HiMedia KB009-5KT Набор HiCarbo (5 наборов)

Питательная диагностическая среда HiMedia KB009-5KT Набор HiCarbo (5 наборов) для 35 тестов утилизации углеводов. Набор предназначен для идентификации микроорганизмов из клинических и неклинических образцов после выделения чистой культуры при инкубации 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Идентификация изделия

Параметр	Значение
Наименование продукта	Набор HiCarbo™
Артикул	KB009

Назначение

KB009 представляет собой комбинацию из 35 тестов для определения утилизации углеводов микроорганизмами, выделенными из клинических и неклинических образцов. Набор также может применяться для валидации известных лабораторных штаммов.

Набор KB009 доступен в виде полного комплекта, а также отдельно в составе частей A, B и C.

Состав набора

Каждый комплект содержит 5, 10 или 20 наборов частей A, B и C KB009; количество материала рассчитано соответственно на проведение 5, 10 или 20 анализов.

Часть A

Набор HiCarbo™ — часть A включает следующие тесты:

• лактоза;
• ксилоза;
• мальтоза;
• фруктоза;
• декстроза;
• галактоза;
• раффиноза;
• трегалоза;
• мелибиоза;
• сахароза;
• L-арабиноза;
• манноза.

Часть B

Набор HiCarbo™ — часть B включает следующие тесты:

• инулин;
• глюконат натрия;
• глицерин;
• салицин;
• дульцит;
• инозитол;
• сорбитол;
• маннитол;
• адонитол;
• арабитол;
• эритритол;
• α-метил-D-глюкозид.

Часть C

Набор HiCarbo™ — часть C включает следующие тесты и контроль:

• рамноза;
• целлобиоза;
• мелецитоза;
• α-метил-D-маннозид;
• ксилитол;
• ONPG;
• эскулин;
• D-арабиноза;
• цитрат;
• малонат;
• сорбоза;
• 1 контроль.

Документация

• техническая инструкция по применению;
• таблица интерпретации результатов;
• лист регистрации результатов.

Необходимые, но не входящие в комплект материалы

• стандарт мутности Мак-Фарланда;
• инокуляционные петли;
• пипетки;
• обогатительная среда или среда для выделения культуры.

Тип образца

Чистая изолированная культура, полученная из клинического или неклинического образца.

Пробоподготовка

KB009 нельзя использовать непосредственно с клиническими образцами. Идентифицируемые микроорганизмы предварительно выделяют и очищают; используют только чистые культуры.

Для выделения микроорганизма применяют стандартную среду, например:

• питательный агар M001;
• питательный агар для оксидазного теста M1274;
• агар BHI M211.

Приготовление инокулята

1. Отберите одну изолированную колонию, внесите её в 5 мл бульона BHI M210 и инкубируйте при 35–37 °C в течение 4–6 ч, пока мутность инокулята не достигнет оптической плотности 0,5 OD при 620 нм.
2. Для некоторых требовательных микроорганизмов может потребоваться инкубация более 6 ч. В этом случае инкубируйте культуру до достижения мутности 0,5 OD при 620 нм.
3. Альтернативный способ приготовления инокулята: отберите 1–3 хорошо изолированные колонии и приготовьте однородную суспензию в 2–3 мл стерильного физиологического раствора.
4. Плотность полученной суспензии должна составлять 0,5 OD при 620 нм.

Методика внесения инокулята

1. Вскройте набор с соблюдением правил асептики.
2. Снимите герметизирующую фольгу.
3. Внесите в каждую лунку по 50 мкл приготовленного инокулята методом поверхностного посева.
4. В качестве альтернативы каждую лунку можно инокулировать прокалыванием петлёй с одной порцией инокулята.

Условия инкубации

• Температура инкубации: 35–37 °C.
• Продолжительность инкубации: 18–24 ч.

Принцип идентификации

Набор HiCarbo™ представляет собой стандартизированную колориметрическую систему идентификации, включающую 35 тестов утилизации углеводов. Тесты основаны на изменении pH и утилизации субстрата. В процессе инкубации микроорганизмы претерпевают метаболические изменения, которые выявляются по самопроизвольному изменению цвета питательной среды.

Интерпретация результатов

Результаты интерпретируют в соответствии с таблицей интерпретации результатов.

Тесты утилизации углеводов

Лунки № 1–12 частей A и B, а также лунки № 1–5, 8 и 11 части C:

• положительный результат — изменение цвета на жёлтый;
• красный цвет или отсутствие изменения цвета — отрицательная реакция.

Тест ONPG

Лунка № 6 части C:

• положительный результат — изменение цвета среды с бесцветного на жёлтый;
• отрицательный результат — среда остаётся бесцветной.

Гидролиз эскулина

Лунка № 7 части C:

• положительный результат — изменение цвета среды с кремового на чёрный;
• отрицательный результат — среда остаётся кремовой.

Утилизация цитрата

Лунка № 9 части C:

• положительный результат — изменение цвета среды с зелёного на синий;
• отрицательный результат — среда остаётся зелёной.

Утилизация малоната

Лунка № 10 части C:

• положительный результат — изменение цвета среды со светло-зелёного на синий;
• отрицательный результат — среда остаётся светло-зелёной.

Таблица интерпретации результатов

Тест	Принцип	Исходный цвет среды	Положительная реакция	Отрицательная реакция
Утилизация углеводов	Выявление утилизации углеводов	Розовато-красный / красный	Жёлтый	Красный / розовый
ONPG	Выявление активности β-галактозидазы	Бесцветный	Жёлтый	Бесцветный
Гидролиз эскулина	Выявление гидролиза эскулина	Кремовый	Чёрный	Кремовый
Утилизация цитрата	Выявление способности микроорганизма использовать цитрат как единственный источник углерода	Зелёный	Синий	Зелёный
Утилизация малоната	Выявление способности микроорганизма использовать малонат натрия как единственный источник углерода	Светло-зелёный	Синий	Светло-зелёный

Технические характеристики и контроль качества

Внешний вид

Стерильная непрозрачная белая полоска:

• часть A содержит 12 лунок с тестами утилизации углеводов;
• часть B содержит 12 лунок с тестами утилизации углеводов;
• часть C содержит 11 тестов и 1 контрольную лунку.

Объём среды

Объём среды в каждой лунке: 0,8 мл.

Проверка стерильности

Соответствует критериям выпуска.

Контрольный состав части A

Лактоза, ксилоза, мальтоза, фруктоза, декстроза, галактоза, раффиноза, трегалоза, мелибиоза, сахароза, L-арабиноза, манноза.

Контрольный состав части B

Инулин, глюконат натрия, глицерин, салицин, дульцит, инозитол, сорбитол, маннитол, адонитол, арабитол, эритритол, α-метил-D-глюкозид.

Контрольный состав части C

Рамноза, целлобиоза, мелецитоза, α-метил-D-маннозид, ксилитол, ONPG, эскулин, D-арабиноза, цитрат, малонат, сорбоза и 1 контроль.

Условия хранения и срок годности

• Условия хранения при получении: 2–8 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• Рабочие характеристики продукта обеспечиваются при использовании в установленный срок годности и хранении при рекомендованной температуре.
• После извлечения из холодильника реагентам необходимо дать нагреться до комнатной температуры.

Ограничения и возможные источники ошибок

1. В тестах ферментации углеводов некоторые микроорганизмы могут давать слабую реакцию. В таком случае реакцию регистрируют как положительную (+) и продолжают инкубацию до 48 ч.
2. Оранжевый цвет после 48 ч инкубации интерпретируют как отрицательную реакцию.
3. Иногда микроорганизмы дают противоречивые результаты вследствие мутаций либо из-за особенностей сред, использованных для выделения, культивирования и поддержания культуры.
4. Индекс идентификации составлен на основании стандартных источников и результатов тестов, выполненных в лаборатории.
5. Ложноотрицательные результаты могут возникать при мутности инокулята менее 0,5 OD.
6. Результаты более выражены при использовании обогащённой культуры, а не суспензии.
7. Набор нельзя использовать непосредственно с клиническими образцами. Идентифицируемые микроорганизмы должны быть предварительно выделены на подходящих средах для выделения; используют только чистые культуры.

Требования безопасности

Набор предназначен для диагностики in vitro и только для профессионального применения.

При работе необходимо:

• ознакомиться с этикеткой до вскрытия упаковки;
• использовать защитные перчатки;
• использовать защитную одежду;
• использовать средства защиты глаз;
• использовать средства защиты лица;
• соблюдать правила надлежащей микробиологической работы при обращении с образцами и культурами;
• соблюдать стандартные меры предосторожности, установленные для работы с клиническими образцами;
• поддерживать асептические условия при инокуляции и обращении с наборами;
• не допускать контакта реагентов с кожей, глазами