HiMedia KB005A-5KT Набор для идентификации стрептококков HiStrep (5 наборов)

Набор для идентификации стрептококков HiStrep HiMedia KB005A-5KT (5 наборов) представляет собой стандартизированную колориметрическую систему, объединяющую 12 биохимических тестов. Применяется для дифференциации видов Streptococcus из клинических и неклинических образцов с использованием чистых изолятов.

Принцип измерения

Система основана на использовании двенадцати традиционных биохимических тестов, базирующихся на принципе изменения pH и утилизации субстратов. В процессе инкубации микроорганизмы подвергаются метаболическим изменениям, которые проявляются в виде изменения цвета среды (спонтанно или после добавления специфического реагента).

Область применения

Набор предназначен для идентификации чистых культур стрептококков, выделенных из клинического материала или неклинических проб. Не может быть использован напрямую для анализа клинических образцов без предварительного выделения чистой культуры.

Методика проведения анализа

Подготовка инокулята

1. Микроорганизмы предварительно изолируют на подходящих средах, например, на питательном агаре (M001) или агаре из tryp tone сои (M290).
2. Одиночную изолированную колонию переносят в 5 мл бульона BHI (M210) и инкубируют при 35–37 °C в течение 4–6 часов до достижения мутности 0,1 OD при 620 нм или 0,5 по стандарту МакФарланда. При необходимости время инкубации увеличивают до достижения указанной плотности.
3. Альтернативный метод: 1–3 хорошо изолированные колонии суспендируют в 2–3 мл стерильного физиологического раствора до достижения плотности 0,1 OD при 620 нм.

Инокуляция набора

1. Асептически открыть набор и снять защитную фольгу.
2. В каждую лунку внести 50 мкл подготовленного инокулята методом поверхностного нанесения.
3. Допустим альтернативный метод: инокуляция каждой лунки путем «закола» петлей с инокулятом.

Инкубация

• Температура: 35 ± 2 °C.
• Продолжительность: 18–24 часа.

Интерпретация результатов

Добавление реагентов в лунки №1 и №3 производится строго по окончании периода инкубации (через 18–24 часа).

Оценка тестов по лункам

• Лунка №1 (Тест Фогеса-Проскауэра): Добавить 2–3 капли реагента Баритта А (R029) и 1 каплю реагента Баритта B (R030). Положительная реакция: появление розово-красного цвета через 5–10 минут. Отрицательная: отсутствие изменения цвета или появление медного оттенка.
• Лунка №2 (Гидролиз эскулина): Положительная реакция: изменение цвета с кремового на черный. Отрицательная: цвет не меняется.
• Лунка №3 (Тест на PYR): Добавить 1–2 капли PYR-реагента (R043). Положительная реакция: появление и сохранение вишнево-красного цвета. Отрицательная: розовый, оранжевый или желтый цвет.
• Лунка №4 (ONPG): Положительная реакция: изменение цвета с бесцветного на желтый. Отрицательная: цвет не меняется.
• Лунка №5 (Утилизация аргинина): Положительная реакция: изменение цвета с оливково-зеленого/светло-пурпурного на темно-пурпурный. Отрицательная: цвет не меняется или становится желтым.
• Лунки №6–12 (Ферментация углеводов): Положительная реакция: изменение цвета на желтый. Отрицательная: красный цвет или отсутствие изменений.

Технические характеристики

Сводная таблица тестов

Индекс идентификации видов Streptococcus

Условные обозначения:

• 90–100 % = +
• 76–89 % = [+]
• 26–75 % = d
• 11–25 % = [-]
• 0–10 % = —
• ND = не определено
• v = вариабельная реакция

Комплект поставки

1. Стерильные среды в лунках для тестов: Фогеса-Проскауэра, гидролиза эскулина, PYR, ONPG, утилизации аргинина и 7 тестов на утилизацию углеводов (глюкоза, лактоза, арабиноза, сахароза, сорбитол, маннитол, раффиноза).
2. Реагент Баритта A (R029) для теста VP.
3. Реагент Баритта B (R030) для теста VP.
4. PYR-реагент (R043).
5. Технический вкладыш.
6. Таблица интерпретации результатов и лист регистрации данных.

Ограничения и требования

• Температурный режим: перед использованием реагенты должны быть доведены до комнатной температуры.
• Слабые реакции: при слабой реакции в тестах на ферментацию углеводов результат фиксируется как «±» и инкубация продлевается до 48 часов. Оранжевый цвет через 48 часов считается отрицательным результатом.
• Погрешности: возможны ложноотрицательные результаты, если мутность инокулята ниже 0,1 OD.
• Качество культуры: результаты более выражены при использовании обогащенной культуры, чем при использовании суспензии.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение: при получении и в процессе эксплуатации хранить при температуре +2…+8 °C.
• Утилизация: после использования наборы и инструменты (пипетки, петли) подлежат дезинфекции с последующим сжиганием или автоклавированием.

Дополнительное оборудование (не входит в комплект)

• Стандарт МакФарланда.
• Инокуляционные петли, пипетки.
• Среды для обогащения / изоляционные среды.