HiMedia KB005A-10KT Набор для идентификации стрептококков HiStrep (10 наборов)

Набор для идентификации стрептококков HiStrep HiMedia KB005A-10KT (10 наборов) представляет собой стандартизированную колориметрическую систему из 12 тестов. Применяется для видового определения Streptococcus из клинических и неклинических образцов с использованием чистых изолятов.

Принцип измерения

Идентификация основана на использовании двенадцати стандартных биохимических тестов, работа которых базируется на изменении pH и утилизации субстратов. В процессе инкубации микроорганизмы подвергаются метаболическим изменениям, которые проявляются в виде изменения цвета среды (спонтанно или после добавления специфического реагента).

Методика проведения анализа

Подготовка инокулята

Набор KB005A не предназначен для прямого использования с клиническим материалом; микроорганизмы должны быть предварительно изолированы на соответствующих средах. Допускается использование только чистых культур.

1. Изолируйте организм на стандартной среде, например, на питательном агаре (M001) или агаре с триптоном и соей (M290).
2. Перенесите одну изолированную колонию в 5 мл бульона BHI (M210) и инкубируйте при 35–37 °C в течение 4–6 часов до достижения мутности инокулята 0,1 OD при 620 нм или соответствия стандарту МакФарланда 0,5. При необходимости увеличьте время инкубации до достижения указанной плотности.
3. Альтернативный метод: приготовьте гомогенную суспензию 1–3 хорошо изолированных колоний в 2–3 мл стерильного физиологического раствора до достижения плотности 0,1 OD при 620 нм.

Инокуляция набора

1. Асептически откройте набор и снимите защитную фольгу.
2. Внесите в каждую лунку по 50 мкл подготовленного инокулята методом поверхностного нанесения.
3. Альтернативно возможен метод инокуляции путем прокалывания каждой лунки петлей с инокулятом.

Инкубация

• Температура: 35 ± 2 °C.
• Продолжительность: 18–24 часа.

Интерпретация результатов

Результаты оцениваются согласно идентификационному индексу. Реагенты в лунки №1 и №3 добавляются строго по окончании периода инкубации (через 18–24 часа).

Оценка по тестам

• Тест Фогеса-Проскауэра (лунка №1): Добавьте 2–3 капли реагента Баритта А (R029) и 1 каплю реагента Баритта B (R030). Положительная реакция — появление розово-красного цвета через 5–10 минут. Отрицательная — отсутствие изменения цвета или появление медного оттенка.
• Гидролиз эскулина (лунка №2): Изменение цвета с кремового на черный указывает на положительную реакцию.
• Тест на PYR (лунка №3): Добавьте 1–2 капли PYR-реагента (R043). Положительная реакция — появление и сохранение вишнево-красного цвета. Розовый, оранжевый или желтый цвета указывают на отрицательный результат.
• ONPG (лунка №4): Изменение цвета с бесцветного на желтый — положительная реакция.
• Утилизация аргинина (лунка №5): Изменение цвета с оливково-зеленого/светло-пурпурного на темно-пурпурный — положительная реакция. Отсутствие изменений или желтый цвет — отрицательная реакция.
• Ферментация углеводов (лунки №6–12): Изменение цвета на желтый указывает на положительную реакцию. Красный цвет или отсутствие изменений — отрицательная реакция.

Технические характеристики

Сводная таблица тестов

Идентификационный индекс видов Streptococcus

Условные обозначения:

• 90–100 % = +
• 76–89 % = [+]
• 26–75 % = d
• 11–25 % = [-]
• 0–10 % = -
• ND = не обнаружено
• v = вариабельная реакция

Комплект поставки

1. Стерильные среды в лунках для тестов: Фогеса-Проскауэра, гидролиза эскулина, PYR, ONPG, утилизации аргинина и 7 тестов на утилизацию углеводов (глюкоза, лактоза, арабиноза, сахароза, сорбитол, маннит, раффиноза).
2. Реагент Баритта А (R029) для теста VP.
3. Реагент Баритта B (R030) для теста VP.
4. PYR-реагент (R043) для теста PYR.
5. Технический вкладыш.
6. Таблица интерпретации результатов и лист записи данных.

Дополнительное оборудование

Для работы с набором требуются (не входят в комплект):

• Стандарт МакФарланда.
• Инокуляционные петли, пипетки.
• Обогащающие или изолирующие среды.

Ограничения и требования

• Температурный режим: Перед использованием реагенты должны быть доведены до комнатной температуры.
• Особенности ферментации: При слабой реакции в тестах на углеводы следует зафиксировать результат как «±» и продолжить инкубацию до 48 часов. Оранжевый цвет через 48 часов считается отрицательным результатом.
• Точность: Ложноотрицательные результаты возможны при плотности инокулята ниже 0,1 OD.
• Специфика: Результаты более выражены при использовании обогащенной культуры, чем при использовании суспензии.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение: При получении и в процессе хранения — от +2 до +8 °C.
• Срок годности: Согласно этикетке.
• Утилизация: После использования наборы и инструменты (пипетки, петли) подлежат дезинфекции с последующим сжиганием или автоклавированием в специальных пакетах для отходов.

Контроль качества

• Внешний вид: Стерильная белая непрозрачная полоска с 12 лунками, содержащими соответствующие среды.
• **Ко