HiMedia KB002-10KT Ассортиментный биохимический тест-набор HiAssorted (10 наборов)

Биохимический тест-набор HiMedia KB002-10KT Ассортиментный биохимический тест-набор HiAssorted (10 наборов) производства HiMedia включает 12 стандартизированных тестов для идентификации грамотрицательных палочек. Набор предназначен для биохимической идентификации чистых изолятов из клинических и неклинических образцов и не применяется непосредственно для клинических образцов.

Назначение

KB002 — комбинация из 12 биохимических тестов для идентификации грамотрицательных палочек. Такие микроорганизмы обычно являются оксидазоотрицательными, нитратположительными палочками и часто выделяются из клинических и неклинических образцов.

Тип образца: чистый изолят из клинического образца или неклинической пробы.

Набор нельзя использовать непосредственно с клиническими образцами: микроорганизмы предварительно выделяют на подходящей изоляционной среде и используют только чистые культуры.

Принцип идентификации

KB002 представляет собой стандартизированную колориметрическую систему идентификации на основе 12 традиционных биохимических тестов. Тесты основаны на изменении pH и утилизации субстратов. Во время инкубации микроорганизмы претерпевают метаболические изменения, которые проявляются изменением окраски среды — визуально непосредственно или после добавления реагента.

Состав набора

Каждый набор содержит 5, 10 или 20 комплектов KB002, рассчитанных соответственно на выполнение 5, 10 или 20 тестов. Для артикула KB002-10KT предусмотрено 10 наборов.

В состав входят:

• стерильные среды для утилизации цитрата;
• стерильные среды для утилизации лизина;
• стерильные среды для утилизации орнитина;
• среда для выявления уреазы;
• среда для теста декарбоксилирования фенилаланина;
• среда для восстановления нитрата;
• среда для выявления образования H₂S;
• пять углеводов для теста утилизации: глюкоза, адонитол, лактоза, арабиноза и сорбитол;
• техническая инструкция;
• индекс идентификации;
• 0,8%-ная сульфаниловая кислота R015 для нитратного теста;
• раствор α-нафтиламина R009 для нитратного теста;
• реагент TDA R036 для декарбоксилирования фенилаланина;
• таблица интерпретации результатов;
• бланк регистрации результатов.

Технические характеристики

• Количество тестов: 12
• Количество лунок: 12
• Объём среды в каждой лунке: 0,8 мл
• Форма: стерильная белая непрозрачная полоска с 12 лунками
• Назначение: идентификация грамотрицательных палочек
• Тип образца: чистый изолят из клинического или неклинического образца
• Условия инкубации: 35–37 °C, 18–24 ч
• Температура хранения и транспортирования при получении: 2–8 °C
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке
• Проверка стерильности: соответствует критериям выпуска

Материалы и оборудование, необходимые для работы

В комплект не входят:

1. стандарт Мак-Фарланда;
2. инокуляционные петли и пипетки;
3. обогатительная или изоляционная среда.

Методика подготовки инокулята

1. Выделите идентифицируемый микроорганизм на стандартной среде, например на питательном агаре M001 или триптон-соевом агаре M290.
2. Отберите одну изолированную колонию, внесите её в 5 мл бульона BHI M210 и инкубируйте при 35–37 °C в течение 4–6 ч до достижения мутности инокулята 0,1 оптической плотности при 620 нм или стандарта Мак-Фарланда 0,5. Для некоторых микроорганизмов может потребоваться инкубация более 6 ч. В таком случае инкубируйте до достижения мутности 0,1 оптической плотности при 620 нм.
3. В качестве альтернативы приготовьте инокулят из 1–3 хорошо изолированных колоний, приготовив однородную суспензию в 2–3 мл стерильного физиологического раствора. Плотность суспензии должна соответствовать 0,1 оптической плотности при 620 нм.

Методика инокуляции набора

1. Вскройте набор с соблюдением асептических условий.
2. Снимите герметизирующую фольгу.
3. Внесите в каждую лунку по 50 мкл подготовленного инокулята методом поверхностного посева.
4. В качестве альтернативы каждую отдельную лунку можно инокулировать прокалыванием инокуляционной петлёй, смоченной инокулятом.

Инкубация и первичная интерпретация

Температура инкубации: 35–37 °C.

Продолжительность инкубации: 18–24 ч.

Интерпретируйте результаты в соответствии с критериями, приведёнными в индексе идентификации. Реагенты в лунки 5 и 6 добавляйте в конце периода инкубации, то есть после 18–24 ч.

Интерпретация отдельных тестов

1. Утилизация цитрата — лунка 1

• Положительный результат: изменение окраски на синюю.
• Отрицательный результат: зелёная окраска или отсутствие изменения окраски.

2. Утилизация лизина — лунка 2

• Положительный результат: изменение окраски на фиолетовую или тёмно-фиолетовую.
• Отрицательный результат: отсутствие изменения окраски или жёлтая окраска.

3. Утилизация орнитина — лунка 3

• Положительный результат: изменение окраски на фиолетовую или тёмно-фиолетовую.
• Отрицательный результат: отсутствие изменения окраски или жёлтая окраска.

4. Тест на уреазу — лунка 4

• Положительный результат: изменение окраски на розовую.
• Отрицательный результат: отсутствие изменения окраски.

5. Декарбоксилирование фенилаланина — лунка 5

1. Добавьте 2–3 капли реагента TDA R036.
2. Положительный результат: появление тёмно-зелёной окраски в течение 1 мин.
3. Отрицательный результат: отсутствие изменения окраски.

6. Восстановление нитрата — лунка 6

1. Добавьте 1–2 капли сульфаниловой кислоты R015.
2. Добавьте 1–2 капли реагента N,N-диметил-1-нафтиламина R009.
3. Положительный результат: немедленное появление розовато-красной окраски после добавления реагентов.
4. Отрицательный результат: отсутствие изменения окраски.

7. Образование H₂S — лунка 7

• Положительный результат: изменение окраски от оранжево-жёлтой до чёрной.
• Отрицательный результат: отсутствие изменения окраски или появление слегка желтовато-коричневой окраски.

8–12. Ферментация углеводов — лунки 8–12

• Положительный результат: изменение окраски на жёлтую.
• Отрицательный результат: красная окраска или отсутствие изменения окраски.

Исследуемые углеводы:

• лунка 8 — глюкоза;
• лунка 9 — адонитол;
• лунка 10 — лактоза;
• лунка 11 — арабиноза;
• лунка 12 — сорбитол.

Таблица интерпретации результатов

Индекс идентификации грамотрицательных палочек