HiMedia KB009A-20KT Набор HiCarbohydrate - Часть A (20 наборов)

Набор для биохимической идентификации HiMedia KB009A-20KT Набор HiCarbohydrate — Часть A (20 наборов) содержит 20 наборов для определения утилизации углеводов. Набор применяется для изучения биохимического профиля микроорганизмов и валидации известных лабораторных штаммов, но не предназначен для прямого анализа клинических образцов.

Назначение и состав системы

KB009 — стандартизованная тест-система для изучения биохимического профиля широкого спектра микроорганизмов и валидации известных лабораторных штаммов.

Полная система HiCarbohydrate включает 35 тестов на утилизацию углеводов:

• часть A (KB009A): 12 тестов на утилизацию углеводов;
• часть B1 (KB009B1): 12 тестов на утилизацию углеводов;
• часть C (KB009C): 11 тестов на утилизацию сахаров и 1 контрольный тест.

KB009 выпускается как полный набор, а также отдельными частями: Part A, Part B1 и Part C.

Принцип измерения

Каждый набор HiCarbohydrate™ представляет собой стандартизованную колориметрическую систему идентификации, основанную на 35 тестах утилизации углеводов. Метод основан на регистрации изменения pH и утилизации субстрата. Во время инкубации микроорганизмы подвергаются метаболическим изменениям, которые проявляются самопроизвольным изменением цвета питательной среды.

Состав набора

Ниже приведён состав полного набора KB009, указанный изготовителем:

Подготовка посевного материала

1. KB009 нельзя использовать непосредственно для анализа клинических образцов. Идентифицируемые микроорганизмы необходимо предварительно выделить и очистить; следует использовать только чистые культуры.
2. Выделите идентифицируемый микроорганизм на стандартной питательной среде, например на питательном агаре M001/M1274 или агаре для инфузии мозга и сердца M211.
3. Отберите одну изолированную колонию, внесите её в 5 мл жидкой среды для инфузии мозга и сердца и инкубируйте при 35–37 °C в течение 4–6 ч, пока мутность посевного материала не достигнет значения ≥ 0,5 OD при 620 нм. Для некоторых требовательных микроорганизмов может потребоваться инкубация более 6 ч. В таком случае инкубируйте культуру до достижения мутности 0,5 OD при 620 нм.
4. В качестве альтернативы подготовьте посевной материал из 1–3 хорошо изолированных колоний, приготовив однородную суспензию в 2–3 мл стерильного физиологического раствора. Плотность суспензии должна составлять 0,5 OD при 620 нм.

Если мутность посевного материала ниже 0,5 OD, возможны ошибочные ложноотрицательные результаты. Более выраженные результаты получают при использовании обогащённой культуры вместо суспензии.

Внесение посевного материала

• Вскройте набор с соблюдением асептических условий.
• Снимите герметизирующую фольгу.
• Внесите в каждую лунку по 50 мкл подготовленного посевного материала методом поверхностного посева.
• В качестве альтернативы каждую отдельную лунку можно инокулировать прокалыванием петлёй с посевным материалом.

Инкубация

Температура инкубации: 35 ± 2 °C.

Продолжительность инкубации: 18–24 ч.

Интерпретация результатов

Результаты интерпретируют по таблице интерпретации результатов.

Тест на ферментацию углеводов

• При положительном результате цвет среды изменяется с красного на жёлтый вследствие образования кислоты.
• При отрицательном результате среда остаётся красной.

Тест ONPG

• При положительном результате среда изменяет цвет с бесцветного на жёлтый.
• При отрицательном результате среда остаётся бесцветной.

Гидролиз эскулина

• При положительном результате цвет среды изменяется с кремового на чёрный.
• При отрицательном результате среда остаётся кремовой.

Утилизация цитрата

• При положительном результате цвет среды изменяется с желтовато-зелёного на синий.
• При отрицательном результате среда остаётся желтовато-зелёной.

Утилизация малоната

• При положительном результате цвет среды изменяется со светло-зелёного на синий.
• При отрицательном результате среда остаётся светло-зелёной.

Таблица интерпретации результатов

Особенности интерпретации

1. При тесте на ферментацию углеводов некоторые микроорганизмы могут давать слабую реакцию. В этом случае реакцию регистрируют как положительную (+) и продолжают инкубацию в течение 48 ч. Оранжевый цвет после 48 ч инкубации интерпретируют как отрицательную реакцию.
2. Иногда микроорганизмы дают противоречивые результаты вследствие мутации или из-за использованной среды для выделения, культивирования и поддержания культуры.

Меры предосторожности

• Клинические образцы и микробные культуры следует рассматривать как потенциально патогенные и обращаться с ними соответственно.
• При инокуляции и работе с наборами необходимо соблюдать асептические условия.

Утилизация использованных материалов

После использования наборы, а также инструменты, применявшиеся для выделения и инокуляции культуры, включая пипетки и петли, необходимо обеззаразить подходящим дезинфицирующим средством, затем утилизировать сжиганием или автоклавированием в пакете для утилизации.

Условия хранения и срок годности

Температура хранения: 2–8 °C.

Срок годности: 12 месяцев.

При получении: хранить при 2–8 °C.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Назначение изделия: питательная среда / набор для биохимической идентификации микроорганизмов
• Количество тестов в одном наборе: 10
• Количество тестов полной системы KB009: 35 тестов на утилизацию углеводов
• Состав полной системы: Part A — 12 тестов, Part B1 — 12 тестов, Part C — 11 тестов и 1 контрольный тест
• Температура инкубации: 35 ± 2 °C
• Продолжительность инкубации: 18–24 ч
• Требуемая мутность посевного материала: 0,5 OD при 620 нм
• Объём посевного материала на одну лунку: 50 мкл
• Объём среды для подготовки культуры: 5 мл
• Объём стерильного физиологического раствора для альтернативной подготовки суспензии: 2–3 мл
• Температура предварительной инкубации культуры: 35–37 °C
• Продолжительность предварительной инкубации: 4–6 ч; для некоторых требовательных микроорганизмов — более 6 ч, до достижения 0,5 OD при 620 нм
• Температура