HiMedia KB002-20KT Ассортиментный биохимический тест-набор HiAssorted (20 наборов)

Ассортиментный биохимический тест-набор HiAssorted HiMedia KB002-20KT для идентификации грамотрицательных палочек. Система включает 12 стандартных биохимических тестов, основанных на изменении pH и утилизации субстратов.

Принцип измерения

Набор KB002 представляет собой стандартизированную колориметрическую систему идентификации. В основе тестов лежит принцип изменения pH среды и утилизации специфических субстратов микроорганизмами. В процессе инкубации метаболические изменения проявляются в виде смены цвета среды, которая может происходить спонтанно или после добавления специфического реагента.

Область применения

Набор предназначен для идентификации чистых изолятов грамотрицательных палочек (обычно оксидаза-отрицательных и нитрат-положительных), выделенных из клинических и неклинических образцов.

Комплект поставки

• Стерильные среды в лунках для следующих тестов:
  • Утилизация цитрата;
  • Утилизация лизина;
  • Утилизация орнитина;
  • Определение уреазы;
  • Тест на деаминацию фенилаланина;
  • Восстановление нитратов;
  • Тест на продукцию H₂S;
  • Утилизация 5 углеводов: глюкозы, адонитола, лактозы, арабинозы, сорбитола.
• Сульфаниловая кислота 0,8 % (R015) для теста на нитраты.
• Раствор $\alpha$-нафтиламина (R009) для теста на нитраты.
• Реагент TDA (R036) для определения деаминации фенилаланина.
• Индекс идентификации.
• Таблица интерпретации результатов и лист регистрации данных.
• Техническая вставка.

Методика проведения анализа

Подготовка инокулята

1. Изолируйте исследуемый организм на стандартной среде, например, питательном агаре (M001) или агаре с триптоном и соевым digests (M290).
2. Перенесите одну изолированную колонию в 5 мл бульона BHI (M210) и инкубируйте при 35–37 °C в течение 4–6 часов до достижения мутности 0,1 OD при 620 нм или стандарта 0,5 по МакФарланду. При необходимости увеличить время инкубации до достижения указанной плотности.
3. Альтернативный метод: создать гомогенную суспензию из 1–3 изолированных колоний в 2–3 мл стерильного физиологического раствора до плотности 0,1 OD при 620 нм.

Инокуляция набора

1. Асептически откройте набор, снимите защитную фольгу.
2. Внесите в каждую лунку по 50 мкл инокулята методом поверхностного посева.
3. Альтернативно возможен метод инокуляции путем прокалывания каждой лунки петлёй с инокулятом.

Инкубация и интерпретация

• Температура инкубации: 35–37 °C.
• Продолжительность: 18–24 часа.
• Интерпретация результатов проводится согласно индексу идентификации. Реагенты в лунки № 5 и № 6 добавляются строго по окончании периода инкубации (через 18–24 часа).

Интерпретация результатов

Описание реакций по лункам

1. Тест на цитрат (лунка № 1): Положительная реакция — изменение цвета на синий. Отрицательная — зеленый цвет или отсутствие изменений.
2. Утилизация лизина (лунка № 2): Положительная реакция — изменение цвета на пурпурный / темно-пурпурный. Отрицательная — отсутствие изменений или желтый цвет.
3. Утилизация орнитина (лунка № 3): Положительная реакция — изменение цвета на пурпурный / темно-пурпурный. Отрицательная — отсутствие изменений или желтый цвет.
4. Тест на уреазу (лунка № 4): Положительная реакция — изменение цвета на розовый. Отрицательная — отсутствие изменений.
5. Деаминация фенилаланина (лунка № 5): Добавить 2–3 капли реагента TDA (R036). Положительная реакция — появление темно-зеленого цвета в течение одной минуты. Отрицательная — отсутствие изменения цвета.
6. Восстановление нитратов (лунка № 6): Добавить 1–2 капли сульфаниловой кислоты (R015) и 1–2 капли реагента N,N-диметил-1-нафтиламина (R009). Положительная реакция — немедленное появление розово-красного окрашивания. Отрицательная — отсутствие изменений.
7. Продукция H₂S (лунка № 7): Положительная реакция — изменение цвета с оранжево-желтого на черный. Отрицательная — отсутствие изменений или слабый желтовато-коричневый цвет.
8. Ферментация углеводов (лунки № 8–12): Положительная реакция — изменение цвета на желтый. Отрицательная — красный цвет или отсутствие изменений.

Сводная таблица интерпретации