предосторожности

• Клинические образцы и микробные культуры следует рассматривать как потенциально патогенные и обращаться с ними соответствующим образом.
• При инокуляции и работе с наборами необходимо соблюдать условия асептики.

Утилизация использованных материалов

После использования наборы, а также инструменты, применявшиеся для выделения и инокуляции микроорганизмов, включая пипетки и инокуляционные петли, необходимо обеззаразить подходящим дезинфицирующим средством, затем утилизировать сжиганием или автоклавированием в пакете для утилизации.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Назначение изделия: среда
• Тип изделия: набор питательной среды для биохимической идентификации микроорганизмов
• Модель: KB009A-5KT
• Часть системы: Part A
• Количество наборов: 5
• Количество тестов в одном наборе: 10
• Количество тестов в части A: 12
• Метод: стандартизированная цветометрическая идентификация по утилизации углеводов и изменению pH
• Требования к образцу: предварительно выделенная и очищенная чистая культура; прямое использование клинических образцов не допускается
• Температура инкубации: 35 ± 2 °C
• Продолжительность инкубации: 18–24 ч
• Объём посевного материала на лунку: 50 мкл
• Плотность суспензии: 0,5 OD при 620 нм
• Температура хранения: 2–8 °C
• Срок годности: 12 месяцев