HiMedia KB008-5KT Набор для идентификации Neisseria HiNeisseria (5 наборов)

Набор для идентификации HiMedia KB008-5KT Набор для идентификации Neisseria HiNeisseria (5 наборов) предназначен для проведения 12 биохимических тестов на чистых изолятах. Набор используют для идентификации видов Neisseria из клинического материала и валидации известных лабораторных штаммов, но не применяют непосредственно с клиническими образцами.

Назначение

KB008 — комбинация из 12 тестов для идентификации видов Neisseria из клинического материала с использованием чистого изолята. Набор также может применяться для валидации известных лабораторных штаммов.

Идентификация изделия

Принцип идентификации

Каждый набор KB008 представляет собой стандартизированную колориметрическую систему идентификации, включающую шесть традиционных биохимических тестов и шесть тестов на утилизацию углеводов. Тесты основаны на изменении pH и утилизации субстратов. Во время инкубации микроорганизмы претерпевают метаболические изменения, которые проявляются изменением цвета среды — визуально непосредственно или после добавления реагента.

Исследуемый материал

Тип образца: чистый изолят из клинического материала.

Сбор и обращение с образцами

Сбор и обращение с образцами выполняют в соответствии с инструкцией по проведению анализа.

Состав набора

1. Каждый набор содержит 5, 10 или 20 комплектов KB008 с достаточным количеством материалов для выполнения соответственно 5, 10 или 20 тестов. В комплект входят стерильные среды для определения уреазы, ONPG, реакции Вогеса—Проскауэра, оксидазы, каталазы, восстановления нитратов, а также утилизации глюкозы, мальтозы, лактозы, сахарозы, фруктозы и маннозы.
2. Сульфаниловая кислота 0,8 % (R015) для теста на восстановление нитратов.
3. Реагент N,N-диметил-1-нафтиламина (R009) для теста на восстановление нитратов.
4. Реагент Барритта A (R029) для теста Вогеса—Проскауэра.
5. Реагент Барритта B (R030) для теста Вогеса—Проскауэра.
6. Реагент Гордона—Маклеода (R026) для теста на оксидазу.
7. Таблица интерпретации результатов и лист регистрации результатов.
8. Индекс идентификации.
9. Техническая инструкция к продукту.

Материалы и оборудование, не входящие в комплект

1. Стандарт МакФарланда.
2. Инокуляционные петли и пипетки.
3. Обогащающая или изоляционная питательная среда.

Методика подготовки посевного материала

1. Выделите идентифицируемый микроорганизм на селективной среде, например на основе среды Тейера—Мартина (M413) или шоколадном агаре (M103).
2. Отберите одну изолированную колонию и внесите её в 5 мл бульона BHI (M210).
3. Инкубируйте при 35–37 °C в течение 4–6 ч в атмосфере с содержанием CO₂ 5–10 % и относительной влажностью 70 %.
4. Инкубацию продолжайте до достижения плотности посевного материала не менее 0,1 оптической плотности при 620 нм или уровня 0,5 по стандарту МакФарланда.

Методика инокуляции набора

1. Вскройте набор в асептических условиях и удалите герметизирующую фольгу.
2. Внесите в каждую лунку по 50 мкл подготовленного посевного материала методом поверхностного посева.
3. В качестве альтернативы каждую лунку можно инокулировать прокалыванием инокуляционной петлёй с посевным материалом.

Инкубация

Температура инкубации: 35–37 °C.
Содержание CO₂: 5–10 %.
Относительная влажность: 70 %.
Продолжительность инкубации: 18–24 ч.

Интерпретация результатов

Результаты интерпретируют в соответствии с таблицей интерпретации результатов.

Реагенты в лунки № 3, 4, 5 и 6 следует добавлять в конце периода инкубации, то есть через 18–48 ч.

Контроль качества и внешний вид

Внешний вид: стерильная белая непрозрачная полоска с 12 лунками, содержащими среды для определения уреазы, ONPG, реакции Вогеса—Проскауэра, оксидазы, каталазы, восстановления нитратов, а также утилизации глюкозы, мальтозы, лактозы, сахарозы, фруктозы и маннозы.

Количество среды: 0,8 мл среды в каждой лунке.

Проверка стерильности: соответствует критериям выпуска.

Реакции в лунках

1. Тест на уреазу: лунка № 1

• Положительный результат: изменение цвета на розовый.
• Отрицательная реакция: цвет не изменяется.

2. Тест ONPG: лунка № 2

• Положительный результат: среда изменяет цвет с бесцветного на жёлтый.
• Отрицательная реакция: среда остаётся бесцветной.

3. Тест Вогеса—Проскауэра: лунка № 3

1. Добавьте 2–3 капли реагента Барритта A (R029).
2. Добавьте 1 каплю реагента Барритта B (R030).
3. Положительный результат: через 5–10 мин появляется розовато-красное окрашивание.
4. Отрицательная реакция: цвет не изменяется либо появляется медное окрашивание вследствие реакции реагентов A и B.

4. Тест на оксидазу: лунка № 4

1. Добавьте 1–2 капли реагента Гордона—Маклеода (R026).
2. Положительная реакция: изменение цвета с бесцветного на тёмно-фиолетовый в течение 10 с.
3. Отрицательная реакция: окрашивание отсутствует через 60 с, среда остаётся бесцветной.

5. Тест на каталазу: лунка № 5

1. Добавьте 2–3 капли раствора пероксида водорода.
2. Положительная реакция: появление пузырьков газа.
3. Отрицательная реакция: выделение газа отсутствует.

6. Тест на восстановление нитратов: лунка № 6

1. Добавьте 1–2 капли сульфаниловой кислоты (R015).
2. Добавьте 1–2 капли реагента N,N-диметил-1-нафтиламина (R009).
3. Положительный результат: сразу после добавления реагентов появляется розовато-красное окрашивание.
4. Отрицательная реакция: цвет не изменяется.

7. Тесты на ферментацию углеводов: лунки № 7–12

• Положительный результат: изменение цвета на жёлтый.
• Отрицательная реакция: цвет остаётся красным либо не изменяется.

Таблица интерпретации результатов

Лист регистрации результатов

| № | Тест | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | | --- | --- | --- | --- | --- | --- | --- | --- | --- |