HiMedia KB004-20KT Набор для идентификации стафилококков HiStaph (20 наборов)

Набор для идентификации стафилококков HiStaph HiMedia KB004-20KT представляет собой стандартизированную колориметрическую систему из 12 биохимических тестов для дифференциации рода Staphylococcus. Применяется для анализа чистых изолятов из клинических и неклинических образцов; включает тесты на утилизацию семи различных углеводов и определение ферментативной активности.

Принцип измерения

Система KB004 основана на принципе изменения pH среды и утилизации субстратов. В процессе инкубации микроорганизмы подвергаются метаболическим изменениям, которые проявляются в виде изменения цвета среды. Изменение цвета может происходить спонтанно или после добавления специфических реагентов.

Область применения

Набор предназначен для идентификации и дифференциации представителей рода Staphylococcus при работе с чистыми культурами, полученными из клинических и неклинических проб. Не предназначен для прямого использования с клиническим материалом; предварительно требуется выделение микроорганизмов на соответствующих изоляционных средах.

Методика проведения анализа

Подготовка инокулята

1. Выделите целевой организм на стандартной среде, например, на питательном агаре (M001) или агаре с триптоном и соей (M290).
2. Перенесите одну изолированную колонию в 5 мл бульона BHI (M210) и инкубируйте при 35–37 °C в течение 4–6 часов до достижения мутности 0,1 OD при 620 нм или стандарта 0,5 по Макфарланду. При необходимости увеличьте время инкубации до достижения указанной оптической плотности.
3. Альтернативный метод: создайте гомогенную суспензию из 1–3 хорошо изолированных колоний в 2–3 мл стерильного физиологического раствора до достижения плотности 0,1 OD при 620 нм.

Инокуляция набора

1. Асептически откройте набор и снимите защитную фольгу.
2. Внесите в каждую лунку по 50 мкл подготовленного инокулята методом поверхностного нанесения.
3. Допускается альтернативный метод инокуляции путем прокалывания каждой лунки петлей с инокулятом.

Инкубация

• Температура: 35–37 °C.
• Продолжительность: 18–24 часа.

Интерпретация результатов

Результаты оцениваются согласно идентификационному индексу. Реагенты в лунки №1 и №2 добавляются строго по окончании периода инкубации (через 18–24 часа).

Оценка конкретных тестов

• Тест Фогеса-Проскауэра (лунка №1): Добавьте 2–3 капли реагента Баритта А (R029) и 1 каплю реагента Баритта B (R030). Положительная реакция — появление розово-красного цвета через 5–10 минут. Отсутствие изменения цвета или медный оттенок — отрицательная реакция.
• Тест на фосфатазу (лунка №2): Добавьте 1–2 капли 40 % раствора гидроксида натрия (NaOH). Положительная реакция — появление ярко-розового цвета в течение нескольких секунд. Отсутствие окрашивания — отрицательная реакция.
• Тест ONPG (лунка №3): Жёлтый цвет — положительная реакция, бесцветный — отрицательная.
• Тест на уреазу (лунка №4): Розовый цвет — положительная реакция, оранжево-жёлтый — отрицательная.
• Утилизация аргинина (лунка №5): Пурпурный или тёмно-пурпурный цвет — положительная реакция, жёлтый — отрицательная.
• Утилизация углеводов (лунки №6–12): Жёлтый цвет — положительная реакция, красный или розовый — отрицательная.

Результаты интерпретации

Технические характеристики

• Формат: белая непрозрачная полоска со 12 лунками.
• Объем среды в каждой лунке: 0,8 мл.
• Количество тестов в наборе: 20.
• Температура хранения при получении: 2–8 °C.

Комплект поставки

• Стерильные среды для тестов (Voges Proskauer, фосфатаза, ONPG, уреаза, утилизация аргинина и 7 углеводов: маннит, сахароза, лактоза, арабиноза, раффиноза, трегалоза, мальтоза).
• Реагент Баритта A (R029) для VP-теста.
• Реагент Баритта B (R030) для VP-теста.
• Идентификационный индекс.
• Таблица интерпретации результатов и лист записи данных.
• Технический вкладыш.

Дополнительные материалы (не входят в комплект)

• 40 % раствор гидроксида натрия (NaOH) для теста на фосфатазу.
• Стандарт МакФарланду.
• Инокуляционные петли, пипетки.
• Обогатительные или изоляционные среды.

Ограничения и предостережения

• Реагенты перед использованием необходимо довести до комнатной температуры.
• При слабой реакции в тестах на ферментацию углеводов результат фиксируется как «±» и инкубация продлевается до 48 часов. Оранжевый цвет через 48 часов считается отрицательным результатом.
• Ошибочные ложноотрицательные результаты могут быть получены при плотности инокулята ниже 0,1 OD.
• Использование обогащённой культуры вместо суспензии делает результаты более выраженными.
• Возможны противоречивые результаты из-за мутаций микроорганизмов или особенностей используемых сред для изоляции и культивирования.