HiMedia KB007-5KT Набор для идентификации Vibrio HiVibrio (5 наборов)

Набор для идентификации Vibrio HiVibrio KB007-5KT производства HiMedia, состоящий из 5 наборов по 12 биохимических тестов. Предназначен для идентификации видов Vibrio из клинических и неклинических образцов с использованием чистых изолятов.

Принцип измерения

Система KB007 представляет собой стандартизированную колориметрическую систему идентификации, основанную на двенадцати традиционных биохимических тестах. Принцип работы базируется на изменении pH среды и утилизации субстратов: в процессе инкубации микроорганизмы вызывают метаболические изменения, которые проявляются в виде изменения цвета среды (спонтанно или после добавления реагента).

Область применения

Набор используется для идентификации грамотрицательных, каталаза-положительных прямых или изогнутых палочек рода Vibrio, являющихся возбудителями холеры. Применяется в микробиологических лабораториях для анализа чистых культур, выделенных из клинического материала или проб окружающей среды.

Методика проведения анализа

Подготовка инокулята

1. Изолируйте исследуемый организм на стандартной среде, например, питательном агаре (M001) или агаре BHI (M211).
2. Перенесите одну изолированную колонию в 5 мл щелочной пептон-воды (M618) или бульона BHI (M210).
3. Инкубируйте при температуре 35–37 °C в течение 4–6 часов до достижения мутности инокулята $\ge$ 0,5 OD при 620 нм (некоторым организмам может потребоваться более 6 часов).
4. Альтернативный метод: приготовьте гомогенную суспензию из 1–3 хорошо изолированных колоний в 2–3 мл стерильного физиологического раствора до достижения плотности 0,5 OD при 620 нм.

Инокуляция набора

1. В асептических условиях откройте набор и снимите защитную фольгу.
2. Внесите в каждую лунку по 50 мкл подготовленного инокулята методом поверхностного посева.
3. Альтернативный метод: инокулируйте каждую лунку путем прокалывания (внесения петлёй) инокулята.

Инкубация и интерпретация

• Температура инкубации: 35–37 °C.
• Продолжительность: 18–24 часа.
• Интерпретация результатов проводится согласно идентификационному индексу. Реагенты в лунку № 1 добавляются строго по окончании периода инкубации (через 18–24 часа).

Интерпретация результатов

Особенности анализа по лункам

• Тест Вогеса-Проскауэра (лунка № 1): добавьте 2–3 капли реагента Баритта А (R029) и 1 каплю реагента Баритта B (R030). Положительный результат — появление розово-красного цвета через 5–10 минут. Отсутствие изменения цвета или медный оттенок — отрицательный результат.
• Утилизация аргинина (лунка № 2): положительный результат — изменение цвета на пурпурный/темно-пурпурный; желтый цвет — отрицательный результат.
• Солеустойчивость (лунка № 3): положительный результат — рост с изменением цвета на красно-пурпурный; красно-пурпурный цвет без роста — отрицательный результат.
• ONPG (лунка № 4): положительный результат — изменение цвета на желтый; отсутствие цвета — отрицательный результат.
• Утилизация цитрата (лунка № 5): положительный результат — изменение цвета на синий; зеленый цвет — отрицательный результат.
• Утилизация орнитина (лунка № 6): положительный результат — изменение цвета на пурпурный/темно-пурпурный; желтый цвет — отрицательный результат.
• Утилизация углеводов (лунки № 7–12): положительный результат — изменение цвета на желтый; красный/розовый цвет — отрицательный результат.

Сводная таблица интерпретации

Технические характеристики

• Формат: стерильная белая непрозрачная полоска с 12 лунками.
• Объем среды в каждой лунке: 0,8 мл.
• Состав тестов:
  • Вогеса-Проскауэра
  • Утилизация аргинина
  • Солеустойчивость
  • ONPG
  • Утилизация цитрата
  • Утилизация орнитина
  • Утилизация углеводов (маннит, арабиноза, сахароза, глюкоза, салицин, целлобиоза).
• Условия хранения: 2–8 °C.

Комплект поставки

• 5 наборов KB007 (достаточное количество материалов для проведения 5 тестов).
• Реагент Баритта A (R029) для теста VP.
• Реагент Баритта B (R030) для теста VP.
• Технический вкладыш.
• Идентификационный индекс.
• Таблица интерпретации результатов и лист записи данных.

Дополнительное оборудование и материалы

Для работы с набором требуются (не входят в комплект):

• Стандарт МакФарленда.
• Инокуляционные петли, пипетки.
• Обогатительные / изоляционные среды.

Ограничения и предостережения

• Набор предназначен исключительно для профессионального использования in vitro.
• Нельзя использовать напрямую для клинических образцов; требуется предварительное выделение чистой культуры на соответствующих средах.
• Ложноотрицательные результаты возможны при мутности инокулята менее 0,5 OD.
• При слабой реакции в тестах на ферментацию углеводов следует зафиксировать результат как «$\pm$» и продолжить инкубацию до 48 часов. Оранжевый цвет через 48 часов считается отрицательным результатом.
• Перед использованием реагенты должны быть доведены до комнатной температуры.