HiMedia KB008-10KT Набор для идентификации Neisseria HiNeisseria (10 наборов)

Набор для идентификации Neisseria HiNeisseria KB008-10KT производства HiMedia, состоящий из 10 наборов по 12 тестов. Предназначен для идентификации видов Neisseria из клинических образцов с использованием чистых изолятов, а также для валидации известных лабораторных штаммов.

Принцип измерения

Система KB008 представляет собой стандартизированную колориметрическую систему идентификации, использующую шесть традиционных биохимических тестов и шесть тестов на утилизацию углеводов. Работа основана на принципе изменения pH и утилизации субстрата: в процессе инкубации микроорганизмы вызывают метаболические изменения, которые проявляются в виде смены цвета среды (спонтанно или после добавления специфического реагента).

Методика проведения анализа

Подготовка инокулята

1. Изолируйте определяемый организм на селективной среде, например, на базе среды Тейера-Мартина (M413) или шоколадном агаре (M103).
2. Возьмите одну изолированную колонию и инокулируйте в 5 мл бульона BHI (M210).
3. Инкубируйте при температуре 35–37 °C в течение 4–6 часов в атмосфере с содержанием CO₂ 5–10 % и влажностью 70 %, пока плотность инокулята не станет $\ge$ 0,1 OD при 620 нм или $\ge$ 0,5 по стандарту МакФарленда.

Инокуляция набора

1. Асептически откройте набор, снимите защитную фольгу.
2. Внесите в каждую лунку по 50 мкл подготовленного инокулята методом поверхностного нанесения.
3. Альтернативно возможен метод инокуляции путем погружения петли с инокулятом в каждую лунку.

Инкубация

• Температура: 35–37 °C.
• Условия: 5–10 % CO₂, влажность 70 %.
• Продолжительность: 18–24 часа.

Интерпретация результатов

Результаты оцениваются согласно таблице интерпретации. Добавление реагентов в лунки № 3, 4, 5 и 6 производится по окончании периода инкубации (через 18–48 часов).

Описание тестов по лункам

• Лунка № 1 (Уреаза): Положительный результат — изменение цвета на розовый. Отрицательный — цвет не меняется.
• Лунка № 2 (ONPG): Положительный результат — изменение цвета с бесцветного на жёлтый. Отрицательный — среда остаётся бесцветной.
• Лунка № 3 (Фогес-Проскауэр): Добавить 2–3 капли реагента Барритта А (R029) и 1 каплю реагента Барритта B (R030). Положительный результат — появление розово-красного цвета через 5–10 минут. Отрицательный — отсутствие изменения цвета или появление медного оттенка.
• Лунка № 4 (Оксидаза): Добавить 1–2 капли реагента Гордона-МакКлеода (R026). Положительный результат — изменение цвета с бесцветного на тёмно-пурпурный в течение 10 секунд. Отрицательный — среда остаётся бесцветной через 60 секунд.
• Лунка № 5 (Каталаза): Добавить 2–3 капли реагента перекиси водорода. Положительный результат — эффувесценция (вспенивание). Отрицательный — отсутствие пузырьков.
• Лунка № 6 (Восстановление нитратов): Добавить 1–2 капли сульфаниловой кислоты (R015) и 1–2 капли реагента N,N-диметил-1-нафтиламина (R009). Положительный результат — немедленное появление розово-красного цвета. Отрицательный — цвет не меняется.
• Лунки № 7–12 (Ферментация углеводов): Положительный результат — изменение цвета на жёлтый. Отрицательный — красный цвет или отсутствие изменений.

Технические характеристики

Общие параметры

• Количество тестов в наборе: 12
• Объем среды в каждой лунке: 0,8 мл
• Тип образца: чистый изолят из клинического материала
• Условия хранения при получении: 2–8 °C

Таблица интерпретации результатов

Индекс идентификации видов Neisseria

Условные обозначения:

• + = Положительная реакция (более 90 % штаммов)
• — = Отрицательная реакция (более 90 % штаммов)
• V = Вариабельная реакция (11–89 % положительных)
• Nd = Не определено

Комплект поставки

1. Стерильные среды в лунках для тестов: Уреаза, ONPG, Фогес-Проскауэр, Оксидаза, Каталаза, Восстановление нитратов, Глюкоза, Мальтоза, Лактоза, Сахароза, Фруктоза, Манноза.
2. Сульфаниловая кислота 0,8 % (R015) для теста на нитраты.
3. Реагент N,N-диметил-1-нафтиламин (R009) для теста на нитраты.
4. Реагент Барритта A (R029) для теста VP.
5. Реагент Барритта B (R030) для теста VP.
6. Реагент Гордона-МакКлеода (R026) для теста на оксидазу.
7. Таблица интерпретации результатов и лист записи данных.
8. Индекс идентификации.
9. Технический вкладыш.

Дополнительное оборудование (не входит в комплект)

• Стандарт МакФарленда.
• Инокуляционные петли, пипетки.
• Обогащающие / изоляционные среды.

Ограничения и предостережения

• Реагенты перед использованием должны быть доведены до комнатной температуры.
• При слабой реакции в тестах на ферментацию углеводов следует зафиксировать результат как «$\pm$» и продолжить инкубацию до 48 часов. Оранжевый цвет через 48 часов считается отрицательным результатом.
• Возможны противоречивые результаты из-за мутаций микроорганизмов или особенностей используемых сред для изоляции.
• Ложноотрицательные результаты могут быть получены при мутности инокулята менее 0,1 OD.
• Набор не предназначен для прямого использования с клиническими образцами; требуется предварительное выделение чистой культуры.
• Только для профессионального использования (In Vitro диагностика).