HiMedia KB002-5KT Ассортиментный биохимический тест-набор HiAssorted (5 наборов)

Ассортиментный биохимический тест-набор HiAssorted HiMedia KB002-5KT для идентификации грамотрицательных палочек. Система включает 12 стандартных биохимических тестов, основанных на изменении pH и утилизации субстратов.

Принцип работы

Набор KB002 представляет собой стандартизированную колориметрическую систему идентификации. В процессе инкубации микроорганизмы подвергаются метаболическим изменениям, которые проявляются в виде изменения цвета среды. Изменение цвета может происходить спонтанно или после добавления специфического реагента.

Область применения

Набор предназначен для идентификации чистых культур грамотрицательных палочек, выделенных из клинических и неклинических образцов. Как правило, данные организмы характеризуются отрицательной реакцией на оксидазу и положительной реакцией на нитраты.

Комплект поставки

Набор KB002-5KT содержит материалы для проведения 5 тестов:

• Стерильные среды в лунках для следующих определений:
  • Утилизация цитрата;
  • Утилизация лизина;
  • Утилизация орнитина;
  • Активность уреазы;
  • Дезаминация фенилаланина;
  • Восстановление нитратов;
  • Продукция H₂S;
  • Утилизация 5 углеводов: глюкозы, адонитола, лактозы, арабинозы, сорбитола.
• Сульфаниловая кислота 0,8 % (R015) для теста на нитраты.
• Раствор $\alpha$-нафтиламина (R009) для теста на нитраты.
• Реагент TDA (R036) для теста на дезаминацию фенилаланина.
• Индекс идентификации.
• Таблица интерпретации результатов и лист записи данных.
• Технический вкладыш.

Дополнительно требуемые материалы (не входят в комплект)

• Стандарт МакФарленда.
• Инокуляционные петли, пипетки.
• Обогатительные или изоляционные среды.

Методика проведения анализа

Подготовка инокулята

1. Выделите целевой микроорганизм на стандартной среде, например, на питательном агаре (M001) или агаре с триптоном и соей (M290).
2. Перенесите одну изолированную колонию в 5 мл бульона BHI (M210) и инкубируйте при 35–37 °C в течение 4–6 часов до достижения мутности 0,1 OD при 620 нм или стандарта 0,5 по МакФарленду. При необходимости увеличить время инкубации до достижения указанной оптической плотности.
3. Альтернативный метод: создать гомогенную суспензию из 1–3 изолированных колоний в 2–3 мл стерильного физиологического раствора до достижения 0,1 OD при 620 нм.

Инокуляция набора

1. Асептически откройте набор, снимите защитную фольгу.
2. Внесите в каждую лунку по 50 мкл подготовленного инокулята методом поверхностного посева.
3. Альтернативно возможен метод инокуляции путем прокалывания каждой лунки петлёй с инокулятом.

Инкубация и интерпретация

• Температура инкубации: 35–37 °C.
• Продолжительность: 18–24 часа.
• Интерпретация: проводится согласно индексу идентификации. Реагенты в лунки № 5 и № 6 добавляются строго по окончании периода инкубации (через 18–24 часа).

Интерпретация результатов

Описание реакций по лункам

• Лунна № 1 (Цитрат): Положительная реакция — изменение цвета на синий. Отрицательная — зеленый цвет или отсутствие изменений.
• Лунка № 2 (Лизин): Положительная реакция — изменение цвета на пурпурный / темно-пурпурный. Отрицательная — желтый цвет или отсутствие изменений.
• Лунка № 3 (Орнитин): Положительная реакция — изменение цвета на пурпурный / темно-пурпурный. Отрицательная — желтый цвет или отсутствие изменений.
• Лунка № 4 (Уреаза): Положительная реакция — изменение цвета на розовый. Отрицательная — отсутствие изменений.
• Лунка № 5 (Дезаминация фенилаланина): Добавить 2–3 капли реагента TDA (R036). Положительная реакция — появление темно-зеленого цвета в течение одной минуты. Отрицательная — отсутствие изменений.
• Лунка № 6 (Восстановление нитратов): Добавить 1–2 капли сульфаниловой кислоты (R015) и 1–2 капли реагента N,N-диметил-1-нафтиламина (R009). Положительная реакция — немедленное появление розово-красного окрашивания. Отрицательная — отсутствие изменений.
• Лунка № 7 (Продукция H₂S): Положительная реакция — изменение оранжево-желтого цвета на черный. Отрицательная — отсутствие изменений или слабый желтовато-коричневый цвет.
• Лунки № 8–12 (Ферментация углеводов): Положительная реакция — изменение цвета на желтый. Отрицательная — красный цвет или отсутствие изменений.

Сводная таблица интерпретации

Индекс идентификации грамотрицательных палочек