HiMedia KB007-5KT Набор для идентификации Vibrio HiVibrio (5 наборов)

Биохимический набор для идентификации HiMedia KB007-5KT Набор для идентификации Vibrio HiVibrio (5 наборов) содержит 12 тестов для определения видов Vibrio. Набор применяют для идентификации чистых изолятов из клинических и неклинических образцов; непосредственно для исследования клинических образцов без предварительного выделения чистой культуры не предназначен.

Идентификация продукта

Назначение

KB007 — биохимический набор, включающий 12 тестов для идентификации видов Vibrio из клинических и неклинических образцов с использованием чистого изолята. Vibrio — грамотрицательные каталазоположительные прямые или изогнутые палочки; представители рода являются возбудителями холеры. Полный перечень микроорганизмов, идентифицируемых системой, приведён в идентификационном индексе, входящем в комплект.

Принцип идентификации

KB007 представляет собой стандартизированную колориметрическую систему идентификации на основе 12 традиционных биохимических тестов. Тесты основаны на изменении pH и утилизации субстратов. Во время инкубации микроорганизмы претерпевают метаболические изменения, которые проявляются изменением цвета питательной среды — самопроизвольно или после добавления реагента.

Состав набора

Каждый набор содержит 5, 10 или 20 комплектов KB007, рассчитанных соответственно на выполнение 5, 10 или 20 тестов. Один комплект объединяет 12 тестов:

• тест Фогеса—Проскауэра;
• утилизация аргинина;
• устойчивость к соли;
• ONPG;
• утилизация цитрата;
• утилизация орнитина;
• утилизация маннита;
• утилизация арабинозы;
• утилизация сахарозы;
• утилизация глюкозы;
• утилизация салицина;
• утилизация целлобиозы.

В комплект также входят:

• стерильные питательные среды;
• техническая инструкция;
• идентификационный индекс;
• реагент Баритта A (R029) для теста Фогеса—Проскауэра;
• реагент Баритта B (R030) для теста Фогеса—Проскауэра;
• таблица интерпретации результатов;
• бланк регистрации результатов.

Материалы, необходимые, но не входящие в комплект

• стандарт МакФарланда;
• инокуляционные петли;
• пипетки;
• обогатительная или изоляционная питательная среда.

Методика проведения анализа

Подготовка инокулята

1. Выделите исследуемый микроорганизм на стандартной питательной среде, например на питательном агаре (M001) или мозгово-сердечном агаре BHI (M211).
2. Отберите одну изолированную колонию и внесите её в 5 мл щелочной пептонной воды (M618) или мозгово-сердечного бульона BHI (M210).
3. Инкубируйте при 35–37 °C в течение 4–6 ч, пока мутность инокулята не достигнет значения не менее 0,5 OD при 620 нм. Для некоторых микроорганизмов может потребоваться инкубация более 6 ч; в этом случае продолжайте инкубацию до достижения мутности 0,5 OD при 620 нм.
4. Альтернативный способ подготовки инокулята: отберите 1–3 хорошо изолированные колонии и приготовьте однородную суспензию в 2–3 мл стерильного физиологического раствора. Плотность суспензии должна составлять 0,5 OD при 620 нм.

Внесение инокулята в набор

1. Вскройте набор с соблюдением правил асептики.
2. Снимите герметизирующую фольгу.
3. Внесите в каждую лунку по 50 мкл подготовленного инокулята методом поверхностного посева.
4. В качестве альтернативы каждую отдельную лунку можно инокулировать прокалыванием инокуляционной петлёй, содержащей инокулят.

Инкубация

• Температура инкубации: 35–37 °C.
• Продолжительность инкубации: 18–24 ч.

Интерпретация результатов

Интерпретируйте результаты в соответствии с критериями, приведёнными в идентификационном индексе. Реагенты в лунку № 1 добавляйте в конце инкубации, то есть через 18–24 ч.

1. Тест Фогеса—Проскауэра, лунка № 1

• Добавьте 2–3 капли реагента Баритта A (R029) и 1 каплю реагента Баритта B (R030).
• Положительная реакция: появление розово-красного окрашивания через 5–10 мин.
• Отсутствие изменения цвета или медное окрашивание, возникающее вследствие реакции реагентов A и B, указывает на отрицательную реакцию.

2. Утилизация аргинина, лунка № 2

• Положительная реакция: изменение цвета на фиолетовый или тёмно-фиолетовый.
• Жёлтое окрашивание указывает на отрицательную реакцию.

3. Устойчивость к соли, лунка № 3

• Положительная реакция: изменение цвета на красно-фиолетовый при наличии роста.
• Красно-фиолетовый цвет без изменения, соответствующего росту, указывает на отрицательную реакцию.

4. ONPG, лунка № 4

• Положительная реакция: изменение цвета на жёлтый.
• Бесцветная среда или отсутствие изменения цвета указывает на отрицательную реакцию.

5. Утилизация цитрата, лунка № 5

• Положительная реакция: изменение цвета на синий.
• Зелёный цвет указывает на отрицательную реакцию.

6. Утилизация орнитина, лунка № 6

• Положительная реакция: изменение цвета на фиолетовый или тёмно-фиолетовый.
• Жёлтое окрашивание указывает на отрицательную реакцию.

7. Утилизация углеводов, лунки № 7–12

• Положительная реакция: изменение цвета на жёлтый.
• Красное или розовое окрашивание указывает на отрицательную реакцию.

Таблица интерпретации результатов

Тип образца

Чистый изолят, полученный из клинического или неклинического образца.

Сбор и обращение с образцами

Проводите сбор, выделение и подготовку образцов в соответствии с указаниями методики.

Предупреждения и меры предосторожности

• Изделие предназначено для диагностики in