HiMedia KB009-20KT Набор HiCarbohydrate (20 наборов)

Набор питательных сред HiMedia KB009-20KT Набор HiCarbohydrate (20 наборов) предназначен для выполнения 35 тестов утилизации углеводов и поставляется в виде 20 комплектов частей A, B и C. Набор применяют для идентификации микроорганизмов из клинических и не клинических образцов после предварительного выделения чистой культуры, а также для проверки известных лабораторных штаммов; непосредственное внесение клинических образцов запрещено.

Идентификация продукта

Параметр	Значение
Наименование продукта	Набор HiCarbo™
Артикул	KB009

Назначение

KB009 представляет собой комбинацию из 35 тестов для определения утилизации углеводов в клинических и не клинических образцах. Набор также может использоваться для валидации известных лабораторных штаммов.

KB009 доступен как полный набор, а также отдельно в виде частей A, B и C.

Комплект набора

Каждый набор содержит 5, 10 или 20 комплектов частей A, B и C KB009; количества реагентов достаточно для выполнения соответственно 5, 10 или 20 тестов.

Часть A

Набор HiCarbo™ — часть A:

• лактоза;
• ксилоза;
• мальтоза;
• фруктоза;
• декстроза;
• галактоза;
• рафиноза;
• трегалоза;
• мелибиоза;
• сахароза;
• L-арабиноза;
• манноза.

Часть B

Набор HiCarbo™ — часть B:

• инулин;
• глюконат натрия;
• глицерин;
• салицин;
• дульцитол;
• инозитол;
• сорбитол;
• маннитол;
• адонитол;
• арабитол;
• эритритол;
• α-метил-D-глюкозид.

Часть C

Набор HiCarbo™ — часть C:

• рамноза;
• целлобиоза;
• мелецитоза;
• α-метил-D-маннозид;
• ксилитол;
• ONPG;
• эскулин;
• D-арабиноза;
• цитрат;
• малонат;
• сорбоза;
• 1 контрольная лунка.

Документация

• техническая инструкция к продукту;
• таблица интерпретации результатов;
• лист регистрации результатов.

Необходимые материалы, не входящие в комплект

• стандарт Мак-Фарланда;
• инокуляционные петли;
• пипетки;
• обогащающая среда или среда для выделения культуры.

Тип образца

Чистая культура, выделенная из клинического или не клинического образца.

Принцип измерения

Каждый набор HiCarbo™ представляет собой стандартизированную колориметрическую систему идентификации, включающую 35 тестов утилизации углеводов. Тесты основаны на изменении pH и утилизации субстрата. В процессе инкубации микроорганизмы претерпевают метаболические изменения, которые выявляются по самопроизвольному изменению цвета среды.

Подготовка инокулята

1. KB009 нельзя использовать непосредственно с клиническими образцами. Микроорганизмы, подлежащие идентификации, сначала выделяют и очищают; используют только чистые культуры.
2. Выделите микроорганизм на стандартной среде, например на питательном агаре (M001), питательном агаре для определения оксидазы (M1274) или агаре BHI (M211).
3. Отберите одну изолированную колонию, внесите её в 5 мл бульона BHI (M210) и инкубируйте при 35–37 °C в течение 4–6 ч, пока мутность инокулята не достигнет оптической плотности 0,5 OD при 620 нм.
4. Для некоторых требовательных микроорганизмов может потребоваться инкубация более 6 ч. В этом случае инкубируйте культуру до достижения мутности инокулята 0,5 OD при 620 нм.
5. Альтернативный способ подготовки инокулята: отберите 1–3 хорошо изолированные колонии и приготовьте однородную суспензию в 2–3 мл стерильного физиологического раствора. Плотность суспензии должна составлять 0,5 OD при 620 нм.

Внесение инокулята

1. Вскройте набор с соблюдением правил асептики.
2. Снимите герметизирующую фольгу.
3. Внесите в каждую лунку по 50 мкл подготовленного инокулята методом поверхностного посева.
4. В качестве альтернативы каждую отдельную лунку можно инокулировать уколом инокуляционной петлёй с внесением одной петли инокулята.

Инкубация

• Температура инкубации: 35 ± 2 °C.
• Продолжительность инкубации: 18–24 ч.

Технические характеристики и контроль качества

Внешний вид

Стерильная белая непрозрачная полоска:

• часть A содержит 12 лунок с 12 тестами утилизации углеводов;
• часть B содержит 12 лунок с 12 тестами утилизации углеводов;
• часть C содержит 11 тестов и 1 контрольную лунку.

Объём среды

• Объём среды в каждой лунке: 0,8 мл.

Контроль стерильности

• Соответствует критериям выпуска.

Условия эффективности

Ожидаемые характеристики среды обеспечиваются при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Интерпретация результатов

Результаты интерпретируют по таблице интерпретации результатов.

Тесты утилизации углеводов

Лунки № 1–12 частей A и B, а также лунки № 1–5, 8 и 11 части C:

• положительный результат — изменение цвета на жёлтый;
• отрицательная реакция — красный цвет или отсутствие изменения цвета.

Тест ONPG

Лунка № 6 части C:

• положительный результат — изменение цвета среды с бесцветного на жёлтый;
• отрицательный результат — среда остаётся бесцветной.

Гидролиз эскулина

Лунка № 7 части C:

• положительный результат — изменение цвета среды с кремового на чёрный;
• отрицательный результат — среда остаётся кремовой.

Утилизация цитрата

Лунка № 9 части C:

• положительный результат — изменение цвета среды с зелёного на синий;
• отрицательный результат — среда остаётся зелёной.

Утилизация малоната

Лунка № 10 части C:

• положительный результат — изменение цвета среды со светло-зелёного на синий;
• отрицательный результат — среда остаётся светло-зелёной.

Таблица интерпретации результатов

Тест	Принцип	Исходный цвет среды	Положительная реакция	Отрицательная реакция
Утилизация углеводов	Выявление утилизации углеводов	Розовато-красный / красный	Жёлтый	Красный / розовый
ONPG	Выявление активности β-галактозидазы	Бесцветный	Жёлтый	Бесцветный
Гидролиз эскулина	Выявление гидролиза эскулина	Кремовый	Чёрный	Кремовый
Утилизация цитрата	Выявление способности микроорганизма использовать цитрат как единственный источник углерода	Зелёный	Синий	Зелёный
Утилизация малоната	Выявление способности микроорганизма использовать малонат натрия как единственный источник углерода	Светло-зелёный	Синий	Светло-зелёный

Ограничения применения

1. После извлечения из холодильника дайте реагентам нагреться до комнатной температуры.
2. При проведении теста ферментации углеводов некоторые микроорганизмы могут давать слабую реакцию. В этом случае зарегистрируйте реакцию как положительную (+) и продолжите инкубацию до 48 ч. Оранжевый цвет после 48 ч инкубации интерпретируют как отрицательную реакцию.
3. Иногда микроорганизмы дают противоречивые результаты из-за мутаций или из-за используемой среды для выделения, культивирования и поддержания культуры.
4. Индекс идентификации составлен на основании стандартных справочных данных и результатов тестов, проведённых в лаборатории.
5. Ошибочные ложноотрицательные результаты могут быть получены, если мутность инокулята ниже 0,5 OD.
6. Результаты выражены более отчётливо при использовании обогащённой культуры, а не суспензии.
7. Набор нельзя использовать непосредственно с клиническими образцами. Микроорганизмы, подлежащие идентификации, сначала выделяют на соответствующих средах для выделения; используют только чистые культуры.

Сбор и обращение с образцами

• Требования к сбору и обращению с образцами: см. инструкцию.

Условия хранения и срок годности

• Условия хранения при получении: 2–8 °C.
• Использование: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• Условия сохранения рабочих характеристик: использование в течение установленного срока годности при рекомендованной температуре хранения.

Меры безопасности

• Изделие предназначено для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед вскрытием упаковки прочитайте этикетку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Во время инокуляции и обращения с наборами поддерживайте асептические условия.
• Не допускайте контакта реагентов с кожей, глазами и одеждой.
• При необходимости руководствуйтесь указаниями по безопасности, приведёнными в соответствующих паспортах безопасности.

Утилизация

После использования наборы, а также инструменты, применявшиеся для выделения и инокуляции культуры, включая пипетки и инокуляционные петли, необходимо обеззаразить подходящим дезинфицирующим средством, после чего утилизировать сжиганием или автоклавированием в пакете для утилизации.

При