HiMedia KB006-5KT Набор для идентификации Candida HiCandida (5 наборов)

Стандартизированная система идентификации HiMedia KB006-5KT HiCandida для дифференциации видов Candida из клинических и неклинических образцов. Набор включает 12 биохимических тестов (определение уреазы и утилизация 11 углеводов) для анализа чистых изолятов.

Принцип измерения

Система основана на колориметрическом методе идентификации с использованием двенадцати стандартных биохимических тестов. Принцип работы базируется на изменении pH среды и утилизации субстратов: в процессе инкубации микроорганизмы подвергаются метаболическим изменениям, что вызывает спонтанное изменение цвета индикатора в среде.

Методика проведения анализа

Подготовка инокулята

Набор KB006 нельзя использовать непосредственно для анализа клинических образцов; микроорганизмы должны быть предварительно изолированы и очищены. Допускается использование только чистых культур.

1. Изолируйте микроорганизм на стандартной среде, например, агаре Сабуро с декстрозой (M063) или картофельном декстрозном агаре (M096).
2. Подготовьте суспензию: выберите 2–4 хорошо изолированные колонии и перенесите их в 2–3 мл стерильного физиологического раствора. Доведите плотность суспензии до 0,5 OD при 620 нм.
3. Альтернативный метод: инокулируйте одну изолированную колонию в 5 мл гранулированного картофельного декстрозного бульона (GM403) и инкубируйте при температуре 22–25 °C в течение 6–8 часов до достижения мутности 0,5 OD при 620 нм.

Инокуляция набора

1. Асептически откройте набор и снимите защитную фольгу.
2. Внесите в каждую лунку по 50 мкл подготовленного инокулята методом поверхностного нанесения.
3. Альтернативно возможен метод инокуляции путем «прокола» (stabbing) каждой лунки петлей с инокулятом.

Инкубация и интерпретация

• Температура инкубации: 22,5 °C ± 2,5 °C.
• Продолжительность инкубации: 24–48 часов.
• Интерпретация результатов проводится согласно идентификационному индексу по истечении указанного времени.

Интерпретация результатов

Общие правила

1. Тест на уреазу (лунка №1):
   • Положительная реакция: изменение цвета с оранжево-желтого на розовый.
   • Отрицательная реакция: отсутствие изменения цвета.
2. Тесты на ферментацию углеводов (лунки №2–12):
   • Положительная реакция: изменение цвета на желтый.
   • Отрицательная реакция: красный цвет или отсутствие изменений.

Таблица интерпретации результатов

Идентификационный индекс видов Candida

Примечание:

• = Положительная реакция (более 90 % штаммов)

• = Отрицательная реакция * = Вариативность штаммов Nd = Не определено

Технические характеристики

• Тип системы: стандартизированная колориметрическая система идентификации
• Количество тестов в наборе: 12 (1 на уреазу, 11 на утилизацию углеводов)
• Объем среды в каждой лунке: 0,8 мл
• Внешний вид: стерильная белая непрозрачная полоска с 12 лунками
• Температура инкубации: 22,5 °C ± 2,5 °C
• Время инкубации: 24–48 часов
• Условия хранения при получении: 2–8 °C

Ограничения и предостережения

• Подготовка: реагенты должны быть доведены до комнатной температуры после извлечения из холодильника.
• Чувствительность: при слабой реакции в тестах на ферментацию углеводов результат записывается как «±» и инкубируется до 48 часов. Оранжевый цвет через 48 часов считается отрицательным результатом.
• Погрешности: возможны ложноотрицательные результаты, если мутность инокулята ниже 0,5 OD.
• Специфика: возможны противоречивые результаты из-за мутаций микроорганизмов или влияния сред, использованных для изоляции и культивирования.
• Требования: использование только чистых культур; прямой анализ клинических образцов запрещен.

Комплект поставки

• Стерильные среды для теста на уреазу и 11 тестов на утилизацию углеводов (мелибиоза, лактоза, мальтоза, сахароза, галактоза, целлобиоза, инозитол, ксилоза, дульцитол, раффиноза, трегалоза).
• Технический вкладыш.
• Таблица интерпретации результатов и лист записи данных.
• Идентификационный индекс.

Дополнительное оборудование (не входит в комплект)

• Стандарт МакФарланда.
• Инокуляционные петли, пипетки.
• Среды для обогащения и изоляции.

Утилизация

После использования наборы и инструменты (пипетки, петли) подлежат дезинфекции подходящим средством с последующим уничтожением путем сжигания или автоклавирования в специальных пакетах для утилизации в соответствии с лабораторными протоколами работы с инфекционными материалами.