HiMedia KB008-5KT Набор для идентификации Neisseria HiNeisseria (5 наборов)

Набор для идентификации Neisseria HiNeisseria KB008-5KT производства HiMedia представляет собой систему из 12 биохимических тестов для определения видов нейссерий из клинических образцов. Применяется для анализа чистых изолятов и валидации известных лабораторных штаммов; включает 6 тестов на утилизацию углеводов и 6 стандартных биохимических тестов.

Принцип измерения

Система KB008 основана на колориметрическом методе идентификации. Тесты базируются на принципе изменения pH и утилизации субстрата: в процессе инкубации микроорганизмы подвергаются метаболическим изменениям, которые проявляются либо спонтанным изменением цвета среды, либо после добавления специфического реагента.

Область применения

Набор предназначен для идентификации видов Neisseria из чистых культур, полученных из клинического материала. Не может быть использован напрямую для анализа клинических образцов; предварительно микроорганизмы должны быть изолированы на соответствующих средах.

Методика проведения анализа

Подготовка инокулята

1. Изолируйте определяемый организм на селективной среде, например, на базе среды Тейера-Мартина (M413) или шоколадном агаре (M103).
2. Выберите одну изолированную колонию и инокулируйте в 5 мл бульона BHI (M210).
3. Инкубируйте при температуре 35–37 °C в течение 4–6 часов в атмосфере с 5–10 % CO₂ и влажностью 70 %, пока плотность инокулята не достигнет $\ge$ 0,1 OD при 620 нм или 0,5 по стандарту МакФарленда.

Инокуляция набора

1. Асептически откройте набор, снимите защитную фольгу.
2. Внесите в каждую лунку по 50 мкл подготовленного инокулята методом поверхностного нанесения.
3. Альтернативно возможна инокуляция путем прокалывания каждой лунки петлей с инокулятом.

Инкубация

• Температура: 35–37 °C.
• Условия: 5–10 % CO₂, влажность 70 %.
• Продолжительность: 18–24 часа.

Интерпретация результатов

Результаты оцениваются согласно таблице интерпретации. Добавление реагентов в лунки № 3, 4, 5 и 6 производится по окончании периода инкубации (через 18–48 часов).

Описание тестов по лункам

• Лунка № 1 (Уреаза): Положительный результат — изменение цвета на розовый. Отрицательный — цвет не меняется.
• Лунка № 2 (ONPG): Положительный результат — изменение цвета с бесцветного на жёлтый. Отрицательный — среда остаётся бесцветной.
• Лунка № 3 (Фогес-Проскауэр): Добавить 2–3 капли реагента Барритта А (R029) и 1 каплю реагента Барритта B (R030). Положительный результат — появление розово-красного цвета через 5–10 минут. Отрицательный — отсутствие изменения цвета или появление медного оттенка.
• Лунка № 4 (Оксидаза): Добавить 1–2 капли реагента Гордона-Маклеода (R026). Положительный результат — изменение цвета с бесцветного на тёмно-фиолетовый в течение 10 секунд. Отрицательный — среда остаётся бесцветной через 60 секунд.
• Лунка № 5 (Каталаза): Добавить 2–3 капли реагента перекиси водорода. Положительный результат — эффервесценция (вспенивание). Отрицательный — отсутствие пузырьков.
• Лунка № 6 (Восстановление нитратов): Добавить 1–2 капли сульфаниловой кислоты (R015) и 1–2 капли реагента N,N-диметил-1-нафтиламина (R009). Положительный результат — немедленное появление розово-красного цвета. Отрицательный — цвет не меняется.
• Лунки № 7–12 (Ферментация углеводов): Положительный результат — изменение цвета на жёлтый. Отрицательный — красный цвет или отсутствие изменений.

Технические характеристики

Таблица интерпретации результатов

Индекс идентификации видов Neisseria

Обозначения:

• + = Положительная реакция (более 90 % штаммов)
• — = Отрицательная реакция (более 90 % штаммов)
• V = Вариабельная реакция (11–89 % положительных)
• Nd = Не определено

Общие параметры

• Количество сред в лунке: 0,8 мл.
• Внешний вид: стерильная белая непрозрачная полоска с 12 лунками.
• Условия хранения: 2–8 °C.

Комплект поставки

1. Стерильные среды для тестов: Уреаза, ONPG, Фогес-Проскауэр, Оксидаза, Каталаза, Восстановление нитратов, Глюкоза, Мальтоза, Лактоза, Сахароза, Фруктоза, Манноза.
2. Сульфаниловая кислота 0,8 % (R015) для теста на нитраты.
3. Реагент N,N-диметил-1-нафтиламина (R009) для теста на нитраты.
4. Реагент Барритта A (R029) для VP-теста.
5. Реагент Барритта B (R030) для VP-теста.
6. Реагент Гордона-Маклеода (R026) для теста на оксидазу.
7. Таблица интерпретации результатов и лист записи данных.
8. Индекс идентификации.
9. Технический вкладыш.

Ограничения и предостережения

• Реагенты должны быть доведены до комнатной температуры перед использованием.
• При слабой реакции в тестах на ферментацию углеводов следует зафиксировать результат как «$\pm$» и продолжить инкубацию до 48 часов. Оранжевый цвет через 48 часов считается отрицательным результатом.
• Возможны противоречивые результаты из-за мутаций или влияния сред, использованных для изоляции и культивирования.
• Ложноотрицательные результаты могут быть получены при мутности инокулята менее 0,1 OD.
• Использование обогащенной культуры вместо суспензии делает результаты более выраженными.
• Только для профессионального использования in vitro. Требуется соблюдение правил микробиологической безопасности и асептических условий.