HiMedia KB003-5KT Набор для идентификации энтеробактерий Hi25 (5 наборов)

Набор для идентификации энтеробактерий HiMedia KB003-5KT Hi25 (5 наборов) представляет собой стандартизированную колориметрическую систему, объединяющую 25 тестов для определения видов семейства Enterobacteriaceae. Применяется для анализа чистых изолятов, полученных из клинических и неклинических образцов; основан на принципах изменения pH и утилизации субстратов.

Принцип измерения

Система Hi25™ базируется на использовании 13 традиционных биохимических тестов и 11 тестов на утилизацию углеводов. В процессе инкубации микроорганизмы подвергаются метаболическим изменениям, которые проявляются в виде изменения цвета среды (спонтанно или после добавления специфического реагента). Тест на оксидазу проводится отдельно с использованием прилагаемых реагентных дисков.

Область применения

Набор предназначен для идентификации чистых культур энтеробактерий, выделенных из клинического материала или проб окружающей среды. Используется в микробиологических лабораториях для дифференциации Enterobacteriaceae от других грамотрицательных палочек.

Методика проведения анализа

Подготовка инокулята

Набор KB003 нельзя использовать непосредственно для анализа клинических образцов; требуется предварительное выделение и очистка культуры.

1. Выделите целевой микроорганизм на общепитательной среде (например, питательный агар M001 или питательный агар для определения оксидазы M1274) или дифференциальной среде (например, агар МакКонки M082).
2. Перенесите одну изолированную колонию в 5 мл бульона BHI (M210). Инкубируйте при 35–37 °C в течение 4–6 часов до достижения мутности 0,1 OD при 620 нм (соответствует стандарту МакФарланда 0,5). Для требовательных организмов время инкубации может быть увеличено.
3. Альтернативный метод: приготовьте гомогенную суспензию 1–3 изолированных колоний в 2–3 мл стерильного физиологического раствора до достижения плотности 0,1 OD при 620 нм.

Тест на оксидазу

Тест является обязательным этапом идентификации:

1. Нанесите изолированную колонию на один оксидазный диск DD018.
2. Интерпретация:
   • Положительная реакция: появление темно-фиолетового цвета в течение 10 секунд.
   • Замедленная положительная реакция: изменение цвета через 10–60 секунд.
   • Отрицательная реакция: отсутствие изменения цвета или его появление спустя более 60 секунд.

Инокуляция набора

1. В асептических условиях откройте набор и снимите защитную фольгу.
2. Внесите по 50 мкл подготовленного инокулята в каждую лунку методом поверхностного нанесения.
3. Допустим альтернативный метод: инокуляция каждой лунки путем прокалывания петлей с инокулятом.

Инкубация и интерпретация

• Температура инкубации: 35–37 °C.
• Продолжительность: 18–24 часа.
• Реагенты в лунки № 5, 6, 9, 10 и 11 первой полоски добавляются строго по окончании периода инкубации (через 18–24 часа).

Технические характеристики и интерпретация результатов

Полоска I (Биохимические тесты)

Полоска II (Гидролиз эскулина и ферментация углеводов)

Индекс идентификации видов Enterobacteriaceae