HiMedia KB003-20KT Набор для идентификации энтеробактерий Hi25 (20 наборов)

Набор для идентификации энтеробактерий Hi25 HiMedia KB003-20KT (20 наборов) представляет собой стандартизированную колориметрическую систему, объединяющую 25 биохимических тестов. Применяется для видового определения бактерий семейства Enterobacteriaceae из клинических и неклинических образцов с использованием чистых изолятов.

Принцип измерения

Система основана на использовании 13 традиционных биохимических тестов и 11 тестов на утилизацию углеводов. Принцип работы базируется на изменении pH среды и использовании субстратов: в процессе инкубации микроорганизмы подвергаются метаболическим изменениям, что проявляется либо спонтанным изменением цвета среды, либо после добавления специфических реагентов. Тест на оксидазу проводится отдельно с использованием прилагаемых дисков.

Область применения

Набор предназначен для профессионального использования в микробиологических лабораториях для идентификации чистых культур энтеробактерий. Не может быть использован напрямую для анализа клинического материала; требуется предварительное выделение и очистка микроорганизмов.

Методика проведения анализа

Подготовка инокулята

1. Изолируйте целевой микроорганизм на стандартной среде (например, питательный агар M001, питательный агар для теста на оксидазу M1274 или агар МакКонки M082).
2. Перенесите одну изолированную колонию в 5 мл бульона BHI (M210) и инкубируйте при 35–37 °C в течение 4–6 часов до достижения мутности 0,1 OD при 620 нм (или 0,5 по стандарту МакФарланда). Для требовательных организмов время инкубации может быть увеличено.
3. Альтернативный метод: создать гомогенную суспензию из 1–3 изолированных колоний в 2–3 мл стерильного физраствора до достижения плотности 0,1 OD при 620 нм.

Тест на оксидазу

Тест является обязательным этапом для дифференциации Enterobacteriaceae от других грамотрицательных палочек.

1. Нанесите изолированную колонию на один диск с реагентом оксидазы (DD018).
2. Интерпретация:
   • Положительная реакция: появление темно-фиолетового цвета в течение 10 секунд.
   • Замедленная положительная реакция: изменение цвета в интервале 10–60 секунд.
   • Отрицательная реакция: отсутствие изменений или появление цвета спустя более 60 секунд.

Инокуляция набора

1. Асептически откройте набор и снимите защитную фольгу.
2. Внесите по 50 мкл подготовленного инокулята в каждую лунку методом поверхностного нанесения.
3. Альтернативно возможен метод инокуляции путем прокалывания каждой лунки петлей с инокулятом.

Инкубация и интерпретация

• Температура: 35–37 °C.
• Продолжительность: 18–24 часа.
• Реагенты в лунки № 5, 6, 9, 10 и 11 первой полоски добавляются строго по окончании инкубационного периода (через 18–24 часа).

Технические характеристики

Состав набора (на 20 тестов)

• Полоски Part I: 20 шт.
• Полоски Part II: 20 шт.
• Диски с реагентом оксидазы (DD018).
• Реагент TDA (R036) для теста на дезаминазу фенилаланина.
• Реагент Барритта А (R029) для теста Фогеса-Проскауэра.
• Реагент Барритта B (R030) для теста Фогеса-Проскауэра.
• Индикатор метилового красного (I007) для теста на метиловый красный.
• Реагент Ковача (R008) для теста на индол.
• Сульфаниловая кислота (R015) для теста на нитраты.
• Реагент N,N-диметил-1-нафтиламин (R009) для теста на нитраты.
• Техническая вставка, таблица интерпретации результатов, лист записи данных и идентификационный индекс.

Параметры среды

• Объем среды в каждой лунке: 0,8 мл.
• Состав полоски 1: среды для тестов на ONPG, утилизацию лизина и орнитина, уреазу, дезаминацию фенилаланина (TDA), восстановление нитратов, продукцию H₂S, утилизацию цитрата, тест Фогеса-Проскауэра, метиловый красный, индол и малонат.
• Состав полоски 2: тесты на гидролиз эскулина и утилизацию 11 углеводов (арабиноза, ксилоза, адонитол, рамноза, целлобиоза, мелибиоза, сахароза, раффиноза, трегалоза, глюкоза, лактоза).

Интерпретация результатов

Полоска I (Биохимические тесты)

Полоска II (Гидролиз и углеводы)

Идентификационный индекс видов Enterobacteriaceae