HiMedia KB008-20KT Набор для идентификации Neisseria HiNeisseria (20 наборов)

Набор для идентификации Neisseria HiNeisseria KB008-20KT производства HiMedia, содержащий 20 комплектов для проведения 12 биохимических тестов. Применяется для идентификации видов Neisseria из клинических образцов с использованием чистых изолятов, а также для валидации известных лабораторных штаммов.

Принцип измерения

Система представляет собой стандартизированный колориметрический метод идентификации, основанный на шести традиционных биохимических тестах и шести тестах на утилизацию углеводов. В основе метода лежит изменение pH и использование субстратов: в процессе инкубации микроорганизмы вызывают метаболические изменения, которые проявляются в виде изменения цвета среды (спонтанно или после добавления специфического реагента).

Методика проведения анализа

Подготовка инокулята

1. Изолируйте исследуемый организм на селективной среде, например, на базе среды Тейера-Мартина (M413) или шоколадном агаре (M103).
2. Перенесите одну изолированную колонию в 5 мл бульона BHI (M210).
3. Инкубируйте при температуре 35–37 °C в течение 4–6 часов в атмосфере с содержанием CO₂ 5–10 % и влажностью 70 %, пока плотность инокулята не достигнет $\ge$ 0,1 OD при 620 нм или 0,5 по стандарту МакФарланда.

Инокуляция набора

1. Асептически откройте набор, снимите защитную фольгу.
2. Внесите в каждую лунку по 50 мкл подготовленного инокулята методом поверхностного посева.
3. Альтернативно возможен метод внесения инокулята в каждую лунку с помощью петли (прокалывание).

Инкубация

• Температура: 35–37 °C.
• Условия: 5–10 % CO₂, влажность 70 %.
• Продолжительность: 18–24 часа.

Интерпретация результатов

Результаты оцениваются согласно таблице интерпретации. Добавление реагентов в лунки № 3, 4, 5 и 6 производится по окончании периода инкубации (через 18–48 часов).

Описание тестов по лункам

• Лунка № 1 (Уреаза): Положительная реакция — изменение цвета на розовый. Отрицательная — цвет не меняется.
• Лунка № 2 (ONPG): Положительная реакция — изменение цвета с бесцветного на жёлтый. Отрицательная — среда остаётся бесцветной.
• Лунка № 3 (Фогес-Проскауэр): Добавить 2–3 капли реагента Барритта А (R029) и 1 каплю реагента Барритта B (R030). Положительная реакция — появление розово-красного окрашивания через 5–10 минут. Отрицательная — отсутствие изменения цвета или появление медного оттенка.
• Лунка № 4 (Оксидаза): Добавить 1–2 капли реагента Гордона-Маклеода (R026). Положительная реакция — изменение цвета с бесцветного на тёмно-пурпурный в течение 10 секунд. Отрицательная — среда остаётся бесцветной через 60 секунд.
• Лунка № 5 (Каталаза): Добавить 2–3 капли реагента перекиси водорода. Положительная реакция — эффувесценция (вспенивание). Отрицательная — отсутствие вспенивания.
• Лунка № 6 (Восстановление нитратов): Добавить 1–2 капли сульфаниловой кислоты (R015) и 1–2 капли реагента N,N-диметил-1-нафтиламина (R009). Положительная реакция — немедленное появление розово-красного окрашивания. Отрицательная — цвет не меняется.
• Лунки № 7–12 (Ферментация углеводов): Положительная реакция — изменение цвета на жёлтый. Отрицательная — красный цвет или отсутствие изменений.

Технические характеристики

Таблица интерпретации результатов

Индекс идентификации видов Neisseria

Обозначения:

• + = Положительная реакция (более 90 % штаммов)
• — = Отрицательная реакция (более 90 % штаммов)
• V = Вариабельная реакция (11–89 % положительных)
• Nd = Не определено

Общие параметры

• Объем среды в каждой лунке: 0,8 мл
• Внешний вид: стерильная белая непрозрачная полоска с 12 лунками
• Стерильность: соответствует критериям выпуска

Комплект поставки

1. Стерильные среды для тестов: Уреаза, ONPG, Фогес-Проскауэр, Оксидаза, Каталаза, Восстановление нитратов, Глюкоза, Мальтоза, Лактоза, Сахароза, Фруктоза, Манноза.
2. Сульфаниловая кислота 0,8 % (R015) для теста на нитраты.
3. Реагент N,N-диметил-1-нафтиламин (R009) для теста на нитраты.
4. Реагент Барритта A (R029) для VP-теста.
5. Реагент Барритта B (R030) для VP-теста.
6. Реагент Гордона-Маклеода (R026) для теста на оксидазу.
7. Таблица интерпретации результатов и лист регистрации данных.
8. Индекс идентификации.
9. Технический вкладыш.

Необходимые дополнительные материалы

• Стандарт МакФарланда.
• Инокуляционные петли, пипетки.
• Обогащающие или изоляционные среды.

Ограничения и предостережения

• Реагенты перед использованием должны быть доведены до комнатной температуры.
• При слабых реакциях в тестах на ферментацию углеводов следует зафиксировать результат как «$\pm$» и продолжить инкубацию до 48 часов. Оранжевый цвет через 48 часов считается отрицательным результатом.
• Возможны противоречивые результаты из-за мутаций микроорганизмов или влияния сред, использованных для изоляции и культивирования.
• Ложноотрицательные результаты могут быть получены при мутности инокулята менее 0,1 OD.
• Набор не предназначен для прямого использования с клиническим материалом; требуется предварительное выделение чистой культуры на соответствующих средах.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение при получении: 2–8 °C.
• Использовать до истечения срока годности, указанного на этикетке.
• Только для профессионального использования