HiMedia KB002-10KT Ассортиментный биохимический тест-набор HiAssorted (10 наборов)

Ассортиментный биохимический тест-набор HiAssorted HiMedia KB002-10KT для идентификации грамотрицательных палочек. Система включает 12 стандартных биохимических тестов, основанных на принципе изменения pH и утилизации субстратов.

Принцип измерения

Набор KB002 представляет собой стандартизированную колориметрическую систему идентификации. В основе тестов лежит регистрация метаболических изменений микроорганизмов, которые проявляются в виде изменения цвета среды (спонтанно или после добавления специфического реагента).

Область применения

Набор предназначен для идентификации чистых культур грамотрицательных палочек, выделенных из клинических и неклинических образцов. Как правило, данные организмы являются оксидаза-отрицательными и нитрат-положительными.

Комплект поставки

• Стерильные среды в лунках для следующих тестов:
  • Утилизация цитрата;
  • Утилизация лизина;
  • Утилизация орнитина;
  • Определение уреазы;
  • Тест на деаминацию фенилаланина;
  • Восстановление нитратов;
  • Тест на продукцию H₂S;
  • Утилизация 5 углеводов: глюкозы, адонитола, лактозы, арабинозы, сорбитола.
• Сульфаниловая кислота 0,8 % (R015) для теста на нитраты.
• Раствор $\alpha$-нафтиламина (R009) для теста на нитраты.
• Реагент TDA (R036) для теста на деаминацию фенилаланина.
• Технический вкладыш.
• Индекс идентификации.
• Таблица интерпретации результатов и лист регистрации данных.

Методика проведения анализа

Подготовка инокулята

1. Выделите исследуемый микроорганизм на стандартной среде, например, питательном агаре (M001) или агаре с триптоном и соей (M290).
2. Перенесите одну изолированную колонию в 5 мл бульона BHI (M210) и инкубируйте при 35–37 °C в течение 4–6 часов до достижения оптической плотности 0,1 OD при 620 нм (или соответствия стандарту МакФарленда 0,5). При необходимости увеличьте время инкубации до достижения указанной плотности.
3. Альтернативный метод: создайте гомогенную суспензию из 1–3 изолированных колоний в 2–3 мл стерильного физиологического раствора до достижения плотности 0,1 OD при 620 нм.

Инокуляция набора

1. В асептических условиях откройте набор и снимите защитную фольгу.
2. Внесите в каждую лунку по 50 мкл подготовленного инокулята методом поверхностного посева.
3. Альтернативно возможен метод инокуляции путем прокалывания каждой лунки петлей с инокулятом.

Инкубация и интерпретация

• Температура инкубации: 35–37 °C.
• Продолжительность: 18–24 часа.
• Интерпретация результатов проводится согласно индексу идентификации. Реагенты в лунки № 5 и № 6 добавляются строго по окончании периода инкубации (через 18–24 часа).

Интерпретация результатов

Описание реакций по лункам

1. Тест на цитрат (лунка № 1): изменение цвета на синий — положительная реакция; зеленый цвет или отсутствие изменений — отрицательная реакция.
2. Утилизация лизина (лунка № 2): изменение цвета на пурпурный / темно-пурпурный — положительная реакция; отсутствие изменений или желтый цвет — отрицательная реакция.
3. Утилизация орнитина (лунка № 3): изменение цвета на пурпурный / темно-пурпурный — положительная реакция; отсутствие изменений или желтый цвет — отрицательная реакция.
4. Тест на уреазу (лунка № 4): изменение цвета на розовый — положительная реакция; отсутствие изменений — отрицательная реакция.
5. Деаминация фенилаланина (лунка № 5): после добавления 2–3 капель реагента TDA (R036) появление темно-зеленого цвета в течение одной минуты — положительная реакция; отсутствие изменений — отрицательная реакция.
6. Восстановление нитратов (лунка № 6): после добавления 1–2 капель сульфаниловой кислоты (R015) и 1–2 капель реагента N,N-диметил-1-нафтиламина (R009) немедленное появление розово-красного цвета — положительная реакция; отсутствие изменений — отрицательная реакция.
7. Продукция H₂S (лунка № 7): изменение цвета с оранжево-желтого на черный — положительная реакция; отсутствие изменений или слабый желтовато-коричневый цвет — отрицательная реакция.
8. Ферментация углеводов (лунки № 8–12): изменение цвета на желтый — положительная реакция; красный цвет или отсутствие изменений — отрицательная реакция.

Сводная таблица интерпретации

Индекс идентификации грамотрицательных палочек