HiMedia KB007-20KT Набор для идентификации Vibrio HiVibrio (20 наборов)

Набор для идентификации Vibrio HiVibrio (20 наборов) HiMedia KB007-20KT представляет собой биохимическую систему из 12 тестов для определения видов Vibrio из клинических и неклинических образцов. Применяется для анализа чистых изолятов грам-отрицательных каталаза-положительных палочек, являющихся возбудителями холеры.

Принцип измерения

Система KB007 основана на использовании двенадцати стандартных колориметрических биохимических тестов. Принцип работы базируется на изменении pH среды и утилизации субстратов: в процессе инкубации микроорганизмы подвергаются метаболическим изменениям, которые проявляются в виде изменения цвета среды (спонтанно или после добавления специфического реагента).

Область применения

Набор предназначен для идентификации чистых культур Vibrio из клинического материала и неклинических проб. Система не может быть использована напрямую для анализа клинических образцов; микроорганизмы должны быть предварительно выделены на соответствующих изоляционных средах.

Методика проведения анализа

Подготовка инокулята

1. Изолируйте исследуемый организм на общей среде, например, питательном агаре (M001) или агаре BHI (M211).
2. Перенесите одну изолированную колонию в 5 мл щелочной пептон-воды (M618) или бульона BHI (M210).
3. Инкубируйте при 35–37 °C в течение 4–6 часов до достижения мутности инокулята $\ge 0,5$ OD при 620 нм (некоторым организмам может потребоваться более 6 часов).
4. Альтернативный метод: приготовьте гомогенную суспензию из 1–3 хорошо изолированных колоний в 2–3 мл стерильного физиологического раствора с плотностью 0,5 OD при 620 нм.

Инокуляция набора

1. В асептических условиях откройте набор и снимите защитную фольгу.
2. Внесите в каждую лунку по 50 мкл подготовленного инокулята методом поверхностного нанесения.
3. Альтернативно возможен метод инокуляции путем прокалывания каждой лунки петлей с инокулятом.

Инкубация

• Температура: 35–37 °C.
• Продолжительность: 18–24 часа.

Интерпретация результатов

Результаты оцениваются согласно идентификационному индексу, входящему в комплект. Реагенты в лунку № 1 добавляются строго по окончании периода инкубации (через 18–24 часа).

Оценка по тестам

1. Тест Фогеса-Проскауэра (лунка № 1): Добавьте 2–3 капли реагента Баритта А (R029) и 1 каплю реагента Баритта B (R030). Положительная реакция — появление розово-красного цвета через 5–10 минут. Отсутствие изменения цвета или медный оттенок — отрицательная реакция.
2. Утилизация аргинина (лунка № 2): Положительная реакция — изменение цвета на пурпурный/темно-пурпурный. Желтый цвет — отрицательная реакция.
3. Солеустойчивость (лунка № 3): Положительная реакция — рост с изменением цвета на красно-пурпурный. Красно-пурпурный цвет без роста — отрицательная реакция.
4. ONPG (лунка № 4): Положительная реакция — изменение цвета на желтый. Бесцветная среда — отрицательная реакция.
5. Утилизация цитрата (лунка № 5): Положительная реакция — изменение цвета на синий. Зеленый цвет — отрицательная реакция.
6. Утилизация орнитина (лунка № 6): Положительная реакция — изменение цвета на пурпурный/темно-пурпурный. Желтый цвет — отрицательная реакция.
7. Утилизация углеводов (лунки № 7–12): Положительная реакция — изменение цвета на желтый. Красный/розовый цвет — отрицательная реакция.

Таблица интерпретации результатов

Технические характеристики

• Формат: стерильная белая непрозрачная полоска с 12 лунками.
• Объем среды в каждой лунке: 0,8 мл.
• Состав тестов:
  • Фогеса-Проскауэра;
  • Утилизация аргинина;
  • Солеустойчивость;
  • ONPG;
  • Утилизация цитрата;
  • Утилизация орнитина;
  • Утилизация углеводов (маннит, арабиноза, сахароза, глюкоза, салицин, целлобиоза).
• Условия хранения: при получении хранить при температуре +2…+8 °C.

Ограничения и предостережения

• Реагенты должны быть доведены до комнатной температуры перед использованием.
• При слабой реакции в тестах на ферментацию углеводов результат фиксируется как «$\pm$» и инкубация продлевается до 48 часов. Оранжевый цвет через 48 часов считается отрицательным результатом.
• Ошибочные ложноотрицательные результаты могут быть получены, если мутность инокулята ниже 0,5 OD.
• Использование обогащенной культуры вместо суспензии делает результаты более выраженными.
• Возможны противоречивые результаты из-за мутаций микроорганизмов или влияния сред, использованных для изоляции и культивирования.

Комплект поставки

• Набор KB007 (количество тестов согласно модификации: 5/10/20).
• Технический вкладыш.
• Идентификационный индекс.
• Реагент Баритта A (R029) для VP-теста.
• Реагент Баритта B (R030) для VP-теста.
• Таблица интерпретации результатов и лист регистрации данных.

Дополнительное оборудование (не входит в комплект)

• Стандарт МакФарландекса.
• Инокуляционные петли, пипетки.
• Обогащающие и изоляционные среды.