HiMedia KB004-5KT Набор для идентификации стафилококков HiStaph (5 наборов)

Набор для идентификации стафилококков HiStaph HiMedia KB004-5KT (5 наборов) представляет собой стандартизированную колориметрическую систему из 12 биохимических тестов. Применяется для идентификации и дифференциации представителей рода Staphylococcus из клинических и неклинических образцов с использованием чистых изолятов.

Принцип измерения

Система основана на принципах изменения pH и утилизации субстратов. В процессе инкубации микроорганизмы подвергаются метаболическим изменениям, которые проявляются в виде изменения цвета среды. Изменение цвета может происходить спонтанно или после добавления специфических реагентов.

Область применения

Набор предназначен для работы с чистыми изолятами, полученными из клинических и неклинических проб. Не может быть использован напрямую для анализа клинического материала; предварительно микроорганизмы должны быть выделены на соответствующих изоляционных средах.

Методика проведения анализа

Подготовка инокулята

1. Выделите идентифицируемый организм на общеиспользуемой среде, например, на питательном агаре (M001) или соево-казеиновом агаре (M290).
2. Перенесите одну изолированную колонию в 5 мл бульона BHI (M210) и инкубируйте при 35–37 °C в течение 4–6 часов до достижения мутности инокулята 0,1 OD при 620 нм или 0,5 по стандарту МакФарланда. При необходимости увеличьте время инкубации до достижения указанной плотности.
3. Альтернативный метод: создайте гомогенную суспензию из 1–3 хорошо изолированных колоний в 2–3 мл стерильного физраствора до достижения плотности 0,1 OD при 620 нм.

Инокуляция набора

1. Асептически откройте набор, снимите защитную фольгу.
2. Внесите в каждую лунку по 50 мкл подготовленного инокулята методом поверхностного нанесения.
3. Альтернативно возможен метод инокуляции путем прокалывания (stabbing) каждой лунки петлей с инокулятом.

Инкубация

• Температура: 35–37 °C.
• Продолжительность: 18–24 часа.

Интерпретация результатов

Результаты оцениваются согласно идентификационному индексу. Реагенты в лунки №1 и №2 добавляются строго по окончании периода инкубации (через 18–24 часа).

Интерпретация биохимических тестов

Тест Вогеса-Проскауэра (лунка №1)

• Добавьте 2–3 капли реагента Баритта А (R029) и 1 каплю реагента Баритта B (R030).
• Положительная реакция: появление розово-красного цвета через 5–10 минут.
• Отрицательная реакция: отсутствие изменения цвета или появление медного оттенка.

Тест на фосфатазу (лунка №2)

• Добавьте 1–2 капли 40% раствора гидроксида натрия (NaOH).
• Положительная реакция: появление ярко-розового цвета в течение нескольких секунд.
• Отрицательная реакция: реагент остается бесцветным.

Тест ONPG (лунка №3)

• Положительная реакция: жёлтый цвет.
• Отрицательная реакция: бесцветный.

Тест на уреазу (лунка №4)

• Положительная реакция: розовый цвет.
• Отрицательная реакция: оранжево-жёлтый цвет.

Утилизация аргинина (лунка №5)

• Положительная реакция: пурпурный или тёмно-пурпурный цвет.
• Отрицательная реакция: жёлтый цвет.

Утилизация углеводов (лунки №6–12)

• Положительная реакция: жёлтый цвет.
• Отрицательная реакция: красный или розовый цвет.

Сводная таблица интерпретации результатов

Технические характеристики

• Количество тестов в наборе: 12 биохимических тестов.
• Объем среды в каждой лунке: 0,8 мл.
• Состав тестов: Вогеса-Проскауэра, фосфатаза, ONPG, уреаза, утилизация аргинина и 7 углеводов (маннит, сахароза, лактоза, арабиноза, раффиноза, трегалоза, мальтоза).
• Внешний вид: стерильная белая непрозрачная полоска с 12 лунками.

Комплект поставки

• Наборы KB004 (количество согласно модификации: 5, 10 или 20 тестов).
• Реагент Баритта А (R029) для теста VP.
• Реагент Баритта B (R030) для теста VP.
• Идентификационный индекс.
• Таблица интерпретации результатов и лист записи данных.
• Технический вкладыш.

Дополнительно требуемые материалы (не входят в комплект)

• 40% раствор гидроксида натрия (NaOH) для теста на фосфатазу.
• Стандарт МакФарланда.
• Инокуляционные петли, пипетки.
• Обогащающие / изоляционные среды.

Ограничения и предостережения

• Температурный режим: перед использованием реагенты должны быть доведены до комнатной температуры.
• Слабые реакции: при ферментации углеводов некоторые микроорганизмы дают слабую реакцию (записывается как $\pm$). В таких случаях инкубацию продлевают до 48 часов. Оранжевый цвет через 48 часов считается отрицательным результатом.
• Погрешности: возможны ложноотрицательные результаты, если мутность инокулята ниже 0,1 OD.
• Мутации: в редких случаях результаты могут быть противоречивыми из-за мутаций или влияния сред, использованных для изоляции и культивирования.
• Требования к культуре: использование только чистых культур; прямой анализ клинических проб запрещен.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение при получении: 2–8 °C.
• Срок годности: указан на этикетке.
• Утилизация: после использования наборы и инструменты (петли, пипетки) подлежат дезинфекции с последующим сжиганием или автоклавированием в специальных пакетах.