Набор для идентификации HiStaph HiMedia KB004-10KT

Набор для идентификации HiStaph HiMedia KB004-10KT представляет собой стандартизированную колориметрическую систему из 12 биохимических тестов для дифференциации рода Staphylococcus. Применяется для анализа чистых изолятов из клинических и неклинических образцов; основан на принципе изменения pH и утилизации субстратов.

Принцип измерения

Система KB004 использует двенадцать традиционных биохимических тестов. В процессе инкубации микроорганизмы подвергаются метаболическим изменениям, которые проявляются в виде изменения цвета среды. Цвет может измениться спонтанно или после добавления специфического реагента.

Область применения

Набор предназначен для идентификации и дифференциации представителей рода Staphylococcus при использовании чистых культур, выделенных из клинического материала или проб окружающей среды. Не предназначен для прямого использования с клиническими образцами без предварительного выделения на соответствующих селективных средах.

Методика проведения анализа

Подготовка инокулята

1. Выделите идентифицируемый организм на стандартной среде, например, на питательном агаре (M001) или агаре с триптоном и соей (M290).
2. Перенесите одну изолированную колонию в 5 мл бульона BHI (M210) и инкубируйте при 35–37 °C в течение 4–6 часов до достижения мутности 0,1 OD при 620 нм или 0,5 по стандарту МакФарланда. При необходимости увеличьте время инкубации до достижения указанной плотности.
3. Альтернативный метод: создайте гомогенную суспензию из 1–3 изолированных колоний в 2–3 мл стерильного физиологического раствора с плотностью 0,1 OD при 620 нм.

Инокуляция набора

1. Асептически откройте набор, снимите защитную фольгу.
2. Внесите в каждую лунку по 50 мкл подготовленного инокулята методом поверхностного нанесения.
3. Альтернативно возможен метод инокуляции путем прокалывания каждой лунки петлей с инокулятом.

Инкубация

• Температура: 35–37 °C.
• Продолжительность: 18–24 часа.

Интерпретация результатов

Результаты оцениваются согласно идентификационному индексу. Реагенты в лунки №1 и №2 добавляются строго по окончании периода инкубации (через 18–24 часа).

Описание реакций по лункам

• Лунка №1 (Тест Фогеса-Проскауэра): Добавьте 2–3 капли реагента Баритта А (R029) и 1 каплю реагента Баритта B (R030). Положительная реакция — появление розово-красного цвета через 5–10 минут. Отрицательная — отсутствие изменения цвета или появление медного оттенка.
• Лунка №2 (Тест на фосфатазу): Добавьте 1–2 капли 40 % раствора гидроксида натрия (NaOH). Положительная реакция — появление ярко-розового цвета в течение нескольких секунд. Отрицательная — реагент остается бесцветным.
• Лунка №3 (Тест ONPG): Положительная реакция — жёлтый цвет; отрицательная — бесцветный.
• Лунка №4 (Тест на уреазу): Положительная реакция — розовый цвет; отрицательная — оранжево-жёлтый цвет.
• Лунка №5 (Утилизация аргинина): Положительная реакция — пурпурный или тёмно-пурпурный цвет; отрицательная — жёлтый цвет.
• Лунки №6–12 (Утилизация углеводов): Положительная реакция — жёлтый цвет; отрицательная — красный или розовый цвет.

Таблица интерпретации результатов

Технические характеристики

• Количество лунок: 12
• Объем среды в каждой лунке: 0,8 мл
• Вид: стерильная белая непрозрачная полоска с лунками
• Температура инкубации: 35–37 °C
• Время инкубации: 18–24 часа
• Условия хранения: 2–8 °C

Комплект поставки

• Стерильные среды в лунках (на 5/10/20 тестов в зависимости от модификации набора) для тестов:
  • Фогеса-Проскауэра
  • Фосфатазы
  • ONPG
  • Уреазы
  • Утилизации аргинина
  • Утилизации 7 углеводов (маннит, сахароза, лактоза, арабиноза, раффиноза, трегалоза, мальтоза)
• Реагент Баритта A (R029) для VP-теста
• Реагент Баритта B (R030) для VP-теста
• Технический вкладыш
• Идентификационный индекс
• Таблица интерпретации результатов и лист записи данных

Дополнительные требования (не входят в комплект)

• 40 % раствор гидроксида натрия (NaOH) для теста на фосфатазу
• Стандарт МакФарланда
• Инокуляционные петли, пипетки
• Обогатительные / изоляционные среды

Ограничения и предостережения

• Реагенты перед использованием необходимо довести до комнатной температуры.
• При слабой реакции в тестах на ферментацию углеводов следует зафиксировать результат как «±» и продолжить инкубацию до 48 часов. Оранжевый цвет через 48 часов считается отрицательным результатом.
• Ложноотрицательные результаты могут быть получены при плотности инокулята ниже 0,1 OD.
• Результаты более выражены при использовании обогащённой культуры вместо суспензии.
• Использование только для профессиональной диагностики in vitro. Соблюдайте правила работы с инфекционным материалом и асептику при инокуляции.