HiMedia KB005A-5KT Набор для идентификации стрептококков HiStrep (5 наборов)

Набор для идентификации стрептококков HiMedia KB005A-5KT Набор для идентификации стрептококков HiStrep (5 наборов) — стандартизированная колориметрическая система из 12 биохимических тестов. Набор предназначен для идентификации видов Streptococcus из клинических и не связанных с клиникой образцов с использованием чистой культуры, но не применяется непосредственно к клиническим образцам.

Назначение

HiStrep KB005A — стандартизированная колориметрическая система идентификации стрептококков, включающая 12 традиционных биохимических тестов:

• тест Фогеса—Проскауэра;
• гидролиз эскулина;
• PYR-тест;
• тест ONPG;
• утилизация аргинина;
• утилизация углеводов: глюкозы, лактозы, арабинозы, сахарозы, сорбитола, маннитола и рафинозы.

Система предназначена для работы с чистым изолятом, предварительно выделенным из клинической или неклинической пробы.

Идентификация товара

Принцип измерения и анализа

KB005A основан на 12 стандартных биохимических тестах. Реакции используют изменение pH и утилизацию субстратов микроорганизмами.

Во время инкубации микроорганизмы вызывают метаболические изменения, которые проявляются изменением цвета питательной среды. Изменение может быть видимым непосредственно или проявляться после добавления соответствующего реагента.

Состав набора

Каждый набор содержит комплекты KB005A в вариантах на 5, 10 или 20 тестов; количество материала соответствует 5, 10 или 20 выполняемым тестам. В состав входят:

• стерильные среды для тестов:
  • Фогеса—Проскауэра;
  • гидролиза эскулина;
  • PYR;
  • ONPG;
  • утилизации аргинина;
  • утилизации 7 углеводов: глюкозы, лактозы, арабинозы, сахарозы, сорбитола, маннитола и рафинозы;
• реагент Баритта A для теста Фогеса—Проскауэра, R029;
• реагент Баритта B для теста Фогеса—Проскауэра, R030;
• реагент PYR, R043;
• техническая инструкция;
• таблица интерпретации результатов;
• лист регистрации результатов.

Материалы, необходимые для работы

В комплект не входят:

• стандарт Мак-Фарланда;
• инокуляционные петли;
• пипетки;
• обогатительная среда или среда для выделения культуры.

Тип образца

Чистый изолят, полученный из клинического или неклинического образца.

Подготовка образца и инокулята

KB005A нельзя использовать непосредственно для клинических образцов. Микроорганизмы, подлежащие идентификации, сначала выделяют на подходящей селективной или изоляционной среде; для анализа используют только чистые культуры.

Подготовка инокулята из изолированной колонии

1. Выделите исследуемый микроорганизм на обычной среде, например на питательном агаре M001 или триптон-соевом агаре M290.
2. Отберите одну изолированную колонию.
3. Инокулируйте 5 мл бульона BHI M210.
4. Инкубируйте при 35–37 °C в течение 4–6 ч до достижения мутности инокулята 0,1 оптической плотности при 620 нм или соответствия стандарту Мак-Фарланда 0,5.
5. Для некоторых микроорганизмов может потребоваться инкубация более 6 ч. В таком случае инкубируйте культуру до достижения мутности 0,1 оптической плотности при 620 нм.

Альтернативная подготовка инокулята

1. Отберите 1–3 хорошо изолированные колонии.
2. Приготовьте однородную суспензию в 2–3 мл стерильного физиологического раствора.
3. Плотность суспензии должна соответствовать 0,1 оптической плотности при 620 нм.

Внесение инокулята

1. Вскройте набор с соблюдением асептических условий.
2. Снимите герметизирующую фольгу.
3. Внесите в каждую лунку по 50 мкл подготовленного инокулята методом поверхностного посева.
4. В качестве альтернативы каждую отдельную лунку можно инокулировать прокалыванием инокуляционной петлёй, содержащей порцию инокулята.

Инкубация

• Температура инкубации: 35 ± 2 °C.
• Продолжительность инкубации: 18–24 ч.

Интерпретация результатов

Результаты интерпретируют согласно стандартам, приведённым в индексе идентификации.

Реагенты в лунки № 1 и № 3 добавляют в конце инкубационного периода, то есть после 18–24 ч.

Контроль качества

Внешний вид

Стерильная белая непрозрачная полоска с 12 лунками, содержащими среды для тестов Фогеса—Проскауэра, гидролиза эскулина, PYR, ONPG, утилизации аргинина и утилизации 7 углеводов: глюкозы, лактозы, арабинозы, сахарозы, сорбитола, маннитола и рафинозы.

Количество среды

Объём среды в каждой лунке: 0,8 мл.

Проверка стерильности

Соответствует критериям выпуска.

Реакции в лунках

Тест Фогеса—Проскауэра: лунка № 1

1. Добавьте 2–3 капли реагента Баритта A R029.
2. Добавьте 1 каплю реагента Баритта B R030.
3. Положительная реакция проявляется появлением розово-красной окраски через 5–10 мин.
4. Отсутствие изменения цвета или появление медной окраски вследствие реакции реагентов A и B указывает на отрицательную реакцию.

Гидролиз эскулина: лунка № 2

• Изменение кремовой окраски на чёрную указывает на положительную реакцию.
• Отсутствие изменения цвета указывает на отрицательную реакцию.

PYR-тест: лунка № 3

1. Добавьте 1–2 капли реагента PYR R043.
2. Положительная реакция проявляется появлением и сохранением вишнёво-красной окраски.
3. Розовая, оранжевая или жёлтая окраска указывает на отрицательную реакцию.

Тест ONPG: лунка № 4

• Изменение цвета с бесцветного на жёлтый указывает на положительную реакцию.
• Отсутствие изменения цвета указывает на отрицательную реакцию.

Утилизация аргинина: лунка № 5

• Изменение окраски от оливково-зелёной или светло-фиолетовой до тёмно-фиолетовой указывает на положительную реакцию.
• Отсутствие изменения цвета или появление жёлтой окраски указывает на отрицательную реакцию.

Ферментация углеводов: лунки № 6–12

• Положительная реакция проявляется изменением цвета на жёлтый.
• Красная окраска или отсутствие изменения цвета указывает на отрицательную реакцию.

Таблица интерпретации результатов