HiMedia KB005A-20KT Набор для идентификации стрептококков HiStrep (20 наборов)

Набор для идентификации стрептококков HiMedia KB005A-20KT HiStrep (20 наборов) — стандартизированная колориметрическая система из 12 биохимических тестов. HiMedia KB005A-20KT применяется для идентификации видов Streptococcus из клинических и не клинических образцов с использованием чистой культуры, но не предназначен для прямого анализа клинических образцов.

Назначение и идентификация

KB005A представляет собой стандартизированную колориметрическую систему для идентификации видов Streptococcus по чистому изоляту из клинических и не клинических образцов.

Комплектация набора

• Набор содержит 5/10/20 наборов KB005A, рассчитанных на выполнение 5/10/20 тестов.
• Стерильные среды для тестов Фогеса—Проскауэра, гидролиза эскулина, PYR, ONPG, утилизации аргинина и утилизации 7 углеводов:
  • глюкоза;
  • лактоза;
  • арабиноза;
  • сахароза;
  • сорбитол;
  • маннитол;
  • раффиноза.
• Реагент Баритта A (R029) для теста Фогеса—Проскауэра.
• Реагент Баритта B (R030) для теста Фогеса—Проскауэра.
• Реагент PYR (R043) для теста PYR.
• Техническая инструкция по применению.
• Таблица интерпретации результатов.
• Лист регистрации результатов.

Необходимые материалы, не входящие в комплект

• Стандарт Мак-Фарланда.
• Инокуляционные петли.
• Пипетки.
• Обогатительная среда или среда для выделения культуры.

Принцип идентификации

Метод основан на 12 традиционных биохимических тестах, использующих изменение pH и утилизацию субстратов. В процессе инкубации микроорганизмы претерпевают метаболические изменения, которые проявляются изменением цвета среды — самопроизвольно или после добавления реагента.

Тип образца

Чистый изолят из клинического образца или не клинического образца.

Подготовка инокулята

Набор KB005A нельзя использовать непосредственно для исследования клинических образцов. Микроорганизмы, подлежащие идентификации, предварительно выделяют на подходящей среде для изоляции; используют только чистые культуры.

1. Выделите идентифицируемый микроорганизм на стандартной среде, например на питательном агаре (M001) или триптон-соевом агаре (M290).
2. Отберите одну изолированную колонию, внесите её в 5 мл бульона BHI (M210) и инкубируйте при 35–37 °C в течение 4–6 ч до достижения мутности инокулята 0,1 OD при 620 нм или 0,5 по стандарту Мак-Фарланда. Для некоторых микроорганизмов может потребоваться инкубация более 6 ч. В таком случае продолжайте инкубацию до достижения мутности 0,1 OD при 620 нм.
3. В качестве альтернативы отберите 1–3 хорошо изолированные колонии и приготовьте однородную суспензию в 2–3 мл стерильного физиологического раствора. Плотность суспензии должна составлять 0,1 OD при 620 нм.

Внесение инокулята

1. Вскройте набор с соблюдением асептических условий и снимите герметизирующую фольгу.
2. Внесите в каждую лунку по 50 мкл подготовленного инокулята методом поверхностного посева.
3. В качестве альтернативы можно инокулировать набор, прокалывая каждую отдельную лунку инокуляционной петлёй с набранным инокулятом.

Инкубация

• Температура инкубации: 35 ± 2 °C.
• Продолжительность инкубации: 18–24 ч.

Интерпретация результатов

Результаты интерпретируют в соответствии со стандартами, приведёнными в индексе идентификации. Реагенты в лунки № 1 и 3 добавляют в конце периода инкубации, то есть после 18–24 ч.

Технические характеристики и контроль качества

Внешний вид

Стерильная непрозрачная белая полоска с 12 лунками, содержащими среды для тестов Фогеса—Проскауэра, гидролиза эскулина, PYR, ONPG, утилизации аргинина и утилизации 7 углеводов: глюкозы, лактозы, арабинозы, сахарозы, сорбитола, маннитола и раффинозы.

Объём среды

Объём среды в каждой лунке: 0,8 мл.

Проверка стерильности

Соответствует критериям выпуска.

Таблица интерпретации результатов

Реакции по лункам

Тест Фогеса—Проскауэра: лунка № 1

• Добавьте 2–3 капли реагента Баритта A (R029) и 1 каплю реагента Баритта B (R030).
• Положительный результат определяется по появлению розово-красного окрашивания через 5–10 мин.
• Отсутствие изменения цвета или появление медного окрашивания вследствие реакции реагентов A и B указывает на отрицательную реакцию.

Гидролиз эскулина: лунка № 2

• Положительная реакция определяется по изменению кремового цвета на чёрный.
• Отсутствие изменения цвета указывает на отрицательную реакцию.

Тест PYR: лунка № 3

• Добавьте 1–2 капли реагента PYR (R043).
• Положительная реакция определяется по появлению и сохранению вишнёво-красного окрашивания.
• Появление розового, оранжевого или жёлтого окрашивания указывает на отрицательную реакцию.

Тест ONPG: лунка № 4

• Переход цвета от бесцветного к жёлтому указывает на положительную реакцию.
• Отсутствие изменения цвета указывает на отрицательную реакцию.

Утилизация аргинина: лунка № 5

• Изменение цвета от оливково-зелёного или светло-фиолетового к тёмно-фиолетовому указывает на положительную реакцию.
• Отсутств