HiMedia KB005A-10KT Набор для идентификации стрептококков HiStrep (10 наборов)

Набор для идентификации стрептококков HiMedia KB005A-10KT HiStrep (10 наборов) — стандартизированная колориметрическая система на основе 12 биохимических тестов. Набор предназначен для идентификации видов Streptococcus из клинических и неклинических образцов после выделения чистой культуры; прямое исследование клинических образцов не допускается.

Назначение

HiMedia KB005A-10KT применяется для идентификации видов Streptococcus с использованием чистого изолята. Система включает 12 тестов: реакции Фогеса—Проскауэра, гидролиз эскулина, PYR-тест, ONPG-тест, утилизация аргинина и утилизация 7 углеводов — глюкозы, лактозы, арабинозы, сахарозы, сорбитола, маннита и рафинозы.

Идентификация изделия

Комплект набора

Каждый набор содержит 5, 10 или 20 комплектов KB005A; объём материалов рассчитан соответственно на проведение 5, 10 или 20 тестов. Исполнение KB005A-10KT предназначено для 10 тестов.

В состав входят:

• стерильные среды для тестов Фогеса—Проскауэра, гидролиза эскулина, PYR, ONPG, утилизации аргинина;
• стерильные среды для тестов утилизации глюкозы, лактозы, арабинозы, сахарозы, сорбитола, маннита и рафинозы;
• реагент Баритта A (R029) для теста Фогеса—Проскауэра;
• реагент Баритта B (R030) для теста Фогеса—Проскауэра;
• реагент PYR (R043) для PYR-теста;
• техническая инструкция по применению;
• таблица интерпретации результатов;
• лист регистрации результатов.

Материалы, необходимые, но не входящие в комплект

• стандарт МакФарланда;
• инокуляционные петли;
• пипетки;
• обогатительная среда или среда для выделения культуры.

Принцип идентификации

KB005A представляет собой стандартизированную колориметрическую систему, использующую 12 классических биохимических тестов. Тесты основаны на изменении pH и утилизации субстратов. При инкубации микроорганизмы претерпевают метаболические изменения, которые проявляются изменением цвета среды — спонтанно или после добавления соответствующего реагента.

Тип образца

Чистый изолят, полученный из клинического или неклинического образца.

Подготовка инокулята

KB005A нельзя использовать непосредственно для исследования клинических образцов. Микроорганизмы сначала выделяют на подходящей среде; для тестирования используют только чистые культуры.

1. Выделите исследуемый микроорганизм на стандартной среде, например на питательном агаре (M001) или триптон-соевом агаре (M290).
2. Отберите одну изолированную колонию, внесите её в 5 мл бульона BHI (M210) и инкубируйте при 35–37 °C в течение 4–6 ч до достижения мутности инокулята 0,1 OD при 620 нм или показателя 0,5 по стандарту МакФарланда. Для некоторых микроорганизмов может потребоваться инкубация более 6 ч. В таком случае продолжайте инкубацию до достижения мутности 0,1 OD при 620 нм.
3. Альтернативный способ: отберите 1–3 хорошо изолированные колонии и приготовьте однородную суспензию в 2–3 мл стерильного физиологического раствора. Плотность суспензии должна соответствовать 0,1 OD при 620 нм.

Внесение инокулята

1. Вскройте набор с соблюдением асептических условий и удалите герметизирующую фольгу.
2. Внесите в каждую лунку по 50 мкл подготовленного инокулята методом поверхностного посева.
3. В качестве альтернативы каждую лунку можно инокулировать прокалыванием инокуляционной петлёй с набранным инокулятом.

Инкубация

• Температура инкубации: 35 ± 2 °C.
• Продолжительность инкубации: 18–24 ч.

Интерпретация результатов

Результаты интерпретируют в соответствии с критериями, приведёнными в индексе идентификации. Реагенты в лунки № 1 и 3 добавляют в конце инкубации, после 18–24 ч.

Контроль качества

Внешний вид

Стерильная непрозрачная белая полоска с 12 лунками, содержащими среды для тестов Фогеса—Проскауэра, гидролиза эскулина, PYR, ONPG, утилизации аргинина и 7 углеводов: глюкозы, лактозы, арабинозы, сахарозы, сорбитола, маннита и рафинозы.

Количество среды

Объём среды в каждой лунке: 0,8 мл.

Проверка стерильности

Соответствует критериям выпуска.

Трактовка реакций по лункам

Лунка № 1. Тест Фогеса—Проскауэра

• Добавьте 2–3 капли реагента Баритта A (R029) и 1 каплю реагента Баритта B (R030).
• Положительная реакция: появление розово-красного окрашивания через 5–10 мин.
• Отсутствие изменения цвета или медное окрашивание, возникающее вследствие реакции реагентов A и B, указывает на отрицательную реакцию.

Лунка № 2. Гидролиз эскулина

• Положительная реакция: изменение кремового цвета на чёрный.
• Отрицательная реакция: отсутствие изменения цвета.

Лунка № 3. PYR-тест

• Добавьте 1–2 капли реагента PYR (R043).
• Положительная реакция: появление и сохранение вишнёво-красного окрашивания.
• Появление розового, оранжевого или жёлтого окрашивания указывает на отрицательную реакцию.

Лунка № 4. ONPG-тест

• Положительная реакция: изменение цвета с бесцветного на жёлтый.
• Отрицательная реакция: отсутствие изменения цвета.

Лунка № 5. Утилизация аргинина

• Положительная реакция: изменение окрашивания с оливково-зелёного или светло-фиолетового на тёмно-фиолетовое.
• Отрицательная реакция: отсутствие изменения цвета или появление жёлтого окрашивания.

Лунки № 6–12. Ферментация углеводов

• Положительная реакция: изменение цвета на жёлтый.
• Отрицательная реакция: красное окрашивание или отсутствие изменения цвета.

Таблица интерпретации результатов