HiMedia KB009A-10KT Набор HiCarbohydrate - Часть A (10 наборов)

Набор для биохимической идентификации HiMedia KB009A-10KT Набор HiCarbohydrate - Часть A (10 наборов) включает 12 тестов утилизации углеводов. HiMedia KB009A-10KT применяется для изучения биохимического профиля микроорганизмов и валидации лабораторных штаммов; для анализа используют только предварительно выделенные и очищенные чистые культуры, а не клинические образцы напрямую.

Назначение и состав системы

KB009 — стандартизованная система цветометрической идентификации, предназначенная для изучения биохимического профиля широкого спектра микроорганизмов и валидации известных лабораторных штаммов.

Система включает 35 тестов утилизации углеводов:

• часть A — 12 тестов утилизации углеводов;
• часть B1 — 12 тестов утилизации углеводов;
• часть C — 11 тестов утилизации сахаров и 1 контрольный тест.

KB009 выпускается как полный набор, а также отдельными компонентами: Part A, Part B1 и Part C. KB009A-10KT — часть A, содержащая 10 наборов.

Принцип измерения

Каждый набор HiCarbohydrate представляет собой стандартизованную цветометрическую систему идентификации, основанную на 35 тестах утилизации углеводов. Тесты используют изменение pH и утилизацию субстрата. В процессе инкубации микроорганизмы претерпевают метаболические изменения, которые проявляются самопроизвольным изменением цвета питательной среды.

Комплект и содержимое системы

Ниже приведена комплектность системы KB009, включая состав частей A, B1 и C:

Методика проведения анализа

Подготовка инокулята

1. KB009 нельзя использовать непосредственно для клинических образцов. Предназначенные для идентификации микроорганизмы необходимо предварительно выделить и очистить. Используют только чистые культуры.
2. Выделите исследуемый микроорганизм на обычной питательной среде, например на питательном агаре (M001/M1274) или агаре с мозгово-сердечной вытяжкой (M211).
3. Отберите одну изолированную колонию, внесите её в 5 мл бульона с мозгово-сердечной вытяжкой и инкубируйте при 35–37 °C в течение 4–6 ч, пока мутность инокулята не достигнет не менее 0,5 OD при 620 нм. Для некоторых требовательных микроорганизмов может потребоваться инкубация более 6 ч. В таком случае инкубируйте до достижения мутности инокулята 0,5 OD при 620 нм.
4. В качестве альтернативы приготовьте инокулят из 1–3 хорошо изолированных колоний, приготовив однородную суспензию в 2–3 мл стерильного физиологического раствора. Плотность суспензии должна составлять 0,5 OD при 620 нм.

Если мутность инокулята ниже 0,5 OD, возможно получение ошибочных ложноотрицательных результатов. Более выраженные результаты получают при использовании обогащённой культуры, а не суспензии.

Внесение инокулята

• Вскройте набор с соблюдением асептических условий.
• Снимите герметизирующую фольгу.
• Внесите в каждую лунку по 50 мкл подготовленного инокулята методом поверхностного посева.
• В качестве альтернативы каждую отдельную лунку можно инокулировать прокалыванием петлёй, содержащей одну петлю инокулята.

Инкубация

• Температура инкубации: 35 ± 2 °C.
• Продолжительность инкубации: 18–24 ч.

Интерпретация результатов

Результаты интерпретируют в соответствии с таблицей интерпретации результатов.

Тест ферментации углеводов

• При положительном результате цвет среды изменяется с красного на жёлтый вследствие образования кислоты.
• При отрицательном результате среда остаётся красной.

Тест ONPG

• При положительном результате среда изменяет цвет с бесцветного на жёлтый.
• При отрицательном результате среда остаётся бесцветной.

Гидролиз эскулина

• При положительном результате цвет среды изменяется с кремового на чёрный.
• При отрицательном результате среда остаётся кремовой.

Утилизация цитрата

• При положительном результате цвет среды изменяется с желтовато-зелёного на синий.
• При отрицательном результате среда остаётся желтовато-зелёной.

Утилизация малоната

• При положительном результате цвет среды изменяется со светло-зелёного на синий.
• При отрицательном результате среда остаётся светло-зелёной.

Таблица интерпретации результатов

Особенности интерпретации

1. В тесте ферментации углеводов некоторые микроорганизмы дают слабую реакцию. В этом случае реакцию регистрируют как «+» и продолжают инкубацию в течение 48 ч. Оранжевый цвет после 48 ч инкубации интерпретируют как отрицательную реакцию.
2. Иногда микроорганизмы дают противоречивые результаты вследствие мутации или из-за особенностей среды, использованной для выделения, культивирования и поддержания культуры.

Меры предосторожности

• Клинические образцы и микробные культуры следует считать потенциально патогенными и обращаться с ними соответствующим образом.
• При инокуляции и работе с наборами необходимо соблюдать асептические условия.

Утилизация использованных материалов

После использования наборы и инструменты, применявшиеся для выделения и инокуляции, включая пипетки и петли, необходимо обеззаразить подходящим дезинфицирующим средством, а затем утилизировать сжиганием или автоклавированием в пакете для утилизации.

Условия хранения и срок годности

При получении материал необходимо хранить при температур