HiMedia KB007-10KT Набор для идентификации Vibrio HiVibrio (10 наборов)

Набор для биохимической идентификации HiMedia KB007-10KT Набор для идентификации Vibrio HiVibrio (10 наборов) рассчитан на выполнение 12 тестов для определения видов Vibrio по чистой изолированной культуре. Набор применяют для идентификации микроорганизмов из клинических и неклинических образцов; прямое исследование клинических образцов не допускается.

Назначение

HiMedia KB007-10KT — биохимический набор для идентификации видов Vibrio по чистому изоляту. Система включает 12 традиционных биохимических тестов:

• тест Фогеса—Проскауэра;
• утилизация аргинина;
• устойчивость к соли;
• ONPG-тест;
• утилизация цитрата;
• утилизация орнитина;
• утилизация углеводов: маннита, арабинозы, сахарозы, глюкозы, салицина и целлобиозы.

Vibrio — грамотрицательные каталазоположительные прямые или изогнутые палочки; представители рода являются возбудителями холеры. Полный перечень организмов, которые могут быть идентифицированы системой, приведён в идентификационном индексе, входящем в комплект.

Принцип измерения и идентификации

KB007 представляет собой стандартизированную колориметрическую систему идентификации на основе 12 биохимических тестов. Тесты основаны на изменении pH и утилизации субстратов. Во время инкубации метаболические изменения микроорганизмов проявляются изменением цвета среды, которое может быть видимым непосредственно или возникать после добавления реагента.

Состав набора

Каждый комплект содержит 5, 10 или 20 наборов KB007, рассчитанных соответственно на выполнение 5, 10 или 20 тестов. В состав каждого набора входят стерильные среды для следующих исследований:

• тест Фогеса—Проскауэра;
• утилизация аргинина;
• устойчивость к соли;
• ONPG-тест;
• утилизация цитрата;
• утилизация орнитина;
• утилизация маннита;
• утилизация арабинозы;
• утилизация сахарозы;
• утилизация глюкозы;
• утилизация салицина;
• утилизация целлобиозы.

Также в комплект входят:

• техническая инструкция к продукту;
• идентификационный индекс;
• реагент Баритт A (R029) для теста Фогеса—Проскауэра;
• реагент Баритт B (R030) для теста Фогеса—Проскауэра;
• таблица интерпретации результатов;
• лист регистрации результатов.

Материалы, необходимые, но не входящие в комплект

• стандарт Мак-Фарланда;
• инокуляционные петли;
• пипетки;
• среда обогащения или изоляционная питательная среда.

Методика проведения анализа

Подготовка инокулята

1. Выделите идентифицируемый микроорганизм на стандартной среде, например на питательном агаре (M001) или агаре BHI (M211).
2. Отберите одну изолированную колонию, внесите её в 5 мл щелочной пептонной воды (M618) или бульона BHI (M210).
3. Инкубируйте при 35–37 °C в течение 4–6 ч, пока мутность инокулята не достигнет значения не менее 0,5 OD при 620 нм. Для некоторых организмов может потребоваться инкубация более 6 ч; в этом случае инкубируйте до достижения мутности 0,5 OD при 620 нм.
4. В качестве альтернативного метода возьмите 1–3 хорошо изолированные колонии и приготовьте однородную суспензию в 2–3 мл стерильного физиологического раствора. Плотность суспензии должна составлять 0,5 OD при 620 нм.

Инокуляция набора

1. Вскройте набор с соблюдением асептических условий.
2. Снимите герметизирующую фольгу.
3. Внесите в каждую лунку по 50 мкл подготовленного инокулята методом поверхностного посева.
4. В качестве альтернативы каждую отдельную лунку можно инокулировать прокалыванием инокуляционной петлёй с набранным инокулятом.

Инкубация

• Температура инкубации: 35–37 °C.
• Продолжительность инкубации: 18–24 ч.

Интерпретация результатов

Интерпретируйте результаты в соответствии с правилами, приведёнными в идентификационном индексе. Реагенты в лунку № 1 добавляйте в конце периода инкубации, то есть через 18–24 ч.

Лунка № 1. Тест Фогеса—Проскауэра

• Добавьте 2–3 капли реагента Баритт A (R029) и 1 каплю реагента Баритт B (R030).
• Положительную реакцию определяют по появлению розовато-красного окрашивания через 5–10 мин.
• Отсутствие изменения цвета или медное окрашивание, обусловленное реакцией реагентов A и B, указывает на отрицательную реакцию.

Лунка № 2. Утилизация аргинина

• Положительная реакция проявляется изменением цвета на фиолетовый или тёмно-фиолетовый.
• Жёлтое окрашивание указывает на отрицательную реакцию.

Лунка № 3. Устойчивость к соли

• Положительная реакция проявляется красновато-фиолетовым окрашиванием при наличии роста.
• Красновато-фиолетовое окрашивание без роста указывает на отрицательную реакцию.

Лунка № 4. ONPG-тест

• Положительная реакция проявляется изменением цвета на жёлтый.
• Бесцветная среда или отсутствие изменения цвета указывает на отрицательную реакцию.

Лунка № 5. Утилизация цитрата

• Положительная реакция проявляется изменением цвета на синий.
• Зелёное окрашивание указывает на отрицательную реакцию.

Лунка № 6. Утилизация орнитина

• Положительная реакция проявляется изменением цвета на фиолетовый или тёмно-фиолетовый.
• Жёлтое окрашивание указывает на отрицательную реакцию.

Лунки № 7–12. Утилизация углеводов

• Положительная реакция проявляется изменением цвета на жёлтый.
• Красное или розовое окрашивание указывает на отрицательную реакцию.

Таблица интерпретации результатов

Тип образца

Чистый изолят из клинического образца или неклинической пробы.

Сбор и обращение с образцами

Проводите сбор и обращение с образцами в соответствии с указаниями методики подготовки инокулята и инокуляции набора.

Меры безопасности

• Набор предназначен для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед вскрытием упаковки прочитайте этикетку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте надлежащие правила микробиологической лабораторной практики при обращении с образцами и культурами.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Во время инокуляции и обращения с наборами поддерживайте асептические условия.
• Не допускайте контакта реагентов с кожей, глазами и одеждой.
• При необходимости обращайтесь к правилам безопасности, приведённым в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. После извлечения из холодильника выдержите реагенты до достижения комнатной температуры.
2. При проведении теста на ферментацию углеводов некоторые микроорганизмы могут давать слабую реакцию. В этом случае зарегистр