HiMedia KB007-20KT Набор для идентификации Vibrio HiVibrio (20 наборов)

Набор для биохимической идентификации HiMedia KB007-20KT HiVibrio предназначен для идентификации видов Vibrio по комбинации 12 тестов. HiMedia KB007-20KT применяют для анализа чистых изолятов из клинических и неклинических образцов, но не для непосредственного исследования клинического материала.

Идентификация товара

Назначение

KB007 — биохимический набор для идентификации видов Vibrio из клинических и неклинических образцов с использованием чистого изолята. Набор объединяет 12 тестов: Фогеса—Проскауэра, утилизация аргинина, устойчивость к соли, ONPG, утилизация цитрата, утилизация орнитина и 6 тестов на утилизацию углеводов — маннита, арабинозы, сахарозы, глюкозы, салицина и целлобиозы.

Vibrio — грамотрицательные каталазоположительные прямые или изогнутые палочки; представители рода являются возбудителями холеры. Полный перечень микроорганизмов, идентифицируемых системой, приведён в идентификационном индексе, входящем в комплект.

Состав набора

Каждый набор содержит 5, 10 или 20 комплектов KB007, рассчитанных соответственно на проведение 5, 10 или 20 тестов. Каждый комплект включает стерильные среды для следующих реакций:

• тест Фогеса—Проскауэра;
• утилизация аргинина;
• устойчивость к соли;
• ONPG;
• утилизация цитрата;
• утилизация орнитина;
• утилизация маннита;
• утилизация арабинозы;
• утилизация сахарозы;
• утилизация глюкозы;
• утилизация салицина;
• утилизация целлобиозы.

Комплект поставки

• Наборы KB007 в количестве 5, 10 или 20 комплектов в зависимости от исполнения.
• Техническая инструкция к продукту.
• Идентификационный индекс.
• Реагент Баритта A (R029) для теста Фогеса—Проскауэра.
• Реагент Баритта B (R030) для теста Фогеса—Проскауэра.
• Таблица интерпретации результатов.
• Лист регистрации результатов.

Материалы и оборудование, необходимые дополнительно

• Стандарт Мак-Фарланда.
• Инокуляционные петли.
• Пипетки.
• Обогатительная среда или среда для выделения микроорганизмов.

Принцип идентификации

KB007 представляет собой стандартизированную колориметрическую систему идентификации на основе 12 общепринятых биохимических тестов. Реакции основаны на изменении pH и утилизации субстратов. При инкубации микроорганизмы претерпевают метаболические изменения, проявляющиеся изменением цвета среды; изменение может быть видно непосредственно или после добавления реагента.

Тип исследуемого материала

Чистый изолят, полученный из клинического образца или неклинической пробы.

Пробоподготовка

Микроорганизм, подлежащий идентификации, необходимо предварительно выделить на подходящей среде. Для инокуляции используют только чистые культуры.

Методика проведения анализа

Подготовка инокулята

1. Выделите исследуемый микроорганизм на стандартной среде, например на питательном агаре (M001) или агаре BHI (M211).
2. Отберите одну изолированную колонию и внесите её в 5 мл щелочной пептонной воды (M618) или бульона BHI (M210).
3. Инкубируйте при 35–37 °C в течение 4–6 ч до достижения мутности инокулята не менее 0,5 OD при 620 нм. Для некоторых микроорганизмов может потребоваться инкубация более 6 ч. В таком случае продолжайте инкубацию до достижения мутности 0,5 OD при 620 нм.
4. В качестве альтернативы отберите 1–3 хорошо изолированные колонии и приготовьте однородную суспензию в 2–3 мл стерильного физиологического раствора. Плотность суспензии должна составлять 0,5 OD при 620 нм.

Инокуляция набора

1. Вскройте набор с соблюдением правил асептики.
2. Снимите герметизирующую фольгу.
3. Внесите в каждую лунку по 50 мкл подготовленного инокулята методом поверхностной инокуляции.
4. В качестве альтернативы каждую лунку можно инокулировать прокалыванием инокуляционной петлёй, содержащей инокулят.

Инкубация

• Температура инкубации: 35–37 °C.
• Продолжительность инкубации: 18–24 ч.

Интерпретация результатов

Интерпретируйте результаты в соответствии с критериями, приведёнными в идентификационном индексе. Реагенты в лунку № 1 добавляют в конце периода инкубации, то есть через 18–24 ч.

1. Тест Фогеса—Проскауэра, лунка № 1

• Добавьте 2–3 капли реагента Баритта A (R029) и 1 каплю реагента Баритта B (R030).
• Положительная реакция: появление розовато-красного окрашивания через 5–10 мин.
• Отсутствие изменения цвета или медное окрашивание, обусловленное реакцией реагентов A и B, указывает на отрицательную реакцию.

2. Утилизация аргинина, лунка № 2

• Положительная реакция: изменение цвета на пурпурный или тёмно-пурпурный.
• Жёлтое окрашивание указывает на отрицательную реакцию.

3. Устойчивость к соли, лунка № 3

• Положительная реакция: красновато-пурпурное окрашивание с ростом микроорганизма.
• Красновато-пурпурное окрашивание без роста указывает на отрицательную реакцию.

4. ONPG, лунка № 4

• Положительная реакция: изменение цвета на жёлтый.
• Бесцветная среда или отсутствие изменения цвета указывает на отрицательную реакцию.

5. Утилизация цитрата, лунка № 5

• Положительная реакция: изменение цвета на синий.
• Зелёное окрашивание указывает на отрицательную реакцию.

6. Утилизация орнитина, лунка № 6

• Положительная реакция: изменение цвета на пурпурный или тёмно-пурпурный.
• Жёлтое окрашивание указывает на отрицательную реакцию.

7. Утилизация углеводов, лунки № 7–12

• Положительная реакция: изменение цвета на жёлтый.
• Красное или розовое окрашивание указывает на отрицательную реакцию.

Таблица интерпретации результатов

Идентификационный индекс